姜广涛(黑龙江省鹤岗矿业集团有限责任公司肿瘤医院154100)
【关键词】免疫TORCH临床检验
【中图分类号】R392【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2013)37-0073-01
TORCH是指一组病原体:T即刚地弓形虫,O即others,比如乙型肝炎病毒、HIV病毒、梅毒螺旋体等;R即风疹病毒,C即巨细胞病毒,H即单纯疱疹病毒。这是一组可通过宫内感染直接影响胎儿发育,并引起相似临床症状和体征如围产期感染、流产、死胎、早产、先天性畸形和智力障碍等的感染因素,值得深入关注[1]。TORCH感染的抗体检查在许多地区已作为孕期检查的常规项目。
1弓形体感染的免疫学检测
1.1原理:该ELISA试剂盒用于体外定量检测人抗鼠弓形体IgG类抗体。试剂盒中每个微孔板条有8个可拆分的包被有鼠弓形体抗原的微孔。在第一次温育时,稀释后的标本在微孔中反应。如果标本阳性,特异性的IgG(也包括IgA和IgM)与抗原结合。为了检测结合的抗体,加入酶标抗人IgG抗体(酶结合物)进行第二次温育。然后加入酶底物,发生颜色反应。颜色的深浅与抗鼠弓形体抗体的浓度成正比。
1.2主要临床意义:目前抗弓形体抗体的检测仍占主要地位。由于弓形体是机会性感染的病原体,如果仅诊断出弓形体感染,而未能判断此感染是处于急性期,还是非急性期(亚急性或隐性期),对临床诊治指导意义不大。为此,通过特异性抗体(IgG、IgM、IgA等)的定性或定量检测来进行临床感染的分期诊断。特异性IgM抗体在原虫感染后1周即可测到,2~4周达高峰,持续3~6月后逐渐降低、消失[1]。所以,抗弓形体IgM抗体阳性一般代表近期感染或继发活动感染。但近来有报道弓形体感染的缓解期乃至初发感染的1~2年后IgM抗体持续阳性。因此,只凭单一的IgM抗体阳性诊断为急性弓形体感染的观点存在片面性。即便如此,IgM抗体的检测结果对疾病的分期仍具重要价值[2]。尤其是IgM分子不能通过胎盘,故一旦脐血中检出特异性IgM抗体,即可诊断先天性弓形体感染。值得注意的是,脐血特异性IgM抗体测定诊断宫内感染应注意妊娠孕周,以免出现假阳性诊断。特异性IgG抗体在血清中出现较晚,但持续时间较长甚至终身,除复查抗体时滴度大于原抗体水平的4倍以上,一般仅代表既往感染。IgG分子小,可通过胎盘至脐血循环,故脐血中仅IgG抗体阳性一般无临床意义。特异性IgA抗体的检测亦有助于感染时间的判定,因为IgA滴度的动态变化同IgM相似,在血清中出现得较早且消失亦快,略早于IgM抗体。特异性IgE检测似乎仅适宜于感染初期,因为IgE抗体的诱导依赖于活虫及其分泌排泄抗原的刺激,一般仅存在于初染后4个月内。
2人类巨细胞病毒抗体的检测
2.1原理:该EHSA法试剂盒用于体外半定量检测人抗巨细胞病毒IgM类抗体。试剂盒中每个微孔板条有8个可拆分的包被有巨细胞病毒抗原的微孔。首先,用含有欧蒙IgG/RF吸附剂的标本缓冲液稀释标本,以去除标本中的IgG和RF,检测特异性IgM。在第一次温育时,稀释后的标本在微孔中反应。如果标本阳性,特异性的IgM(也包括IgA)与抗原结合。为了检测结合的抗体,加入酶标抗人IgM抗体(酶结合物)进行第二次温育,然后加入酶底物,发生颜色反应。颜色的深浅与抗巨细胞病毒抗体的浓度成正比[2]。
2.2抗HCMV-IgM阳性或抗HCMV-IgG由阴性转为阳性提示原发感染,若抗HCMV-IgG滴度呈4倍以上增高亦可以提示复发性感染或潜伏病毒的激活感染。抗HCMV-IgM不能通过胎盘,所以脐血或新生儿血IgM抗体阳性可诊断为先天性感染,示胎儿有宫内感染。新生儿检出的抗HCMV-IgG应当与胎传抗体区别。来自母亲IgG抗体一般于出生后逐渐消失。相反,其抗体效价持续高水平或呈上升趋势,提示是新生儿自身产生的抗体。
3风疹病毒感染的免疫学检测
3.1原理:为检测特异性的IgM抗体,首先必须除去病人血清中的IgG型抗体,可以用超速离心、层析或免疫吸附等方法。以防止IgM型类风湿因子与特异性结合的IgG反应导致IgM检测的假阳性,也可避免因特异性IgG与IgM竞争抗原结合位点导致IgM检测的假阴性。该ELISA试剂盒用于体外半定量检测人抗风疹病毒IgM类抗体。试剂盒中每个微孔板条有8个可拆分的包被有风疹病毒抗原的微孔。首先,用含有IgG/RF吸附剂的缓冲液稀释标本,以去除标本中的IgG和RF,检测特异性的IgM。在第一次温育时,稀释后的标本在微孔中反应。如果标本阳性,特异性的IgM(也包括IgA)与抗原结合;为了检测结合的抗体,加入酶标抗人IgM抗体(酶结合物)进行第二次温育,然后加入酶底物,发生颜色反应。颜色的深浅与抗风疹病毒抗体的浓度成正比。
3.2风疹病毒的原发感染即风疹病毒抗体IgG或IgM由阴性转为阳性者,尤其是早孕(孕周≤15周),可引起胎儿先天性风疹综合征,造成畸形、死胎、流产或出生后死亡。抗风疹病毒IgM阳性,代表患者有近期感染。风疹病毒再感染者也能测到IgM抗体,但滴度低,持续时间短。IgG抗体与IgM抗体应答反应几乎同时出现,IgG抗体持续时间可达数十年。对育龄妇女检测IgG抗体,一方面有助于判断是否原发感染,另一方面可了解对风疹的免疫状况。
参考文献
[1]余章斌.蛋白质微阵列技术在检测TORCH感染中的实验研究[D].东南大学,2006年.
[2]陈志辉,林谷珍,唐南洪,张延珍,黄月红.妊娠期ToRCH感染对胎、婴儿生长的影响[J].福建医科大学学报,1997年04期.