沙利度胺抗肿瘤作用及部分机制研究

论文摘要

恶性肿瘤是严重威胁人类健康的主要疾病之一,发病率和死亡率均较高。对于无法手术切除的或手术切除后预防及复发再治疗的恶性肿瘤,化疗仍然是主要治疗手段。但一般的化疗药物普遍存在着选择性差,毒、副作用大,久用易耐药等缺点。寻找安全有效,毒、副作用小的药物是当务之急。沙利度胺（thalidomide,THD）,是一种谷氨酸衍生物,最初用于治疗妊娠期呕吐,但是因为其致畸作用而于20世纪60年代初撤出市场。后来发现对一些免疫性疾病有效。近期发现,THD是一个潜在的抗肿瘤剂。它可能通过抑制新血管产生,调节免疫功能等,发挥抗肿瘤作用。本文以体内、外实验相结合,对沙利度胺抗肿瘤作用及其机制展开探讨。现分述如下:一、沙利度胺体外抗肿瘤作用采用MTT法检测沙利度胺对体外培养的肝癌细胞株增殖抑制作用。沙利度胺6.25-100μmol·L-1剂量下对体外培养的鼠原性HepA和S180肿瘤细胞株和人原性HepG2和HL-60肿瘤细胞株均有抑制作用。药物浓度越高,抑制作用越强,有明显的量效关系。对不同的细胞系抑制作用不同,其IC50值分别为:65.0,70.3,56.4和54.4μmol·L-1。以沙利度胺6.25,25,100μmol·L-1分别作用于上述四种肿瘤细胞,于12,24,36,48,60h观察细胞生长情况,发现沙利度胺对肿瘤细胞有明显的时间效应关系,12-48 h,作用时间越长,抑制作用越强,各组间时效曲线相似。二、沙利度胺体内抗肝癌作用沙利度胺给药连续13天,对荷HepA和S180瘤的小鼠肿瘤生长有明显的抑制作用,沙利度胺20,40,80mg·kg-1×13d的抑瘤率分别为28.1%,38.7%,52.3%（HepA）和26.1%,30.4%,47.8%（S180）;另外,沙利度胺能明显延长荷瘤小鼠的存活时间,沙利度胺20,40,80mg·kg-1的存活延长率分别为26.2%,51.8%,94.4%（HepA）和28.6%,44.5%,66.0%（S180）。三、沙利度胺抗肝癌作用的机制研究经沙利度胺处理后的HepG2细胞,电子显微镜下可见典型的肿瘤细胞凋亡改变。可见体积缩小的凋亡细胞,染色质浓缩致密,并沿核膜分布形成新月状体,凋亡晚期细胞,可见细胞分解为膜包裹的凋亡小体。进行DNA标记,流式细胞仪分析凋亡改变。沙利度胺在6.25-100μmaol·L-1浓度作用HepG2 48h,凋亡率由9.3%上升到35.5%,呈现明显的浓度依赖关系。沙利度胺20,40,80 mg·kg-1明显增加HepA荷瘤小鼠的脾脏指数;沙利度胺20,40,80mg·kg-1组明显增加HepA荷瘤小鼠ConA、LPS诱导的脾淋巴细胞增殖。另外,沙利度胺40,80mg·kg-1明显增加HepA荷瘤小鼠IL-2的产生和NK细胞活性,抑制HepA荷瘤小鼠异常升高的IL-6、TNF-α和NO含量。四.结论沙利度胺体内、外有明显的抗肿瘤作用,其机制可能与增强肿瘤细胞死亡和凋亡,调节免疫功能有关。

论文目录

• 英文缩略词
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• 英文摘要
• 正文:沙利度胺抗肿瘤作用及部分机制研究
• 1.前言
• 2.实验材料
• 2.1 动物
• 2.2 细胞株
• 2.3 药品与试剂
• 2.4 仪器
• 3.实验方法
• 3.1 细胞培养与传代
• 3.2 沙利度胺体外对肿瘤细胞株的抑制作用
• 3.3 沙利度胺对荷瘤小鼠的治疗作用
• 3.4 沙利度胺抗肿瘤作用机制
• 3.5 数据的统计分析
• 4.结果
• 4.1 沙利度胺体外对肿瘤细胞株的生长抑制作
• 4.2 沙利度胺对荷瘤小鼠的治疗作
• 4.3 沙利度胺抗肿瘤作用的机制研究
• 5.讨论
• 6.小结
• 一、沙利度胺体外抗肿瘤作用
• 二、沙利度胺体内抗肿瘤作用
• 三、沙利度胺抗肿瘤作用的机制研究
• 7.参考文献
• 8.致谢
• 9.附录
• 10.综述