论文摘要
目的:探讨野生型RET和RET/PTC融合基因的表达与甲状腺乳头状癌发生、发展及转移的关系。方法:收集新鲜的35例甲状腺乳头状癌、35例癌旁组织及10例正常甲状腺组织，采用巢氏PCR和DNA测序技术检测RET/PTC1、2和3融合基因的表达，实时荧光定量PCR技术检测野生型RET和RET酪氨酸激酶区的表达水平，原位杂交法检测甲状腺乳头状癌RET mRNA的表达来源。结果:1、在35例甲状腺乳头状癌中，17例（48.57%）RET/PTC融合基因阳性，其中15例（42.8%）为RET/PTC1阳性，0例（0.0%）为RET/PTC2阳性，2例（5.71%）为RET/PTC3阳性，阳性病例全部运用DNA测序证实。其它组中未检测到RET/PTC1、2和3融合基因的表达。2、（1） WT-RET mRNA在癌旁组织表达率很低或几乎不表达，其在RET/PTC融合基因阴性组是癌旁组织表达率的2倍（p<0.01）, RET/PTC融合基因阳性组是癌旁组织的表达率的3倍（p<0.01）。（2）RET-TK mRNA在癌旁组织表达率很低或几乎不表达，其在RET/PTC融合基因阴性组表达率是正常组织表达率的2倍（p<0.02）, RET/PTC融合基因阳性组是癌旁组织的表达率的64倍（p<0.00）。（3）癌旁组织和RET/PTC阴性组织中WT-RET和RET-TK表达率没有差异（p>0.05），RET/PTC融合基因阳性的肿瘤组织中RET-TK的表达率比WT-RET明显高（p<0.00）。3、原位杂交结果显示RET mRNA表达于细胞膜和细胞浆，来源于乳头状癌滤泡细胞，而非淋巴细胞和C细胞等。4、测序结果显示RET/PTC1与RET/PTC3的断裂点在RET基因的第11内含子。5、RET/PTC融合基因与临床相关性参数性别、年龄、肿瘤直径、淋巴结转移及临床分期无明显关系（p>0.05）。结论:1.RET/PTC融合基因是PTC的特异性遗传学改变，在成人散发性PTC中表达率不高，其诊断和判断预后的价值不大。2.成人散发性PTC中WT-RET的普遍表达促进了RET/PTC融合基因的发生，且来源于乳头状癌滤泡细胞。3. RET/PTC1与RET/PTC3的断裂点在RET基因的第11内含子。目的:探讨HMGA1和HMGA2基因的表达与甲状腺乳头状癌发生、发展及转移的关系。方法:收集新鲜和石蜡包埋的35例甲状腺乳头状癌、35例癌旁组织及10例正常甲状腺组织，采用实时荧光定量PCR技术检测HMGA1和HMGA2mRNA的表达水平，同时应用免疫组织化学S-P法检测HMGA1和HMGA2蛋白的表达水平。结果:1、（1）HMGA1mRNA在正常组织表达率很低或几乎不表达，癌旁组织是正常组织表达率的1.6倍（p>0.05）,甲状腺乳头状癌组是正常组织的表达率的173.5倍（p<0.00）。（2）HMGA2mRNA在正常组织表达率很低或几乎不表达，癌旁组织是正常组织表达率的1.5倍（p>0.05）,甲状腺乳头状癌组是正常组织的表达率的5.97倍（p<0.01）。（3）癌旁组织和甲状腺正常组织中中HMGA1和HMGA2表达率都很低或几乎不表达，二者相比无统计学意义（p>0.05）；甲状腺乳头状癌组织中HMGA1的表达率比HMGA2明显高，有统计学意义（p<0.000）。2、（1）甲状腺乳头状癌组织中HMGA1蛋白表达与临床分期和淋巴结转移均密切相关（p=0.026；p=0.00）；HMGA1蛋白在正常组织、癌旁组织及癌组织中的表达率依次增高,分别为0.0%（0/10）、11.4%（4/35）、85.7%（30/35）,组间比较有明显差异（ⅹ2=55.51, p <0.000）；HMGA1蛋白的表达与患者的年龄、肿瘤大小、性别均无关（p＞0.05）。（2）甲状腺乳头状癌组织中HMGA2蛋白表达与临床分期和淋巴结转移均密切相关（p=0.003；p=0.00）； HMGA2蛋白在正常组织、癌旁组织及癌组织中的表达率依次增高,分别为0.0%（0/10）、8.16%（3/35）、68.57%（24/35）,组间比较有明显差异（ⅹ2=38.24，p <0.000）；HMGA2蛋白的表达与患者的年龄、肿瘤大小、性别均无关（p＞0.05）。（3）甲状腺乳头状癌中HMGA1与HMGA2阳性表达比较，HMGA1的表达率比HMGA2明显高，有统计学意义（p=0.031<0.05）。结论:1．HMGA1和HMGA2mRNA和蛋白的高表达与甲状腺乳头状癌的发生、发展和转移有关，有助于甲状腺乳头状癌的早期诊断、治疗和预后判断。2．相对于HMGA2，HMGA1是鉴别甲状腺良恶性遗传标记更好分子指标