NAS制剂在体外对H5N1和H9N2亚型和鸡体内对H9N2亚型AIV的抑制作用研究

论文摘要

NAS制剂是由白花蛇舌草、景天、青蒿等多味中草药（部分成份经提取发酵处理）和复合维生素等组成的,经多年的生产性试验和部分实验室试验证明,该制剂不仅对畜禽病毒性疾病有较好的防治效果,而且具有直接杀灭病毒、预防和治疗禽流感的三效合一的作用。本研究首先采用Klein-Defors悬浮杀灭方法,应用NAS制剂对H5N1和H9N2两种强弱病毒进行了杀灭试验研究,试验时取107.63EID50H5N1亚型和108.17EID50 H9N2亚型禽流感病毒悬液分别与浓度为1:40、1:80、1:160、1:320、1:640的那氏制剂按1:9混合,在20±1℃条件下分别作用10分钟和30分钟后,再以10倍稀释成10个稀释浓度,逐一接种鸡胚尿囊腔。药物对照组用浓度0.001g/ml、0.01g/ml、0.1g/ml、1g/ml的利巴韦林代替NAS制剂,同法处理;阳性对照组直接用病毒液接种鸡胚,阴性对照组用灭菌生理盐水代替药物,同法处理;各接种10日龄SPF鸡胚,每个组接种100枚鸡胚（0.1ml/胚）。将接种的鸡胚置于37℃温箱中培养,记录鸡胚死亡情况。至96小时全部取出,逐个取尿囊液做血凝（HA）试验,血凝试验阳性者判为鸡胚感染。试验结果表明:以1:80的NAS制剂与H5N1亚型和H9N2亚型禽流感病毒各作用10min和30min,对病毒的杀灭率均可达到99.99%,有明显的杀病毒作用。以1:160的NAS制剂与H5N1亚型禽流感病毒作用10min和30min,对病毒的杀灭率分别32.39%、99.43%;以1:160的NAS制剂与H9N2亚型禽流感病毒作用10min和30min,对病毒的杀灭率分别32.39%、90%,有良好的杀病毒作用。为了明确NAS制剂在体内是否对AIV具有抑制作用,本文进行了NAS制剂在鸡体内对H9N2亚型禽流感病毒的抑制作用研究。将96只非免疫28日龄石歧杂黄鸡随机分为6组,即NAS制剂高、中、低剂量组、金刚烷胺药物对照组、阳性对照组及阴性对照组。其中,三个NAS制剂组的实验鸡于感染禽流感病毒12h后分别以不同的剂量灌服给药,而金刚烷胺药物组于攻毒12h后以100ppm饮水。试验过程中用棉拭子采集各实验组鸡的咽喉及泄殖腔黏液,进行微量血凝（HA）试验及RT-PCR检测,以确定各实验组鸡的排毒情况。结果表明:以0.2g/kg·d和0.1g/kg·d的剂量NAS制剂原粉对感染了H9N2亚型禽流感病毒的鸡给药3d后,在攻毒感染后第4天体内就检测不到H9N2亚型禽流感病毒。以0.05g/kg·d的剂量NAS制剂原粉对感染了H9N2亚型禽流感病毒的鸡给药3d后,在攻毒感染后第7天体内仍然能检测到H9N2亚型的禽流感病毒。表明NAS制剂对人工感染的H9N2亚型禽流感病毒的实验鸡均有较好的保护作用,与金刚烷胺药物对照及感染不给药组相比,有显著差异。上述NAS制剂在体外对H5N1和H9N2亚型和鸡体内对H9N2亚型AIV的抑制作用试验为进一步探讨NAS制剂在临床防治和使用方面提供了理论依据和实验基础。

论文目录

• 摘要
• Summary
• 前言
• 第一部分 文献综述
• 一、中药抗病毒作用的研究进展
• 1、常见中药抗病毒作用
• 2、中草药抗病毒作用机制
• 3、抗病毒中药研究思路与展望
• 二、禽流感以及禽流感病毒研究进展
• 1、禽流感病毒研究概述
• 2、禽流感病毒流行病学
• 3、禽流感临床诊断及禽流感病毒的分子生物学诊断技术
• 4、禽流感防制措施
• 三、抗流感病毒中草药的研究进展
• 1、常用抗流感病毒的中草药
• 2、筛选抗流感病毒中草药的实验方法
• 3、小结
• 第二部分 研究报告
• 一、NAS 制剂在体外对H5N1 亚型和H9N2 亚型禽流感病毒的杀灭效果研究
• 1、材料和方法
• 2、结果
• 3、讨论
• 二、NAS 制剂在鸡体内对H9N2 亚型禽流感病毒的抑制作用研究
• 1、材料和方法
• 2、结果
• 3、讨论
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 作者简介
• 导师简介