DHA对高饱和脂肪酸负荷所致肝细胞损伤的保护作用与机制

论文摘要

目的：研究DHA对高饱和脂肪酸负荷所致肝细胞损伤的保护作用与分子机制。方法：活体动物实验以SD大雄鼠作为研究对象，分别设置阴性对照组、阳性高饱和脂肪酸组、DHA大剂量干预组、DHA小剂量干预组共四组。分别以饲喂4周和8周作为观察时间点，通过肝脏形态分析、HE染色、油红O染色、Masson染色、生化指标测定以及Real-time PCR等方法来观察分析DHA对肝细胞在高饱和脂肪酸负荷下的保护作用以及分子机制。离体细胞实验以L02肝细胞作为研究对象，通过显微镜观察、油红O染色以及ALT测定来确定高饱和脂肪酸细胞模型中饱和脂肪酸的孵育浓度，再通过高饱和脂肪酸孵育时间梯度得到最优孵育时间，最后设置3个细胞实验组，其中包括：阳性高饱和脂肪酸组、DHA干预组、PBA干预组。采用细胞形态分析、Real-time PCR等方法观察检测各组别中各因子的表达情况。结果：动物实验中，阳性高饱和脂肪酸组出现大面积脂质聚集、炎性浸染，并出现部分纤维化，血脂测定中总胆固醇含量、低密度脂蛋白胆固醇含量显著增加、高密度脂蛋白胆固醇含量显著降低，且该组肝酶活力普遍增加，炎性指标因子、纤维化指标因子以及UPR指标因子普遍上调，而DHA干预组，特别是DHA小剂量干预组，在脂质聚集、细胞形态、血脂含量、肝酶活力、炎性指标因子、纤维化指标因子以及UPR指标因子都显示较阳性高饱和脂肪酸组较好的干预作用。细胞实验中，阳性高饱和脂肪酸组和DTT阳性对照的各个炎性指标因子和UPR指标因子普遍上调，而DHA干预组以及PBA干预组中的各个指标因子普遍下调。结论：通过上述两方面的实验分析得出，高饱和脂肪酸负荷会引起肝细胞内脂滴大量聚集，进而引发了ERS，最终导致了非酒精性脂肪性肝炎和纤维化损伤的发生，而DHA则通过改变肝细胞脂质负荷环境，降低了脂质向肝细胞的聚集，进而降低ERS程度，从而延缓非酒精性脂肪性肝炎和纤维化的发展。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 第二章 DHA 对 SD 大鼠肝脏的保护作用与机制
• 2.1 前言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1 主要试剂
• 2.2.2 主要仪器
• 2.2.3 主要试剂配制
• 2.2.4 实验方法
• 2.3 结果
• 2.3.1 SFA 对肝损伤作用
• 2.3.2 DHA 对肝的保护作用
• 2.3.3 目的基因 mRNA 水平的表达
• 2.4 结论
• 第三章 DHA 对 L02 肝细胞的保护作用与机制
• 3.1 前言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 主要试剂
• 3.2.2 主要仪器
• 3.2.3 主要试剂配制
• 3.2.4 实验方法
• 3.3 实验结果
• 3.3.1 硬脂酸对肝细胞 L02 损伤分析
• 3.3.2 DHA、PBA 对硬脂酸的干预作用
• 3.3.4 目的基因在 mRNA 水平表达情况
• 3.4 结论
• 第四章 讨论
• 参考文献
• 致谢
• 附录 A
• 攻读学位期间的研究成果