论文摘要
固相竞争ELISA（The solid-phase competition ELISA, SPCE）已发展成为一种口蹄疫抗体检测的方法,并被有效地应用到牛血清抗体的检测中。本试验参照OIE标准方法,采用分离于我国的口蹄疫流行毒株建立了口蹄疫Asia-I型抗体SPCE检测方法,并进行了系统的应用研究。为了评估试验的性能,213份阴性参考血清和70份阳性参考血清经过一系列稀释后用于SPCE临界值的确定。以反应的抑制百分率（The percentage inhibition,PI）统计结果,最佳区分阴阳性血清的稀释度是1:32,这个稀释度在两个血清群中不重叠。所有阳性血清的PI都超过40%,而所有阴性血清的PI都低于40%。因而,以40%的PI为临界值,在血清稀释度为1:32时区分阴阳性血清是合适的。根据背景试验和标准差确定,SPCE抗体滴度>1∶4 0为抗体阳性,抗体滴度<1∶2 5为抗体阴性,抗体滴度在1∶25～1∶4 0之间为可疑。确定了试验的临界值后,大量血清用于试验检测中。通过30份牛免疫血清测定,SPCE与LPB-ELISA的相关系数为0.9,与病毒中和试验（The virus neutralization test, VNT）的相关系数为0.72,均属高度相关。试验的敏感性和特异性是评价诊断方法最重要的指标之一,试验中通过检测140份Asia-I型疫苗免疫牛血清、5份攻毒牛血清、51份康复牛血清、310份采自无口蹄疫地区的牛阴性血清以及口蹄疫O型、国外Asia-I型、O型及猪水泡病阳性血清,比较了SPCE和LPB-ELISA的敏感性和特异性。结果表明,SPCE与LPB-ELISA的敏感性分别为96%、97%;特异性均为100%。95份猪、牛血清检样品测结果表明,SPCE与LPB-ELISA以及国外LPB-ELISA的符合率为98%。本试验既保持了LPB-ELISA的敏感性又易于操作,且具有实用性和特效性,因此,可以做为口蹄疫检测与诊断的一种新型方法。