论文摘要
背景: 星形胶质细胞(astrocyte,AST)是体积最大的神经胶质细胞,在脑内分布最为广泛,对维持中枢神经系统(central nervous system,CNS)的正常活动有着非常重要的作用。但相比神经元,星形胶质细胞的功能目前了解得相对较少。因为在体内研究星形胶质细胞要比神经元困难得多,用于研究神经元的一些方法,如电生理、神经递质组织化学示踪法、选择损伤法等均不适用于哺乳动物星形胶质细胞的研究。采用体外培养的方法对星形胶质细胞进行研究就成为神经科学研究者致力的一个方向。 癫痫是神经系统一种常见的疾病,虽然其发病机理目前还不十分清楚,但神经元兴奋性异常增高和兴奋性神经递质与抑制性神经递质的失衡被公认为癫痫发病的两个主要因素。近来研究表明,星形胶质细胞能通过对周围环境的离子调节来影响神经元的兴奋性,还能摄取代谢有关神经递质参与维持脑内神经网络的兴奋与抑制的平衡调节。因此星形胶质细胞在癫痫发病中的作用越来越受到研究者的重视。 红藻氨酸(kainic acid,KA)是一种具有双羧基的酸性氨基酸,为谷氨酸的结构类似物。脑内定向注射或系统给予惊厥剂量的KA,可诱发动物出现实验性癫痫发作。这一模型与人类颞叶癫痫的临床表现和神经病理方面的改变高度相似,已被研究者公认为较理想的人类颞叶癫痫的动物模型。 在对癫痫病灶进行病理检验中发现星形胶质细胞主要表现为增生、肥大等反应性改变,乃至有变性、坏死等损害性变化。但这些研究均为在体实验,由于存在着神经元因素,所以很难说明星形胶质细胞这种改变是神经元痫样放电的原因还是结果,抑或二者共有之。因此离体培养乳鼠海马星形胶质细胞,在红藻氨酸作用下,观察其形念学变化情况将有助于解答上述疑问。 目的: 离体培养星形胶质细胞,经红藻氨酸处理后,观察星形胶质细胞形态学变化,探讨KA对体外培养的星形胶质细胞是否也具有毒性损伤作用。 方法: 1.原代海马星形胶质细胞培养 出生48小时以内的Wistar大鼠乳鼠,雌雄不拘,解剖镜下快速完整分离出双侧海马,切碎,0.25%胰蛋白酶消化20分钟,移入种植液
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