新型固相萃取剂的合成及表征

论文摘要

目前不论是生命领域还是药学界的发展都离不开分析技术这一助跑器。在众多分析手段中,色谱技术一直受到人们的青睐。而固相萃取（Solid Phase Extraction,简称SPE）是一种用途广泛而且越来越受欢迎的样品前处理技术。本文研究合成了两种用于生物大分子分离纯化的新型无孔固相萃取剂。本小组合成了3μm无孔脲醛树脂-二氧化锆复合微球,并用扫描电子显微镜对其进行表征。利用基体表面上的酰胺键与丙烯酸甲酯和乙二胺进行三次马氏加成反应和胺化反应,形成末端为胺基的聚胺基酰胺星型树状间隔臂。再用咪唑法将牛血清白蛋白对其表面进行修饰,制成BSA-UF-ZrO2固相萃取剂。考察了磷酸缓冲溶液含有不同浓度盐溶液时,溶菌酶和卵清蛋白两种蛋白在BSA-UF-ZrO2固相萃取剂上的吸附量和洗脱率的变化。结果表明,BSA-UF-ZrO2固相萃取剂对溶菌酶的最佳吸附时间是4h,最佳介质（缓冲溶液）的pH值是6.0,吸附量最高达53.14 mg/g,最佳洗脱试剂是0. 5 mol/L的NaCl,洗脱率达73.26%,0.125 mol/L的KSCN洗脱率达76.68%;对卵清蛋白的最佳吸附时间是6 h,体系溶液的pH值是6.0,吸附量最高达35.38 mg/g,最佳洗脱试剂是0. 5 mol/L的NaCl,洗脱率达78.05%,0.25 mol/L的KSCN洗脱率达83.07%。本小组还制备了L-phenylatanine-UF-ZrO2固相萃取剂。以溶菌酶和卵清蛋白作为测试蛋白,分别考察了时间、pH值、洗脱试剂及其浓度对吸附量和洗脱率的变化。结果表明,L-phenylatanine-UF-ZrO2固相萃取剂对溶菌酶的最佳吸附时间是6 h,最佳介质（缓冲溶液）的pH值是6.0,吸附量最大达52.94 mg/g,最佳洗脱试剂是0. 25 mol/L的NaCl,洗脱率达71.62%,0.25 mol/L的KSCN洗脱率达76.39%;对卵清蛋白的最佳吸附时间是6 h,体系溶液的pH值是6.0,吸附量最大达36.17 mg/g,最佳洗脱试剂是0.25 mol/L的NaCl,洗脱率达76.63%,0.125 mol/L的KSCN洗脱率达90.52%。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 1.1 高效液相色谱
• 1.1.1 高效液相色谱
• 1.1.2 HPLC 的应用
• 1.1.3 HPLC 的分离原理
• 1.2 亲和色谱
• 1.2.1 亲和色谱的分离原理及其分类
• 1.2.2 亲和色谱的填料
• 1.2.3 新型间隔臂
• 1.2.4 生物配体
• 1.3 固相萃取
• 1.3.1 固相萃取原理
• 1.3.2 固相萃取技术的进展
• 1.3.3 固相萃取剂
• 1.3.4 固相萃取吸附剂种类
• 1.3.5 固相萃取柱的选择原则
• 1.3.6 固相萃取技术与高效液相色谱法联用
• 1.4 本论文选题思想及工作简介
• 第二章 脲醛树脂－二氧化锆复合微球的合成
• 2.1 实验部分
• 2.1.1 试验原理
• 2.1.2 实验试剂和实验仪器
• 2.1.3 实验步骤
• 2.2 复合微球的表征
• 2.2.1 场发射扫描电镜实验结果
• 2.2.2 固体核磁谱图
• 2.2.3 表面酰胺键密度的测定
• 2.2.4 复合微球的灼烧减重实验
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 复合微球的影响因素
• 2.3.2 合成粒径3μm 左右复合微球的最佳条件
• 第三章 固相萃取剂牛血清白蛋白－脲醛树脂－氧化锆复合微球的制备及其性能的评价
• 2 复合微球的改性'>3.1 UF-ZrO₂复合微球的改性
• 3.1.1 树状大分子概述
• 3.1.2 实验原理
• 3.1.3 实验部分
• 2 的合成'>3.2 BSA-UF-ZrO₂的合成
• 3.2.1 概述
• 3.2.2 实验原理
• 3.2.3 实验仪器和试剂
• 3.2.4 BSA 的键合步骤
• 2 复合微球的评价'>3.3 BSA-UF-ZrO₂复合微球的评价
• 3.3.1 BSA-UF-Z102 复合微球的红外谱图
• 3.3.2 扫描电镜实验
• 3.3.3 静态吸附实验
• 3.3.4 静态洗脱实验
• 3.3.5 结果与讨论
• 2复合微球的制备及其评价'>第四章 固相萃取剂L-苯丙氨酸-UF-ZrO₂复合微球的制备及其评价
• 2 复合微球的制备'>4.1 L-苯丙氨酸-UF-ZrO₂复合微球的制备
• 4.1.1 概述
• 4.1.2 实验原理
• 4.1.3 实验仪器和实验试剂
• 4.1.4 实验步骤
• 2 复合微球的评价'>4.2 L-苯丙氨酸-UF-ZrO₂复合微球的评价
• 4.2.1 L-苯丙氨酸-UF-Z102 复合微球的红外谱图
• 4.2.2 电镜扫描实验
• 4.2.3 静态吸附实验
• 4.2.4 静态洗脱实验
• 4.3 结果与讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 发表论文和科研情况说明
• 致谢