云芝氯仿萃取物对肝癌HepG-2细胞的凋亡作用及其机制研究

论文摘要

目的探讨云芝氯仿萃取物对肝癌HepG-2细胞的凋亡作用及其作用机制。方法以人肝癌细胞HepG-2为实验对象,用不同浓度的云芝氯仿萃取物处理不同时间后,MTT Assay方法检测云芝氯仿萃取物对肝癌HepG-2细胞生存抑制率的影响；细胞HE染色方法观察云芝氯仿萃取物对肝癌HepG-2细胞形态学变化；DNA ladder方法栓测云芝氯仿萃取物对肝癌HepG-2细胞DNA片段的影响；蛋白免疫印记（Western Blotting）方法检测云芝氯仿萃取物对肝癌HepG-2细胞的Bax、Bcl-2及Caspase-3蛋白表达的影响：从而探讨云芝氯仿萃取物对HepG-2细胞的作用及机制。结果云芝氯仿萃取物可以促进盯癌HepG2的凋亡。MTT结果显示,云芝氯仿萃取物可以抑制肝癌HepG-2细胞的增殖,随着时间的延长和药物浓度的增加,其抑制作用越明显,当药物浓度为200μmol/L作用时间为48h时,对HepG-2细胞的抑制率为52.3%,接近半数抑制浓度（IC5o）。HE染色结果显示：云芝氯仿萃取物处理的肝癌HepG-2细胞,与对照组相比细胞间距增大,细胞变小、失去原有形态、细胞核皱缩、染色变深、细胞碎裂、可见凋亡小体,并目随着时间和剂量的增加凋亡程度越严重。DNA ladder方法检测结果显示,与对照组相比较,云芝氯仿萃取物低、中、高剂量组作用48h时HepG-2细胞DNA降解成DNA片段,并随着剂量增加,降解作用越明显。Western方法检测云芝氯仿萃取物作用HepG-2细胞48h后,用药组与对照相比,凋亡相关基因Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白表达均有显著性改变：其中Bc1-2蛋白表达显著下降（P<0.01）,Bax、Caspase-3蛋白表达显著升高（P<0.01）。结论云芝氯仿萃取物可以诱导肝癌HepG-2细胞凋亡,并且作用呈剂量和时间依赖性,其机制与Bcl-2表达下调及Bax和Caspse-3农达上调有关。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 第二章 材料
• 第三章 方法
• 第四章 结果
• 第五章 讨论
• 第六章 小结
• 第七章 结论
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 参考文献