啤酒废酵母中RNA提取方法的研究

论文摘要

我国的啤酒生产和消费已连续六年居于世界首位。2007年年产啤酒3515万吨,产生啤酒废酵母约60万吨。作为啤酒生产的下脚料——啤酒废酵母中含有丰富的营养物质,其中RNA含量达6%～8%,是生产RNA的较好原料。对啤酒废酵母的合理利用既可以为啤酒企业创造良好的经济效益,提高入世后的企业竞争力,也有利于保护环境。本实验即是以啤酒废酵母为原料提取RNA,主要研究了盐法、单一酶法（分别是中性蛋白酶法和β-葡聚糖酶法）和双酶法（中性蛋白酶和β-葡聚糖酶共同作用）的最佳提取工艺,其中酶法提取酵母中RNA文献少有报道。同时以活性干酵母做对比实验,主要是为规模化生产RNA提供可选择的原料。结果表明:啤酒废酵母盐法提取RNA优化后最佳条件为:温度100℃,原始pH（5.89～5.95）,NaCl浓度9%,作用时间7h,RNA得率6.28%,纯度91.23%;酶法中中性蛋白酶法较好,最佳提取条件为:温度55℃,pH值6.5,酶用量3%,作用1h,RNA得率3.24%,纯度91.67%。在实际生产中,若综合能源等各方面因素,两种方法均可选。根据实验结果,活性干酵母可作为生产RNA的原料补充。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第1章 前言
• 1.1 酵母菌（Yeast）概述
• 1.2 酵母细胞壁的主要组成成份
• 1.3 啤酒废酵母
• 1.3.1 啤酒酵母
• 1.3.2 啤酒废酵母的回收与综合利用
• 1.4 活性干酵母
• 1.5 核酸
• 1.5.1 核酸的成分、结构及性质
• 1.5.2 核糖核酸的应用
• 1.5.3 我国核酸开发应用概况
• 1.6 啤酒废酵母中RNA 提取的研究现状
• 1.7 本研究的目的与意义
• 第2章 材料与方法
• 2.1 材料与试剂
• 2.2 主要仪器和设备
• 2.3 测定方法
• 2.4 RNA 的提取方法
• 2.4.1 RNA 提取机理
• 2.4.2 工艺流程
• 2.4.3 洗涤、过筛、分离
• 2.4.4 预处理
• 2.4.5 啤酒废酵母中RNA 提取条件的确定
• 2.4.6 加热灭酶
• 2.4.7 离心分离
• 2.4.8 除蛋白质
• 2.4.9 沉淀
• 2.4.10 干燥
• 2.5 效益分析
• 2.5.1 盐法提取RNA 的效益分析
• 2.5.2 中性蛋白酶法提取RNA 的效益分析
• 第3章 结果与讨论
• 3.1 处理后泥状酵母的检测结果
• 3.2 RNA 提取条件的确定
• 3.2.1 盐法提取啤酒废酵母中RNA 条件的确定
• 3.2.2 中性蛋白酶法提取啤酒废酵母中RNA
• 3.2.3 β-葡聚糖酶法提取啤酒废酵母中RNA
• 3.2.4 双酶法提取啤酒废酵母中RNA
• 3.2.5 活性干酵母对比实验
• 3.3 定磷法标准曲线
• 3.4 本章小结
• 结论
• 参考文献
• 致谢