论文摘要
目的:胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率居各种消化系统恶性肿瘤之首。临床上约有60%的胃癌患者虽然经过有效的治疗,但最终死于复发和转移,对人类的健康构成极大的威胁。研究显示胃癌的发生、发展是一个多因素、多步骤的过程。癌基因的激活和抑癌基因的失活是该过程中的重要分子机制之一。癌基因c-K-ras是ras家族的成员之一,定位于12号染色体短臂,除此之外,ras家族还有H-ras和N-ras,共3种类型。Ras基因编码的蛋白质分子量约为21KD（21千道尔顿）,故将ras基因编码的蛋白质称为p21蛋白,p21ras或Ras蛋白。c-K-ras基因编码蛋白质由189个氨基酸组成,分布于胞质内,并以细胞膜内侧面较多,具有与三磷酸鸟苷（guanosine triphosphate,GTP）结合能力和GTP酶活性,是细胞跨膜信号传递的主要物质,向细胞内传递外界信号刺激,参与传导细胞增殖信号的调控系统,调控细胞生长与分化。Ras基因被致癌因素激活时,DNA无控制地复制,其编码蛋白通过影响转录信号的传递过程而干扰细胞生长、分化过程,使细胞恶性生长,造成肿瘤形成或恶变。组织蛋白酶（cathepsin）是人正常细胞溶酶体内的一组半胱氨酸蛋白酶,但在恶性细胞中表达更高。组织蛋白酶B（Cathepsin B,简称CB）是组织蛋白酶的一种,存在于哺乳类动物和人体细胞的溶酶体中,是细胞溶酶体半胱氨酸蛋白酶,可降解Laminin、Fibronectin、Ⅳ型胶原等细胞外基质（extracellular matrix,ECM）成分,继而破坏一系列组织屏障,参与肿瘤的浸润转移。目前有关胃癌组织c-K-ras、CB的研究大多分开报道,而两者相互关系的研究并不多见。本研究采用免疫组织化学方法（S-P法）检测c-K-ras、CB在胃癌组织、正常胃粘膜中的表达情况,分析其与胃癌临床生物学行为的关系,探讨其在胃癌的发生、浸润和转移、分期、预后中的作用,为胃癌的诊治提供新的帮助。方法:选取河北医科大学第四医院外三科2005年10月～2006年8月胃癌手术切除标本共73例。分别采集胃癌组织标本、正常胃粘膜（距肿瘤边缘>5.0cm）。全部胃癌病例术前均未行化疗或放疗,病理证实均为腺癌。采用免疫组织化学方法（S-P法）检测胃癌组织、正常胃粘膜中c-K-ras和CB表达情况,分析二者表达情况与胃癌患者性别、年龄、肿瘤部位、大小、大体分型、分化程度、浸润深度、临床分期等临床生物学行为的关系。所有资料应用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析,P<0.05具有统计学意义。结果:1胃癌组织中c-K-ras的阳性表达率为43.84%,高于正常胃粘膜中的阳性表达率6.85%,二者比较具有显著性差异（P<0.05）。2胃癌组织中CB的阳性表达率为42.47%,高于正常胃粘膜中的阳性表达率2.82%,二者比较具有显著性差异（P<0.05）。3 c-K-ras在胃癌癌灶≥5.0cm组的阳性表达率为49.20%,高于<5.0cm组的阳性表达率27.27%,但二者比较无统计学意义（P=0.085>0.05）;在大体分型中,浸润型胃癌组的阳性表达率为54.35%,高于局限型组的阳性表达率25.93%,二者比较具有显著性差异（P<0.05）;在分化程度中,低分化组的阳性表达率为56.41%,高于高/中分化组的阳性表达率29.42%,二者比较具有显著性差异（P<0.05）;在浸润深度中,T3+T4组的阳性表达率为48.44%,高于T1+T2组的阳性表达率11.11%,二者比较具有显著性差异（P<0.05）;在有淋巴结转移组的阳性表达率为59.09%,高于无淋巴结转移组的阳性表达率20.69%,二者比较具有显著性差异（P<0.05）;在临床分期中Ⅲ-Ⅳ期组的阳性表达率为58.70%,高于I-Ⅱ期组的阳性表达率6.94%,二者比较具有显著性差异（P<0.05）。4 CB在胃癌癌灶≥5.0cm组的阳性表达率为50.98%,高于<5.0cm组的阳性表达率22.73%,二者比较具有显著性差异（P<0.05）;在大体分型中,浸润型组的阳性表达率为54.35%,高于局限型组的阳性表达率22.22%,二者比较具有显著性差异（P<0.05）;在分化程度中,低分化组的阳性表达率为43.60%,高于高/中分化组的阳性表达率41.18%,二者比较差异无显著性（P=0.853>0.05）;在浸润深度中T3+T4组的阳性表达率为46.68%,高于T1+T2组的阳性表达率11.11%,二者比较具有显著性差异（P<0.05）;在有淋巴结转移组的阳性表达率为54.55%,高于无淋巴结转移组的阳性表达率24.14%,二者比较具有显著性差异（P<0.05）;在临床分期中Ⅲ-Ⅳ期组的阳性表达率为54.35%,高于I-Ⅱ期组的阳性表达率22.22%,二者比较具有显著性差异（P<0.05）。5胃癌组织中c-K-ras表达与患者性别、年龄、肿瘤大小及部位均无关（P>0.05）,CB表达与患者性别、年龄、肿瘤分化程度及部位均无关（P>0.05）。6胃癌组织中c-K-ras与CB的表达具有相关性,呈正相关（rs=0.263,P=0.024<0.05）。结论:1胃癌组织中的c-K-ras的阳性表达率较正常胃粘膜升高,说明了c-K-ras基因的激活参与了胃癌的发生;CB阳性表达率明显高于正常胃粘膜,说明了胃癌组织中CB表达增高参与了胃癌的发生发展。2胃癌组织中c-K-ras的表达随着肿瘤分化程度的降低而明显增高;CB的表达随着癌灶的增大而明显增强。c-K-ras和CB的高表达提示胃癌的恶性度增加。3胃癌组织中c-K-ras的表达随着肿瘤浸润深度的加深、淋巴结的转移、临床分期的增加而明显增高;CB的表达随着浸润深度的加深、淋巴结的转移、临床分期的增加而明显增强。c-K-ras和CB的高表达提示胃癌的侵袭和转移能力增强,而肿瘤侵袭转移能力反映患者预后,故胃癌组织中c-K-ras、CB的表达升高间接提示患者预后差。4胃癌组织中c-K-ras表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、大小均无关;CB在胃癌中的表达与患者性别、年龄、肿瘤部位和肿瘤分化程度无关。5胃癌组织中c-K-ras与CB表达具有相关性,呈正相关,提示胃癌发生和侵袭转移过程中两个因子可能具有协同作用。综上所述,胃癌组织中c-K-ras、CB表达的失调在胃癌的发生、发展中发挥着重要的作用。两个指标检测在胃癌侵袭转移的预测、预后评估及指导合理的综合治疗方面等具有重要的临床意义,并为以后胃癌分子生物学分期提供依据。