肝细胞癌中SFRP1、APC基因启动子甲基化状态及mRNA表达的研究

论文摘要

目的探讨肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中SFRP1（secretedFrizzled-related protein1,分泌型Frz受体相关蛋白1）、APC（Adenomatouspolyposis coli,多发性腺瘤样息肉病蛋白）基因启动子甲基化状态及其对mRNA表达的影响。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应（methylation-specific PCR,MSP）和逆转录-聚合酶链反应（ReverseTranscriptase-PCR,RT-PCR）技术,检测30例肝细胞癌及相应的癌旁组织和10例正常对照肝组织中SFRP1、APC基因启动子甲基化状态和mRNA表达水平,分析上述组织中两种基因甲基化及mRNA表达与临床资料的关系并分析甲基化对mRNA表达的影响。结果在肝细胞癌、癌旁及正常对照组中检测到SFRP1基因启动子甲基化率分别是11/30、4/30、0/10;APC基因启动子甲基化率分别是14/30、5/30、0/10,癌组织中SFRP1和APC基因甲基化率均明显高于相应的癌旁组（x2=4.356,P=0.037;x2=6.239,P=0.012）和正常对照组,癌旁组与正常对照组甲基化率比较,差异无显著性。HCC组及癌旁组中SFRP1基因启动子甲基化与各临床资料之间均无相关性。癌组织中APC基因启动子甲基化与患者年龄和癌肿有无假包膜有相关性,患者年龄＜60岁者甲基化率明显高于年龄≥60岁者（P=0.045）,肿瘤无假包膜者甲基化率明显高于肿瘤有假包膜者（P=0.025）;癌旁组织中APC基因启动子甲基化与肿瘤假包膜及肿瘤个数相关,肿瘤无假包膜者其癌旁组织中APC基因启动子甲基化率明显高于肿瘤有假包膜者（P=0.019）,多发性肿瘤患者其癌旁组织中APC基因甲基化率明显高于肿瘤为单发者（P=0.006）。癌组织中SFRP1基因及APC基因甲基化阳性患者与阴性患者的一年无瘤生成率差异均无显著性。癌、癌旁和正常对照组中SFRP1基因mRNA平均相对表达量分别是0.23、0.30和0.32,癌组织相对表达量明显低于相应的癌旁组和正常对照组（P＜0.05）;癌旁组与正常对照组比较,差异无显著性（P=0.48）;SFRP1基因mRNA表达在临床资料各组变量间无显著性差异。甲基化阳性癌组织与阴性癌组织中SFRP1基因mRNA表达之间差异无显著性（P=0.10）。上述三组中APC基因mRNA平均相对表达量是0.76、0.86和0.84,三者之间无显著差异（P＞0.05）;癌组织中APC基因mRNA表达与肿瘤有无假包膜和肿瘤病理分级相关,有假包膜的癌组织中APC mRNA表达比无假包膜的癌组织明显增强;病理分级Ⅰ～Ⅱ的癌组织中APC mRNA表达比Ⅲ级者明显增强。甲基化阳性癌组织与阴性癌组织中APC基因mRNA表达差异亦无显著性（P=0.32）。SFRP1和APC基因甲基化之间以及两种基因的mRNA表达之间均无相关性（P＞0.05）。结论SFRP1和APC基因启动子甲基化均参与了HCC的形成,是HCC的频发事件;APC基因启动子甲基化还可能影响HCC的侵袭和转移;两种基因的甲基化之间以及两种基因的mRNA表达之间均无相关性。癌组织中SFRP1和APC基因启动子甲基化与其mRNA表达的关系有待进一步研究。

论文目录

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• 材料与方法
• 结果
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• 结论
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• 致谢
• 综述
• 参考文献