论文摘要
目的:研究蟾酥胶囊含药血清对人肝癌BEL-7402细胞凋亡的诱导作用及蛋白Bcl-2、Fas、Apo2.7在肝癌凋亡细胞中的表达,探讨蟾酥胶囊诱导人肝癌细胞凋亡的可能机制。 方法:选用纯种成年新西兰大白兔20只,随机分为两组,每组10只,用血清药理学方法,一组制备含药血清,另一组制备无药血清。实验组细胞分别加10%、20%、30%含药血清,对照组细胞加10%无药血清,分别孵育24h、48h,显微镜下观察细胞形态学变化;用台盼蓝染色检测细胞蓝染率;MTT(四甲基偶氮唑盐)比色法检测细胞抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞周期变化及Apo2.7蛋白的阳性表达率;免疫细胞化学法染色检测蛋白Bcl-2、Fas的阳性表达率。 结果:相差显微镜下可见,实验组部分细胞变小、变圆,贴壁能力明显下降,呈漂浮生长状态,集落生长特性明显降低,呈单个生长状态;台盼蓝染色显示,细胞蓝染率无明显变化;MTT比色显示,细胞存活率降低,细胞增殖明显受到抑制;流式细胞仪检测,可见明显的凋亡峰,细胞周期中G1、S期下降,G2/M期升高,Apo2.7蛋白表达增高,细胞凋亡
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