论文摘要
目的:基于“肾藏精,主骨生髓”的理论,本实验采取去卵巢造模方法建立大鼠绝经后骨质疏松症（PMOP）模型,以肾虚为PMOP的主要发病原因出发,研究左归丸对PMOP大鼠的防治作用,并从TGF-β/Smad信号转导途径探讨左归丸防治PMOP大鼠的作用机制。材料与方法:选取91只SPF级4.5月龄SD雌性大鼠,按体重随机分层,每层按数量比暂分为三组:正常（Normal）组13只;假手术（Sham）组13只;其余65只采取双侧背部卵巢切除术进行PMOP造模。造模21d后,将去卵巢大鼠按体重随机分为五组:模型空白（OVX）组、尼尔雌醇（N）组、左归丸高剂量[ZG（H）]组、左归丸中剂量[ZG（M）]组、左归丸低剂量[ZG（L）]组,每组均为13只。然后开始灌胃给药:左归丸各剂量组用左归丸混悬液（高、中、低）进行灌胃;尼尔雌醇组为阳性对照组,灌服尼尔雌醇混悬液;正常组、假手术组和模型空白组均灌服蒸馏水,灌胃期间,各组大鼠每周称重1次,并根据体重调整给药量。实验大鼠连续给药120d后取材,截止取材时,除去灌胃期间死亡的大鼠,取材大鼠共82只。取材前禁食禁水24h,大鼠经腹主动脉取血,室温静置2h后,4℃,3500r·min-1离心30min,取血清,分装,于-70℃冰箱保存,除去溶血血清,用于骨代谢指标及性腺激素水平检测的血清,每组大鼠均为8只;取大鼠左后肢股骨远端1/3,剔除软组织及筋膜,置于4%的多聚甲醛固定液中固定保存,用于病理形态学测定;取大鼠左后肢股骨近端1/3部分,剔除软组织及筋膜,用DEPC水处理过的铝箔纸包裹好,做好标记,迅速置入液氮中速冻,之后放入-70℃冰箱保存,以备RT-PCR方法检测骨组织中TGF-β1、Smad4m RNA的表达;取大鼠右后肢股骨,剔除骨组织上附着的肌肉筋膜,保留骨膜,生理盐水冲洗后,用盐水浸湿过的纱布将其包好,放入保鲜袋中,置-20℃冰箱冻存,用于骨密度（BMD）的检测。结果:1、左归丸对骨组织形态计量学参数的影响（1）骨组织形态学检测光镜下观察,正常组、假手术组大鼠骨小梁完整,连接紧密,有规则,相互之间成网状,骨髓腔较小;模型空白组大鼠骨小梁较紊乱,变细,缺少连接,可见到骨小梁断端。左归丸组（高、中、低）及尼尔雌醇组骨小梁有较显著的增生,骨小梁排列整齐,较粗壮,以尼尔雌醇组和左归丸高剂量组较为显著。（2）骨组织形态计量学测定模型空白组大鼠与假手术组比较,骨小梁面积百分比（%Tb·Ar）、骨小梁厚度（Tb·Th）明显降低,骨小梁分离度（Tb·Sp）明显升高,差异显著（P<0.01）;去卵巢大鼠灌服左归丸及尼尔雌醇后,与模型空白组比较,左归丸高、中、低剂量组及尼尔雌醇组大鼠的%Tb·Ar、Tb·Th明显升高,Tb·Sp明显降低,差异显著（P<0.01）;各用药组之间无显著性差异（P>0.05）。2、左归丸对去卵巢大鼠离体股骨近端1/3骨密度的影响模型空白组大鼠与假手术组相比,离体股骨近端骨密度显著下降（P<0.01）;去卵巢大鼠灌服左归丸及尼尔雌醇后,与模型空白组比较,左归丸高、中、低剂量组及尼尔雌醇组大鼠离体股骨近端骨密度显著升高（P<0.01）,各用药组之间无显著性差异（P>0.05）。3、左归丸对骨代谢指标的影响（1）左归丸对骨形成指标血清BGP的影响模型空白组大鼠与假手术组相比,血清BGP含量显著升高（P<0.01）;去卵巢大鼠灌服左归丸及尼尔雌醇后,与模型空白组比较,左归丸高、中、低剂量组及尼尔雌醇组大鼠血清BGP含量显著下降（P<0.01）,其中以左归丸高、中剂量组的下降趋势较强,各用药组之间无显著性差异（P>0.05）。（2）左归丸对骨吸收指标血清TRAP的影响模型空白组大鼠与假手术组相比,血清TRAP含量显著升高（P<0.01）;去卵巢大鼠灌服左归丸及尼尔雌醇后,与模型空白组比较,左归丸高、中、低剂量组及尼尔雌醇组大鼠血清TRAP含量显著下降（P<0.01）,各用药组之间无显著性差异（P>0.05）。4、左归丸对血清性腺激素的影响模型空白组大鼠与假手术组相比,血清雌二醇（E2）明显下降（P<0.01）,促卵泡生成素（FSH）、促黄体生成素（LH）明显升高（P<0.01）;灌服左归丸各剂量后, E2水平升高（P<0.05）,而FSH、LH明显下降（P<0.05）,各用药组之间无显著性差异。5、左归丸对骨组织中TGF-β1、Smad4 mRNA表达的影响去卵巢后,与假手术组比,模型空白组大鼠骨组织中TGF-β1、Smad4 mRNA水平明显降低（P<0.01）;灌服左归丸各剂量组后,骨组织中TGF-β1、Smad4 mRNA水平显著上升（P<0.01）,各用药组之间无显著性差异（P>0.05）。结论:1、切除大鼠双侧卵巢可成功复制PMOP模型。2、左归丸可以有效防治PMOP。3、骨组织中TGF-β1、Smad4 mRNA表达水平的下调可能是PMOP发生的重要机制之一。4、左归丸能够上调骨组织中TGF-β1、Smad4 mRNA的表达,纠正PMOP骨代谢失衡,其防治PMOP的作用机制可能与其干预TGF-β1、Smad4 mRNA的表达有关。
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- [1].白细胞介素-23通过Smad4调控间充质干细胞成骨分化的机制研究[J]. 骨科 2019(06)
- [2].SMAD4在舌鳞状细胞癌中的表达及意义[J]. 口腔医学 2017(02)
- [3].TβR Ⅰ和Smad4在肝内胆管细胞癌中的表达及意义[J]. 新疆医科大学学报 2010(11)
- [4].Smad4和MMP-9在卵巢上皮性癌组织中的表达及临床意义[J]. 南通大学学报(医学版) 2012(06)
- [5].口腔癌颈淋巴转移患者乏氧诱导因子、白细胞介素-8以及Smad4表达特征分析[J]. 临床口腔医学杂志 2020(11)
- [6].骨形成发生蛋白4和SMAD4在胶质瘤诊断中的意义[J]. 职业与健康 2010(13)
- [7].Smad4在结直肠癌中的研究进展[J]. 中国医药导报 2017(20)
- [8].Smad4和转化生长因子β受体Ⅱ在宫颈腺癌中的表达及意义[J]. 江苏大学学报(医学版) 2009(05)
- [9].胃癌组织中诱捕受体3和抑癌基因Smad4的表达及其临床意义[J]. 检验医学 2009(11)
- [10].Smad4在老年喉鳞癌患者中的表达及其临床意义[J]. 中国现代医学杂志 2018(05)
- [11].Smad4基因在结直肠癌中的研究进展[J]. 实用癌症杂志 2008(04)
- [12].Smad4在非小细胞肺癌中表达的研究[J]. 重庆医学 2011(28)
- [13].胰腺癌组织中转化生长因子β Ⅱ型受体和Smad4的表达及意义研究[J]. 中国医药 2018(06)
- [14].老年肝癌患者血清TGF-β1、Smad4水平及临床意义[J]. 中国老年学杂志 2019(11)
- [15].水牛Smad4基因的克隆及其真核表达载体的构建[J]. 中国畜牧兽医 2017(08)
- [16].前癃通胶囊含药血浆对前列腺间质细胞Smad4基因表达的影响[J]. 中华男科学杂志 2014(08)
- [17].转化生长因子-β和Smad4在绝经过渡期大鼠卵巢颗粒细胞中的表达[J]. 解剖学报 2018(01)
- [18].新疆哈萨克族胃癌患者胃癌组织Smad4蛋白表达及意义[J]. 山东医药 2013(10)
- [19].TGF-β1和Smad4在中重度宫腔粘连组织中的表达及临床意义[J]. 中国妇产科临床杂志 2018(04)
- [20].大黄素通过调节TGF-β1、Smad4抑制人胰腺癌的血管生成[J]. 医学研究杂志 2017(10)
- [21].SMAD4在血管瘤中的表达及意义[J]. 数理医药学杂志 2012(02)
- [22].贲门腺癌中Smad4基因甲基化状态分析[J]. 癌变·畸变·突变 2011(04)
- [23].Smad4蛋白在口腔扁平苔藓发病中的作用[J]. 广东医学 2008(12)
- [24].血清中IL-8、Smad4水平与口腔癌患者预后转归的关系[J]. 实用癌症杂志 2019(12)
- [25].Smad4与P53在乳腺癌中的表达与其病理特征的相关性研究[J]. 齐齐哈尔医学院学报 2011(05)
- [26].Smad4及P21WAF1/CIP1在卵巢上皮癌组织中的表达及意义[J]. 实用癌症杂志 2014(11)
- [27].植物雌激素对大鼠成骨细胞TGF-β信号转导蛋白Smad4表达的影响[J]. 天然产物研究与开发 2010(04)
- [28].青蒿琥酯对人结肠癌细胞侵袭转移及TGF-β1/Smad4信号通路表达的影响[J]. 中国医科大学学报 2019(01)
- [29].苦参碱注射液治疗中晚期舌癌术后患者血清IL-8和Smad4水平的变化[J]. 慢性病学杂志 2020(11)
- [30].红景天对大鼠肝纤维化肝脏组织中TIMP-1、Smad4表达的影响[J]. 中国老年学杂志 2012(12)
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