新型抗烟草花叶病毒的药物筛选及作用机理初步研究

新型抗烟草花叶病毒的药物筛选及作用机理初步研究

论文摘要

本论文采用半叶枯斑法对本中心合成的200多个抗病毒新化合物进行室内生物活性测试,筛选发现了具有较高抗TMV活性的氰基丙烯酸酯类化合物2005196和2006172,即3-苄胺基-3-[1-(R)-4-氟苯基乙基胺基]-2-氰基丙烯酸酯和3-甲硫基-3-(二乙氧基乙基)膦酰基-2-氰基丙烯酸酯,在500μg/mL剂量下的活体治疗抑制率分别为55.6%和53.3%,活体治疗效果与对照药剂宁南霉素相当(活体治疗500μg/mL,51.7%),在活体钝化条件下的抑制率分别达52.5%和80.8%,在活体保护条件下的抑制率分别达60.4%和44.7%;化合物2005196和2006172对TMV活体治疗的EC50值分别为218.7μg/mL和275.4μg/mL。本文进行了抗TMV病盆栽药效试验研究,2005196和2006172药剂处理在250μg/mL剂量下的病情指数均明显低于空白对照区(P<0.05),2005196处理组第45天的防治效果达60.6%。同时观察发现,喷施2005196后,烟草叶片的颜色明显变绿。以上结果表明半叶法摩擦接种的室内活体治疗效果与盆栽试验药效具有一定可比性,这可能意味着2005196在室内生测心叶烟与盆栽试验普通烟K-326叶片中的作用机制具有类似性。因此,本文进行了2005196和2006172抗TMV生化机理初步研究,证明了2005196和2006172处理接种TMV后的烟草植株中,PAL活性、POD活性、SOD活性、PPO活性及叶绿素含量等相关酶和调控物质在一定的时间内都具有相关性。2005196明显诱导了抗性相关酶活性的升高;同时也诱导了叶绿素含量的增加。研究了药剂对烟草病程相关蛋白(PR)的诱导作用,结果显示:药剂2005196诱导烟叶胞间蛋白的种类和TMV刺激烟叶产生的胞间蛋白的种类基本一致。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 前言
  • 第一章 文献综述
  • 1.1 植物病毒病的发生及防治研究进展
  • 1.2 抗植物病毒物质的种类
  • 1.2.1 天然抗植物病毒物质
  • 1.2.2 化学合成抗病毒物质
  • 1.3 抗植物病毒物质的作用机理研究进展
  • 1.3.1 抑制病毒侵染
  • 1.3.2 抑制病毒复制和增殖
  • 1.3.3 抑制病毒症状表达
  • 1.3.4 诱导植物产生抗病性
  • 1.3.5 促进植物生长
  • 1.4 氰基丙烯酸酯类化合物研究进展
  • 1.4.1 具有杀虫活性的氰基丙烯酸酯类似物
  • 1.4.2 具有除草活性氰基丙烯酸酯
  • 1.4.3 具有杀菌活性氰基丙烯酸酯
  • 1.4.4 具有抗癌活性氰基丙烯酸酯
  • 1.4.5 具有抗病毒活性氰基丙烯酸酯
  • 第二章 设计思路及实验路线图
  • 2.1 选题的目的和意义
  • 2.2 论文研究的主要内容
  • 2.3 论文的设计思想
  • 2.4 实验路线设计图
  • 第三章 实验与方法
  • 3.1 室内生物活性检测实验
  • 3.1.1 供试病毒
  • 3.1.2 供试烟草
  • 3.1.3 供试药剂
  • 3.1.4 仪器和试剂
  • 3.1.5 培育无病植物
  • 3.1.6 病毒提纯
  • 3.1.7 化合物溶液的配制
  • 3.1.8 抗TMV活性测试
  • 3.1.9 药剂对TMV扩展作用的影响
  • 3.2 药剂抗TMV病在系统寄主上的药效试验
  • 3.2.1 试验条件
  • 3.2.2 试验设计与安排
  • 3.2.3 调查与结果
  • 3.2.4 药剂处理后植株体内病毒浓度的变化
  • 3.3 药剂抗TMV作用机理初步研究
  • 3.3.1 药剂抗TMV生化机理初步研究
  • 3.3.2 药剂处理对烟草胞间病程相关蛋白(PR)的SDS-PAGE试验
  • 第四章 结果与讨论
  • 4.1 化合物抗TMV生物活性筛选结果
  • 4.1.1 化合物抗TMV侵染的活体治疗生物活性检测
  • 4.1.2 药剂抗TMV侵染的活体钝化生物活性检测
  • 4.1.3 药剂抗TMV侵染的活体保护生物活性检测
  • 4.1.4 润湿性分散剂的筛选
  • 4.1.5 优化药剂抗TMV侵染的活体治疗和活体保护生物活性的最佳浓度筛选
  • 4.1.6 药剂对TMV扩展作用的影响
  • 4.1.7 室内生物活性检测结果讨论
  • 4.2 药剂抗TMV病在系统寄主上的药效试验结果与分析
  • 4.2.1 药剂处理后植物体内病毒浓度的变化
  • 4.2.2 喷施处理对烟草花叶病的相对防效试验结果
  • 4.2.3 药剂处理在系统寄主上的药效讨论
  • 4.3 药剂抗TMV生化机理初步研究结果
  • 4.3.1 药剂对接种TMV后的烟草植株中PAL活性的影响
  • 4.3.2 药剂对接种TMV后的烟草植株中POD活性的影响
  • 4.3.3 药剂对接种TMV后的烟草植株中SOD活性的影响
  • 4.3.4 药剂对接种TMV后的烟草植株中PPO活性的影响
  • 4.3.5 喷施处理对烟草体内叶绿素含量的影响
  • 4.3.6 药剂对烟草病程相关蛋白(PR)的诱导作用初步研究
  • 4.3.7 药剂抗TMV生化机理结果讨论
  • 第五章 结论
  • 5.1 全文结论及创新
  • 5.2 本论文不足之处
  • 5.3 展望
  • 致谢
  • 参考文献
  • 附录
  • 图版
  • 相关论文文献

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