依那普利、厄贝沙坦及血管紧张素-（1-7）对慢性房颤心房重构的影响

论文摘要

目的:房颤（AF）心房会发生电重构与结构重构,电重构与结构重构都促进AF的复发与维持。心房起搏可诱发类同于AF心房的重构。实验动物模型以及人类AF心房肌细胞的研究已发现L型钙电流(ICaL)、瞬时外向钾电流(ITO)密度下降以及与之平行的ICaLα1C亚单位mRNA和ITOKv4.3亚单位mRNA及蛋白表达下降。在AF患者或动物模型的心房组织肾素-血管紧张素系统（RAS）是活化的。关于RAS抑制剂对AF预防作用的研究提示RAS可能是AF心房重构的重要媒介。血管紧张素-（1-7）[Ang-（1-7）]的发现以及ACE2的克隆成功揭示了RAS调节稳态的另一内在机制。Ang-（1-7）不仅拮抗血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的诸多作用而且可充当内源性血管紧张素转换酶（ACE）抑制剂。故为探讨AF重构现象及治疗策略,本研究建立犬慢性心房起搏模型以观察依那普利、厄贝沙坦及Ang-（1-7）对心房重构的影响。方法:普通杂种犬30只随机分为5组,假手术组（Sham,S组）,心房起搏对照组（Control,C组）,心房起搏+依那普利组（Enalapril,EN组）,心房起搏+厄贝沙坦组（Irbesartan,IB组）,心房起搏+Ang-（1-7）组（Ang-（1-7）,A组）。每组6只。特制心房起搏器（AOO）埋于肩胛后囊袋,起搏电极经右颈外静脉固定于右心房。在C组、EN组、IB组及A组,维持500bpm起搏2周。S组安置起搏器但不行起搏刺激。实验过程中EN组、IB组及A组犬分别接受依那普利2 mg·kg-1·d-1,厄贝沙坦60 mg·kg-1·d-1或Ang-（1-7）6μg·Kg-1·h-1。起搏过程结束后,分离左房肌细胞行全细胞电流及动作电位记录,观察各组犬ICaL、ITO电流密度和动作电位时程（APD）的区别。以右房肌组织行RT-PCR研究,观察ICaLα1C、Kv4.3、ERK1/ERK2、mas受体基因表达特点。取部分右房组织行病理染色,观察心房组织结构变化。结果:心房起搏2周后,C组犬心房肌细胞在各刺激频率下APD90显著缩短（P＜0.05 vs S）、且频率适应性丧失（P＜0.05 vs S）,ICaL、ITO电流密度显著下降(ICaL:C组-2.96±1.55 pA/pF vs S组-5.84±2.29 pA/pF,P＜0.01;ITO:C组8.72±4.35 pA/pF vs S组17.60±6.49 pA/pF,P＜0.01)。依那普利不能预防起搏导致的APD变化,但IB组和A组犬心房肌细胞APD90及其频率适应性有所恢复。A组ICaL、ITO电流密度显著高于C组(ICaL:A组-5.74±3.43pA/pF vs C组-2.96±1.55pA/pF,P＜0.05;ITO:A组14.11±5.04pA/pF vs C组8.72±4.35 pA/pF,P＜0.05),与S组无区别。依那普利和厄贝沙坦不能预防起搏后ICaL电流密度下降,但依那普利显著升高了ITO电流密度（E组29.99±14.78 pA/pF vs C组8.72±4.35 pA/pF,P＜0.01;E组vs S组17.60±6.49 pA/pf,P＜0.01）。与ICaL、ITO电流密度下降一致,C组ICaLα1C和Kv4.3 mRNA表达下降(ICaLα1C:C组0.28±0.07 vs S组0.50±0.11,P＜0.01;Kv4.3:C组0.32±0.09 vs S组0.53±0.06,P＜0.01)。依那普利、厄贝沙坦和Ang-（1-7）均不能预防起搏后ICaLα1C mRNA下降,但依那普利和Ang-（1-7）升高了Kv4.3 mRNA水平（E组0.77±0.09,A组0.63±0.13 vs C组0.32±0.09,P＜0.01;E组vs S组0.53±0.06 P＜0.01）。心房组织Masson染色发现C组心房间质大量纤维组织增生,而且心房肌细胞大小不整、排列紊乱。但这些异常表现在依那普利、厄贝沙坦及Ang-（1-7）治疗组均减轻。与之对应,C组心房组织ERK1/ERK2基因表达高于S组（ERK1:C组1.31±0.12vs S组1.00±0.11,P＜0.05;ERK2:C组1.66±0.63 vs S组0.90±0.45,P＜0.05）,而依那普利、厄贝沙坦及Ang-（1-7）治疗组ERK1/ERK2 mRNA水平较C组下降（ERK1:E组0.67±0.11、IB组0.55±0.38、A组0.64±0.37 vs C组P＜0.01;ERK2:E组0.73±0.25、IB组0.96±0.19、A组0.97±0.32 vs C组P＜0.05）。此外,mas受体mRNA未受起搏影响,但依那普利和Ang-（1-7）降低了起搏后的mas mRNA水平（E组0.91±0.26,A组0.92±0.19 vs S组1.23±0.18,P＜0.05）。结论:依那普利、厄贝沙坦及Ang-（1-7）可通过降低ERK1/ERK2基因表达减轻心房纤维化。依那普利能升高心房起搏后Kv4.3 mRNA表达和ITO电流密度。厄贝沙坦和Ang-（1-7）可预防起搏造成的APD缩短并保持其频率适应性。Ang-（1-7）可预防起搏后ICaL和ITO电流密度下降及Kv4.3 mRNA水平降低。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 符号说明
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 对象和方法
• 一、实验分组与模型建立
• 二、病理检查
• 三、单个心房肌细胞膜片钳实验
• 四、心房肌组织RT-PCR实验
• 结果
• 一、模型制作与病理检查
• 二、单个心房肌细胞电生理特性
• 三、心房肌基因表达改变
• 讨论
• 一、RAS与心房重构的关系
• 二、关于快速心房起搏模型的建立
• 三、快速起搏2周后犬的心房重构
• 四、依那普利、厄贝沙坦及Ang-（1-7）对重构的影响
• 五、RAS抑制剂及Ang-（1-7）预防AF重构的可能机制
• 结论
• 局限性
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 综述
• 综述正文
• 综述参考文献
• 致谢