毛细管电泳在中药研究中的应用

毛细管电泳在中药研究中的应用

论文题目: 毛细管电泳在中药研究中的应用

论文类型: 博士论文

论文专业: 分析化学

作者: 付绍平

导师: 梁鑫淼

关键词: 毛细管电泳,中药,活性成分

文献来源: 中国科学院研究生院(大连化学物理研究所)

发表年度: 2005

论文摘要: 目前在中药研究中存在着活性成分不明确,活性成分理化性质资料不完善,不能充分利用其性质进行研究开发。所以在中药的研究开发中,对中药活性成分、中药活性成分理化性质及中药活性成分和蛋白相互作用的研究,已成为药物开发研究的先期工作部分。毛细管电泳技术具有分析速度快、分离效率高、运行成本低以及分离模式多等特点,是当前分析化学中发展迅速的一个学科。本论文重点采用毛细管电泳技术,对单味中药及复方制剂中活性成分、中药活性成分理化性质参数以及中药活性成分和蛋白相互作用进行研究。为了研究中药活性成分的理化性质,发展了解离常数测定的毛细管电泳方法。根据得到的生物碱解离常数,建立了相似结构生物碱在毛细管区带电泳中迁移时间和分子量之间关系的数学模型,根据此模型预测相似结构生物碱在毛细管区带电泳中的迁移顺序。为了对中药活性成分的稳定性进行研究,发展了测定中药活性成分阿魏酸转化动力学参数和热力学参数的毛细管电泳方法。首先通过HPLC/MS/MS确定阿魏酸的转化产物,然后采用毛细管电泳法研究转化相关的动力学和热力学过程。为了研究中药活性成分与蛋白相互作用,发展了马钱子中有毒成分-士的宁和牛血清蛋白的相互作用研究的毛细管电泳-前沿分析法。通过三种回归方程:Scatchard方程、Klotz方程和非线性回归方程,得到了士的宁和牛血清蛋白的相互作用结合常数和结合位点数。为了研究单味中药及复方配伍化学变化,发展了白芍及其相关复方配伍中强极性成分的毛细管电泳分析方法,并对复方四物汤的配伍规律进行了初步的探讨。最后,以三种活性成分丹皮酚、苯甲酸和没食子酸为指标成分,比较了配伍对它们含量变化的影响。

论文目录:

摘 要

Abstract

第一章 文献综述

1.1 毛细管电泳及其特点

1.1.1 毛细管电泳的基本原理

1.1.2 毛细管电泳的发展进程

1.1.3 毛细管电泳的分离模式和应用领域

1.2 毛细管电泳在中药研究中的现状

1.2.1 单味中药化学成分分析

1.2.1.1 单味中药化学成分的研究现状

1.2.1.2 毛细管电泳应用于单味中药化学成分分析

1.2.2 中药复方制剂化学成分分析

1.2.2.1 中药复方制剂化学成分的研究现状

1.2.2.2 毛细管电泳应用于复方制剂化学成分分析

1.2.3 中药活性成分理化性质的研究

1.2.3.1 中药活性成分生理活性和理化性质

1.2.3.2 中药活性成分物化常数研究

1.2.3.3 中药活性成分稳定性研究

1.2.4 中药活性成分与蛋白相互作用研究

1.3 本论文的选题思想

参考文献

第二章 毛细管电泳应用于中药活性成分理化性质的研究

2.1 引言

2.2 基本理论

2.3 实验部分

2.3.1 仪器和操作条件

2.3.2 样品和试剂

2.3.3 缓冲溶液和样品溶液的制备

2.4 结果与讨论

2.4.1 士的宁类生物碱解离常数的测定

2.4.1.1 缓冲溶液的选择

2.4.1.2 毛细管柱内温度

2.4.1.3 精密度考察

2.4.1.4 解离常数的测定

2.4.2 相似结构生物碱在毛细管区带电泳中的迁移顺序

2.4.2.1 调整分子质量M’计算

2.4.2.2 指数x 的确定

2.4.2.3 生物碱在毛细管区带电泳中的迁移顺序预测

2.4.2.4 电渗流迁移时间的理论计算

2.5 小结

参考文献

第三章 毛细管电泳应用于中药活性成分转化动力学研究

3.1 引言

3.2 基本理论

3.3 实验部分

3.3.1 仪器装置

3.3.2 试剂和药品

3.3.3 对照品溶液的配置

3.3.4 转化反应步骤

3.4 结果与讨论

3.4.1 反式阿魏酸转化产物的确定

3.4.2 电泳分离条件的确定

3.4.3 线性关系与分析精密度

3.4.4 阿魏酸异构化的毛细管电泳分析

3.4.5 测定阿魏酸异构化反应速率常数

3.4.6 基于阿仑尼乌斯经验公式的阿魏酸异构化反应活化能和动力学方程

3.4.7 基于埃林方程的阿魏酸异构化反应活化热力学参数

3.5 小结

参考文献

第四章 毛细管电泳应用于中药活性成分与蛋白相互作用研究

4.1 引言

4.2 实验部分

4.2.1 基本原理

4.2.2 定量分析模型

4.2.3 仪器和试剂

4.2.4 缓冲溶液和样品溶液的制备

4.3 结果与讨论

4.3.1 CE/FA 操作条件的选择

4.3.2 工作曲线

4.3.3 测定士的宁和BSA 相互作用参数

4.4 小结

参考文献

第五章 毛细管电泳应用于中药复方配伍化学变化研究

5.1 引言

5.2 实验部分

5.2.1 试剂和药品

5.2.2 仪器条件

5.2.3 对照品溶液的配置

5.2.4 样品的预处理

5.2.5 电泳操作

5.3 结果与讨论

5.3.1 分析条件的选择

5.3.1.1 缓冲溶液浓度对分离的影响

5.3.1.2 缓冲溶液pH 值对分离的影响

5.3.1.3 有机添加剂对分离的影响

5.3.1.4 甲醇浓度对分离的影响

5.3.2 相对定量分析

5.3.3 定量分析

5.3.3.1 线性关系与分析精密度

5.3.3.2 回收率的测定

5.3.3.3 样品测定结果与讨论

5.4 小结

参考文献

作者简介及发表文章目录

致谢

发布时间: 2007-03-13

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毛细管电泳在中药研究中的应用
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