中国鲎(Tachypleus tridentatus)基因工程抗菌肽的制备及其生物活性研究

中国鲎(Tachypleus tridentatus)基因工程抗菌肽的制备及其生物活性研究

论文题目: 中国鲎(Tachypleus tridentatus)基因工程抗菌肽的制备及其生物活性研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 预防兽医学

作者: 郑伟

导师: 韩文瑜

关键词: 中国鲎,抗菌肽,基因工程,生物活性

文献来源: 吉林大学

发表年度: 2005

论文摘要: 本研究从中国鲎血细胞RT-PCR 扩增抗菌肽基因,经改造构建原核和真核表达载体,并在大肠杆菌和酵母菌中诱导表达。用Tris-Tricine SDS-PAGE 检测并进一步纯化表达产物,经体外生物活性测定表明,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、伤寒沙门菌等具有抑菌作用,尤其对水霉的抑菌效果显著,抑菌环达35mm;对人恶性黑色素瘤细胞(A375)、人宫颈癌细胞(HeLa)有毒性,使其脱离细胞培养瓶壁变成球形,还出现细胞碎片。而对正常鸡胚成纤维细胞(CEF)、猪肾细胞(PK)和地鼠肾细胞(BHK)的生长无影响。同时,还进行了表达中国鲎抗菌肽的基因工程酵母菌在感染高致病性大肠杆菌的雏鸡体内治疗,获得与常规药物羟氨苄青霉素相同的疗效。本项研究弥补了从天然中国鲎中提取抗菌肽缺陷,获得了具有生物学活性的抗菌肽基因工程原核和真核表达株,为用基因工程方法生产无毒副作用、无有害残留、不易使细菌产生耐药性的具有多种生物活性中国鲎抗菌肽奠定了基础。

论文目录:

绪论

第一篇:文献综述

第一章 鲎抗菌肽免疫学特性及分子生物学研究进展

第二章 抗菌肽的结构及其生物学活性研究进展

第三章 抗菌肽基因工程研究进展

第四章 抗菌肽生物学活性的作用机制研究进展

第五章 细菌耐药性生物学对策研究进展

第二篇:研究内容

第一章 中国鲎抗菌肽基因的克隆和序列分析

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 方法

2 结果

3 讨论

第二章 中国鲎抗菌肽基因改造、原核表达及其产物的抗菌活性检测

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 方法

2 结果

3 讨论

第三章 中国鲎抗菌肽基因在毕赤酵母中的表达

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 方法

2 结果

3 讨论

第四章 中国鲎抗菌肽酵母表达产物的体外生物学活性及理化特性研究

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 方法

2 结果

3 讨论

第五章 GS 115-pPIC-KRY 培养液对大肠杆菌人工感染雏鸡的治疗试验

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 方法

2 结果

3 讨论

结论

参考文献

攻博期间发表的学术论文及其他成果

附录

中文摘要

英文摘要

致谢

CURRICULUM VITAE

导师及作者简介

发布时间: 2005-08-26

参考文献

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  • [3].家蝇抗菌肽基因的表达模式与重组表达[D]. 梁永利.山东大学2005
  • [4].雄性生殖系统抗菌肽体内功能研究及其相关方法学的建立[D]. 费照亮.中国科学院研究生院(上海生命科学研究院)2007
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