新疆维吾尔族子宫颈癌患者组织与血浆中MGMT基因启动子甲基化检测及临床意义

论文摘要

目的:检测新疆维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织MGMT基因启动子甲基化状况,确定MGMT基因启动子甲基化与子宫颈鳞癌发生、病理组织分级、淋巴结转移及临床分期的相关性,并为子宫颈癌的临床个性化治疗提供参考。检测新疆维吾尔族妇女子宫颈鳞癌患者血浆中MGMT基因启动子甲基化状况,为临床子宫颈癌基因诊断探寻一种简便、无创的诊断方法。方法:收集2005年1月至2007年6月维吾尔族妇女子宫颈鳞癌患者组织86例（其中冰冻新鲜组织61例,石蜡包埋组织25例）及与正常子宫颈组织38例（冰冻新鲜组织）,收集2007年1月至9月维吾尔族妇女子宫颈鳞癌患者血浆43例与正常维吾尔族妇女体检者血浆40例,应用甲基化特异性PCR检测患者组织与血浆中MGMT基因的甲基化异常,并应用半定量RT-PCR检测子宫颈鳞癌及正常宫颈组织中MGMT基因mRNA表达水平。结果:（1）维吾尔族子宫颈鳞癌组织MGMT基因启动子甲基化率31%（27/86）与维吾尔族正常子宫颈组织中的MGMT甲基化率0%（0/38）有统计学差异（P<0.005）。维吾尔族子宫颈鳞癌患者血浆中MGMT甲基化率26%（11/43）与维吾尔族正常人血浆中的MGMT甲基化率0%（0/40）有统计学差异（P<0.005）。（2）新鲜冰冻鳞癌组织甲基化率为31%（19/61）,石蜡包埋鳞癌组织甲基化率为32% （8/25）,鳞癌患者血浆甲基化率为26%,三者无统计学差异（P>0.05）。（3）子宫颈高分化鳞癌甲基化率为20%（1/5）,中分化鳞癌甲基化率为38%（6/16）,低分化鳞癌甲基化率为33%（4/12）,差异无统计学意义（P>0.05）。（4）临床分期低级阶段（原位癌和临床I期）MGMT基因启动子甲基化的发生率（15%,2/13）与临床分期高级阶段（临床II期和Ⅲ期）（36%,17/47）相比较低,但统计学差异没有显著性（P>0.05）。（5）淋巴结转移组MGMT基因启动子甲基化发生率43%（3/7）高于淋巴结未转移组24%（5/21）,但统计学差异无显著性（P>0.05）。（6）与非甲基化鳞癌及正常子宫颈组织相比,MGMT基因启动子甲基化的鳞癌组织其基因mRNA表达水平明显降低或缺失。结论:（1）MGMT基因启动子区甲基化导致该基因mRNA表达水平降低可能部分参与了维吾尔族子宫颈癌的发生,且可能与维吾尔族宫颈鳞癌的淋巴结转移、组织病理分级及临床分期不相关。（2）维吾尔族鳞癌患者血浆游离DNA中MGMT基因启动子区甲基化与鳞癌组织中相近,提示鳞癌患者血浆中MGMT基因的甲基化检测可能作为一种方便、无创的手段代替鳞癌组织基因甲基化检测。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略词
• 前言
• 第一章 材料与方法
• 1 材料
• 1.1 标本来源
• 1.2 主要试剂
• 1.3 主要仪器设备
• 2 方法
• 2.1 甲基化特异性PCR 进行组织及血浆游离DNA 甲基化检测
• 2.2 T-A 克隆测序分析基因启动子区甲基化
• 2.3 半定量RT-PCR 验证启动子区甲基化与非甲基化组织MGMT 基因转录水平
• 2.4 统计学分析
• 第二章 结果
• 第三章 讨论
• 第四章 结论
• 参考文献
• 文献综述
• 附录
• 致谢
• 作者简历
• 导师评语