微透析技术和中空纤维膜液相微萃取技术的联用

论文摘要

微透析技术是一种将灌流取样和透析技术结合起来,并逐渐完善的一种从生物活体内进行动态微量生化取样的新技术。目前已成为药物代谢动力学,神经生理学以及神经化学的重要研究工具之一。由于微透析实验中用及的灌注液是与体液成分相近的水溶液,非极性物质表现出较低的萃出效率,故而微透析技术对于非极性物质或药物的取样和检测往往受到限制。液相微萃取技术作为一种待测物预处理技术,应用于对复杂待测物的采样检测中。液相微萃取有机溶剂用量小,污染少;集目标物的萃取、纯化、浓缩于一步,操作简单,劳动强度小;无需特殊设备,成本低,因而应用得到迅速推广。微透析探针部分的材料和基于中空纤维膜的液相微萃取的半透膜部分,均为中空纤维膜,理论上可以利用微透析技术和中空纤维膜液相微萃取技术的共同点,对传统的微透析技术进行改进,并将液相微萃取技术的优点引入微透析技术中,以克服其缺点。本文在尝试自制微透析探针后,首先对自制的微透析探针进行了初步的性能评价。考察了不同灌注液流速下的回收率,以及不同透析时间点回收率的变化,结果表明自制的微透析探针具有较稳定的性质,可以快速达到稳定状态,重现性较好。接下来,将微透析技术和基于中空纤维膜的液相微萃取技术联用。实验结果表明,在用低极性溶剂作为灌注液时,灌注流出液中非极性药物的浓度高于水溶液中浓度,成功实现富集取样。对于接近检测限的非极性药物的水溶液,可以通过该方法,快速实现取样富集,并可以在长时间内,对待测物进行持续采样,并进行浓度测定。本文基于上述方法,建立起一种新的血浆蛋白结合率的测定方法。从实验过程看,该方法具有取样速度快,操作简单,可以快速获得实验数据,实验结果较稳定,可以在短时间内多次测量等优点。最后,将微透技术和基于中空纤维膜的液相微萃取技术联用,进行药物代谢动力学研究。用醋酸曲安奈德乳膏作为实验药物,测定其在大鼠皮下的药物代谢动力学特点。在皮下进行微透析的同时,对周围组织中的药物进行富集,可以提高检测限,使得原先难以用微透析的方法进行实验的药物,也可以进行采样分析。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 引言
• 1.2 微透析技术概述
• 1.2.1 微透析技术简介
• 1.2.2 微透析技术原理
• 1.2.3 微透析实验装置
• 1.2.4 回收率
• 1.2.5 微透析技术在临床上的应用
• 1.3 中空纤维膜液相微萃取技术概述
• 1.3.1 液相微萃取技术简介
• 1.3.2 影响中空纤维膜液相微萃取效率因素
• 1.3.3 中空纤维膜液相微萃取技术的应用
• 1.4 本文主要内容
• 第二章 微透析探针的制作及性能评价
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 仪器与试剂
• 2.2.2 微透析探针的制作与微透析系统搭建
• 2.2.3 回收率的测定
• 2.3 结果及讨论
• 2.3.1 检测方法标准曲线、线性和重现性
• 2.3.2 微透析系统的搭建
• 2.3.3 流速对回收率的影响
• 2.3.4 不同透析时间点时回收率的变化
• 2.4 结论
• 第三章 MD-LPME 的联用效果评价
• 3.1 引言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 仪器与试剂
• 3.2.2 色谱条件
• 3.2.3 搭建MD-LPME 系统
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 正辛醇作为灌注液对吲哚美辛水溶液的富集倍数
• 3.3.2 不同透析时间点时富集倍数的变化
• 3.3.3 探针的重复使用富集倍数的变化
• 3.4 结论
• 第四章MD-LPME 联用测定ECF 中醋酸曲安奈德浓度
• 4.1 引言
• 4.2 实验部分
• 4.2.1 仪器与试剂
• 4.2.2 色谱条件
• 4.2.3 MD-LPME 中探针富集倍数测定
• 4.2.4 MD-LPME 法测定ECF 中醋酸曲安奈德的浓度
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 检测方法的标准曲线、线性和重现性
• 4.3.2 MD-LPME 中探针富集倍数测定
• 4.3.3 MD-LPME 法测定ECF 中醋酸曲安奈德的浓度
• 4.3.4 重现性考察
• 4.4 结论
• 第五章MD-LPME 法测定狗血清中醋酸曲安奈德血浆蛋白结合率
• 5.1 引言
• 5.2 实验部分
• 5.2.1 仪器与试剂
• 5.2.2 色谱条件
• 5.2.3 MD-LPME 中探针富集倍数测定
• 5.2.4 MD-LPME 法测定狗血清中游离醋酸曲安奈德的浓度
• 5.3 结果与讨论
• 5.3.1 MD-LPME 法测定复方氯化钠溶液中醋酸曲安奈德的富集倍数
• 5.3.2 MD-LPME 法测定狗血清中醋酸曲安奈德血浆蛋白结合率
• 5.4 结论
• 第六章MD-LPMD法测定醋酸曲安奈德大鼠皮肤中药物代谢动力学
• 6.1 引言
• 6.2 实验部分
• 6.2.1 仪器与试剂
• 6.2.2 色谱条件
• 6.2.3 微透析探针的皮下植入与微透析系统搭建
• 6.2.4 MD-LPME 中探针富集倍数测定
• 6.2.5 给药与经皮采集样品的收集
• 6.2.6 药物代谢动力学参数的计算
• 6.3 结果与讨论
• 6.3.1 HPLC 图谱
• 6.3.2 MD-LPME 法测定复方氯化钠溶液中醋酸曲安奈德的富集倍数
• 6.3.3 MD-LPME 法测定大鼠皮下醋酸曲安奈德药物浓度
• 6.3.4 计算药物代谢动力学参数
• 6.5 结论
• 第七章 总结与展望
• 7.1 结论
• 7.2 展望
• 参考文献
• 致谢