论文题目: 蕨麻多糖免疫调节及抗氧化作用的研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 基础兽医学
作者: 张霞
导师: 刘英,胡庭俊
关键词: 蕨麻多糖,免疫调节,抗氧化,自由基,凋亡
文献来源: 甘肃农业大学
发表年度: 2005
论文摘要: 为探讨蕨麻多糖免疫调节及抗氧自由基的作用，通过体内、体外实验，利用ELLSA法、MTT法、荧光法、放射免疫法及普通显微镜、激光共聚焦扫描显微镜、倒置相差显微镜、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪等方法与技术，观察了蕨麻多糖对小鼠免疫功能、对小鼠免疫组织器官或细胞中氧自由基产生酶活性的影响，体内外清除氧自由基的作用以及对H2O2诱导细胞凋亡的抑制作用，实验结果如下：（1）蕨麻多糖可以促进ConA和LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖，并随着培养时间的延长和蕨麻多糖浓度的升高，脾淋巴细胞的增殖呈一定的正相关趋势。蕨麻多糖能明显提高环磷酰胺所抑制小鼠脾脏指数，但对胸腺指数降低无显著恢复和提升作用，ELLSA实验表明蕨麻多糖均能提高机体免疫器官IL-6、IFN-γ和TNF-α的分泌。（2）蕨麻多糖浓度为200μg／mL时能够升高细胞内信息物质GSH含量，但蕨麻多糖对细胞内GSSG含量影响不显著。从而通过提高GSH／GSSG比值调节细胞内氧化还原状态偏向还原态，介导氧化还原信号转导。（3）随着蕨麻多糖浓度的递增和培养时间的延长，细胞产生的NO信号分子的含量也在递增，呈时间与浓度双因素作用的正相关，并且NO通过激活鸟苷酸环化酶（GC），促进cGMP合成。（4）蕨麻多糖能影响细胞内信号分子PGF1α水平，对细胞内TXB2产生有抑制作用，较小剂量效果比剂量大时要好，从PGF1α／TXB2比值看，蕨麻多糖能够调整体系向PGF1α一端偏移，在机体的信号转导和免疫调节中发挥积极作用。（5）蕨麻多糖能提高受H2O2损伤脾细胞中NADPH氧化酶活性，能下调环磷酰胺抑制小鼠脾脏、胸腺组织中XOD、MPO活性，而对NOS活性影响无显著影响。（6）蕨麻多糖对体外反应体系中由H2O2及其产生的羟自由基（OH）有较好的清除作用，并随着蕨麻多糖浓度的增加，清除OH效应有所增强，对联苯三酚自氧化也有一定的抑制作用。（7）蕨麻多糖能显著促进免疫
论文目录:
摘要
Abstract
引言
多糖的研究进展
参考文献
第一章 蕨麻多糖对小鼠免疫功能的调节作用
1.实验目的
2.实验材料
3.方法
实验一 蕨麻多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响
实验二 蕨麻多糖对小鼠脾脏指数和胸腺指数的影响
实验三 蕨麻多糖对细胞因子(IL-6,TNF-α,IFN-γ)的影响
4.结果
4.1 蕨麻多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响
4.2 蕨麻多糖对小鼠脾脏指数和胸腺指数的影响
4.3 蕨麻多糖对细胞因子(IL-6,TNF-α,IFN-γ)水平的影响
5.讨论
6.小结
第二章 蕨麻多糖对免疫细胞信号转导的影响
1.实验目的
2.实验材料
3.实验方法
实验一 细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘胱(GSSG)的测定
实验二 细胞内cGMP的测定
实验三 蕨麻多糖对细胞内花生四烯酸代谢产物的影响
实验四 细胞内一氧化氮含量的测定
4 实验结果
4.1 蕨麻多糖对小鼠脾淋巴细胞内GSH和GSSG水平的影响
4.2 蕨麻多糖对小鼠脾淋巴细胞内cGMP的影响
4.3 蕨麻多糖提高脾淋巴细胞内的一氧化氮含量
4.4 蕨麻多糖对小鼠脾淋巴细胞内一氧化氮水平的影响
5.讨论
6.小结
第三章 蕨麻多糖的抗氧化作用
1.实验目的
2.实验材料
3.实验方法
实验一 蕨麻多糖体外对脾淋巴细胞NADPH酶活性的测定
实验二 蕨麻多糖对免疫抑制小鼠免疫器官自由基产生酶活性的影响
实验三 蕨麻多糖体外清除自由基的作用
实验四 蕨麻多糖体内清除自由基的作用
4.结果
4.1 蕨麻多糖对体外脾淋巴细胞NADPH氧化酶活性的影响
4.2 蕨麻多糖对环磷酰胺抑制小鼠免疫器官自由基产生酶水平的影响
4.3 蕨麻多糖体外清除自由基的作用
4.4 蕨麻多糖体内清除自由基的作用
5.讨论
6.小结
第四章 蕨麻多糖对H_2O_2诱导脾淋巴细胞凋亡的影响
1.实验目的
2.实验材料
3.方法
实验一 诱导小鼠脾淋巴细胞凋亡的最佳H_2O_2浓度与时间
实验二 脾淋巴细胞凋亡的形态学观察
实验三 DNA凝胶电泳实验
实验四 脾淋巴细胞凋亡的流式细胞技术分析
4.结果
4.1 H_2O_2诱导脾淋巴细胞凋亡的浓度与时间
4.2 蕨麻多糖对H_2O_2诱导脾淋巴细胞凋亡的形态学观察
4.3 DNA琼脂糖凝胶电泳实验结果
4.4 流式细胞仪检测结果
5.讨论
6.小结
结论
参考资料
致谢
作者简介
攻读博士期间发表论文和科研获奖情况已发表的论文
导师简介
发布时间: 2007-03-12
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