吡格列酮对软脂酸诱导的HIT-T15细胞线粒体结构及功能的改变的影响

吡格列酮对软脂酸诱导的HIT-T15细胞线粒体结构及功能的改变的影响

论文摘要

目的 1.观察吡格列酮(PIO)对软脂酸诱导的HIT-T15细胞线粒体结构、细胞的凋亡及胰岛素分泌的改变的影响。2.观察软脂酸和PIO对HIT-T15细胞的ATP、过氧化物酶体增值物激活受体γ共激活因子(PGC-lmRNA)和核呼吸因子-1(NRF-lmRNA)表达的影响。3.探讨PIO保护β细胞的机制。 方法 以仓鼠胰岛素瘤细胞株HIT-T15细胞作为β细胞,游离脂肪酸以软脂酸(palmitare)为代表,分为以下几组:1:正常对照;2:0.5mmol/lFFA;3:0.5mmol/lFFA+PIO10-7mol/1;4:0.5mmol/lFFA+PIO10-5mol/l;5:1.0mmol/lFFA;6:1.0mmol/lFFA+PIO10-7mol/l:7:1.0mmol/lFFA+PIO10-5mol/l,分别观察下述指标:1.透射电镜观察细胞及线粒体形态结构的改变。2.凋亡:分别用流式细胞仪和原位末端标记法(tunnel)检测凋亡率。3.高效液相色谱法检测细胞ATP、ADP改变。4:RT-PCR检测PGC-1mRNA、NRFmRNA表达的变化。5:放免法测正糖培养48小时基础胰岛素和高浓度葡萄糖刺激后1小时胰岛素分泌量(GSIS)。 结果 1:透射电镜显示软脂酸能使细胞及线粒体肿胀,嵴破坏,细胞凋亡明显增加,PIO能减轻上述改变。2:软脂酸增加HIT-T15细胞的凋亡,用流式细胞仪和tunnel检测凋亡率低浓度软脂酸组从正常对照7.40±0.96%、5.93±0.56%上升至9.73±0.38%、8.31±0.32%;高浓度软脂酸组分别上升至12.97±0.73%、10.80±0.27%;PIO减轻软脂酸诱导的上

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