论文题目: 葡萄籽原花青素分离提纯、组分鉴定及抗氧化性研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 食品科学
作者: 吴朝霞
导师: 孟宪军
关键词: 葡萄籽提取物原花青素,超临界萃取,柱层析,化学发光法,稳定性,微胶囊
文献来源: 沈阳农业大学
发表年度: 2005
论文摘要: 葡萄籽中富含葡萄籽油和原花青素,是一种可供选择的极好的保健品原料。葡萄籽油中含有13%～15%的油脂,其中亚油酸的含量达到76%以上,是一种优质保健用油。葡萄籽中原花青素含量也极其丰富,其中低聚原花青素（二聚体～四聚体,OPC’s）有强抗氧化能力,可以清除体内的自由基和活性氧,能预防80多种因自由基引起的疾病包括心脏病、关节炎等,可被广泛应用到药物、化妆品和功能性食品等领域。然而在我国,该方面的理论研究尚处于起步阶段,我们的产品大多为提纯的初级产品,质量不稳定、抗氧化能力不强、价格较低。通过本课题的研究,提出了一套完整的提取葡萄籽油和原花青素的工艺,特别是提出合理的纯化、分离低聚原花青素的方法和工艺。主要结论如下: 1.以超临界萃取技术提取葡萄籽油。通过单因素实验,得到的提取最佳萃取条件为:萃取压力30MPa,萃取温度45℃,萃取时间80min,物料的适宜水分含量约为6%。 2.在超临界萃取技术提取原花青素方面做了初步的理论研究和探索。产物的薄层层析结果显示,在夹带剂甲醇或乙醇存在时可以在一定范围内增加儿茶素及低分子酚酸在CO2流体中的溶解度,且甲醇增加提取率的效果要好于乙醇。进一步以HPLC-MS联检技术分析产物的成分组成,在产物中检测出儿茶素、表儿茶素和两种二聚体,说明在夹带剂甲醇或乙醇存在时提取高抗氧化性的二聚体是可能的。但由于原花青素化学结构的原因,总体提取率仍较低。 3.在溶剂提取的单因素实验基础上通过正交实验,得到脱脂葡萄籽中原花青素的最佳提取条件为:80%的乙醇浸提90min,于温度60℃,pH值5.0,料液比1:6的条件下浸提3次。原花青素粗品的提取率为16.7%,纯度58.3%。 4.研究了大孔树脂柱层析纯化原花青素技术。通过静态和动态吸附、解吸试验筛选出HPD600为最适宜的树脂。同时用Langmuir单层吸附模型拟合比较各树脂的平衡速率常数,获得了良好的相关性,说明大孔树脂对原花青素的吸附主要为单分子层吸附。当上样流速为0.60mL/min,洗脱流速为
论文目录:
中文摘要
文献综述
一.葡萄籽副产物中的葡萄籽油和葡萄籽原花青素
二、葡萄籽原花青素的国内外研究现状
(一) 原花青素的化学结构及植物来源
1.原花青素的化学结构
2.原花青素的植物来源
(二) 原花青素的功能及应用
1.原花青素的功能
2.原花青素的应用
(1) 原花青素预防和治疗心血管疾病及抗衰老
(2) 原花青素在化妆品方面的应用
(3) 原花青素在食品中的应用
(三) 原花青素及OPC’s的提取分离与纯化
1.溶剂萃取法
2.超临界提取葡萄籽油及原花青素
3.大孔吸附树脂分离纯化原花青素
4.聚酰胺分离纯化原花青素
5.葡聚糖凝胶Sephadex LH-20纯化原花青素
6.薄层色谱定性分析提取的原花青素或纯化片段的组成
7.其它可能用于提取和纯化原花青素的方法
(四) 关于原花青素及其寡聚体含量的测定方法
1.分光光度法测量原花青素含量
2.铁盐催化比色法
3.紫外分光光度法
4.低聚体OPC’s中各组分的测定方法
5.用凝胶渗透色谱测定原花青素的聚合度或分子量
(五) 原花青素的毒性问题
(六) 原花青素的稳定性及其微胶囊化
1.可供选择的微胶囊壁材及包埋方法
2.食品工业中常用的微胶囊化方法
(七) 关于原花青素抗氧化性及其测定方法的研究
三、本论文研究的背景、目的、意义
四、研究内容和技术路线
结果与分析
第一部分 超临界萃取葡萄籽油及原花青素的研究
1.材料和方法
1.1 材料及主要设备
1.1.1 材料
1.1.2 超临界流体萃取装置及工艺流程
1.1.3 其它材料及设备
1.2 方法
1.2.1 萃取压力对葡萄籽油提取率的影响
1.2.2 萃取温度对葡萄籽油提取率的影响
1.2.3 萃取时间对葡萄籽油提取率的影响
1.2.4 水分含量对葡萄籽油提取率的影响
1.2.5 夹带剂乙醇和甲醇对葡萄籽原花青素提取率的初步探索
1.3 分析项目和方法
1.3.1 原花青素
1.3.2 葡萄籽油萃取率
1.3.3 薄层分析
1.3.4 HPLC分析
2.结果与分析
2.1 萃取压力对葡萄籽油提取率的影响
2.2 萃取温度对葡萄籽油提取率的影响
2.3 萃取时间对葡萄籽油提取率的影响
2.4 水分含量对葡萄籽油提取率的影响
2.5 夹带剂乙醇和甲醇对葡萄籽原花青素提取率的初步探索
2.6 甲醇为夹带剂提取的原花青素的HPLC分析
3.讨论
3.1 关于该实验条件下超临界萃取葡萄籽油过程中的几个问题
3.1.1 CO_2流量对超临界流体的萃取能力的影响
3.1.2 关于分离釜压力对萃取效率的影响
3.1.3 物料的颗粒度对葡萄籽油萃取率的影响
3.2 关于超临界流体对于原花青素萃取能力的探讨
4.结论
第二部分 原花青素的稳定性研究
1.材料和方法
1.1 实验材料
1.2 仪器设备
1.3 试验方法
1.3.1 葡萄籽原花青素的紫外光谱特性
1.3.2 光照对原花青素稳定性的影响
1.3.3 不同温度和不同pH值条件下葡萄籽原花青素稳定性研究
1.3.4 金属离子对葡萄籽原花青素稳定性的影响
1.3.5 Vc、亚硫酸氢钠对原花青素稳定性的影响
1.4 原花青素测定方法：铁盐催化比色法
2.结果与分析
2.1 葡萄籽原花青素的紫外光谱特性
2.2 光照对葡萄籽原花青素稳定性的影响
2.3 不同温度和不同pH值条件下葡萄籽原花青素稳定性研究
2.4 金属离子对葡萄籽原花青素稳定性的影响
2.5 Vc和亚硫酸氢钠对葡萄籽中原花青素的稳定性影响
3.讨论
4.结论
第三部分 乙醇提取葡萄籽原花青素及大孔树脂纯化原花青素的研究
1.材料与方法
1.1 材料
1.2 主要仪器和设备
1.3 实验方法
1.3.1 脱脂葡萄籽中原花青素提取条件研究
1.3.2 大孔吸附树脂的选择和预处理
1.3.3 大孔吸附树脂纯化原花青素的研究
1.3.4 原花青素的薄层层析
1.4 测定项目和方法
1.4.1 原花青素含量：铁盐催化比色法
1.4.2 溶剂提取原花青素得率的计算
1.4.3 原花青素纯度
1.4.4 大孔树脂对原花青素吸附率的计算
1.4.5 解吸率的计算
2.结果与分析
2.1 脱脂葡萄籽中原花青素提取条件的研究
2.1.1 浸提剂种类对提取效果的影响
2.1.2 浸提剂的浓度对提取效果的影响
2.1.4 浸提时间对提取效果的影响
2.1.5 料液比对提取效果的影响
2.1.6 pH值对提取效果的影响
2.1.7 浸提次数对提取效果的影响
2.1.8 提取工艺的正交试验
2.2 大孔吸附树脂纯化原花青素的研究
2.2.1 大孔树脂静态吸附和解吸原花青素试验
2.2.2 大孔树脂的吸附和解吸动力学研究
2.3 柱层析纯化原花青素的研究
2.3.1 上样流速对大孔树脂吸附能力的影响
2.3.2 洗脱流速对大孔树脂解吸能力的影响
2.4 原花青素的薄层色谱分析
2.4.1 原花青素薄层层析展开体系的选择
2.4.2 点样浓度和点样量的确定
2.4.3 薄层层析组分的定性分析
2.4.4 葡萄籽原花青素粗提物的定性分析
3.讨论
4.结论
第四部分 聚酰胺柱层析分离提纯原花青素及洗脱产物的抗氧化性研究
1.材料和方法
1.1 材料
1.2 主要仪器和设备
1.3 实验方法
1.3.1 脱脂葡萄籽中原花青素粗提液的制备
1.3.2 聚酰胺柱层析分离纯化原花青素的研究
1.4 测定项目和方法
1.4.1 原花青素含量：铁盐催化比色法
1.4.2 聚酰胺对原花青素吸附率的计算
1.4.3 解吸率的计算
1.4.4 原花青素纯度
1.4.5 提取物抗氧化性(清除OH·的能力)的测定
2.结果与分析
2.1 上样流速对聚酰胺吸附原花青素的影响
2.2 粗提液中原花青素不同浓度对吸附的影响
2.3 不同洗脱流速对洗脱效果的影响
2.4 不同浓度的丙酮洗脱效果的研究
2.5 丙酮的分级洗脱研究
2.6 各分级洗脱片段的抗氧化性研究
3.讨论
3.1 关于丙酮分级洗脱分离提纯葡萄籽原花青素的研究
3.2 关于多酚类物质抗氧化性的研究
4.结论
第五部分 原花青素(OPC’s)纯化片段的组成及其平均分子量(平均聚合度，mDP)的测定
1.材料和方法
1.1 实验材料
1.2 主要仪器和设备
1.3 实验方法
2.结果和分析
2.1 20％、40％丙酮洗脱片段的RP-HPLC分析
2.2 各洗脱片段平均聚合度(平均分子量)的测定
2.2.1 不同分子量聚苯乙烯标准品的洗脱曲线及分子排阻曲线方程
2.2.2 各洗脱片段平均分子量的测定
3.讨论
3.1 关于原花青素低聚体的定量和定性分析测定方法的探讨
3.2 关于凝胶渗透色谱测定原花青素聚合度的研究
4.结论
第六部分 葡萄籽原花青素的微胶囊包埋工艺研究
1.材料和方法
1.1 实验材料
1.2 主要仪器和设备
1.3 不同微胶囊包裹方法的研究
1.3.1 β-环糊精包裹
1.3.2 以麦芽糊精-大豆分离蛋白为壁材包裹原花青素
1.3.3 多孔淀粉包裹原花青素的研究
1.3.3.1 多孔淀粉对葡萄籽原花青素吸附特性的研究
1.3.3.2 以多孔淀粉-明胶包埋葡萄籽原花青素
1.3.3.3 以明胶-阿拉伯树胶包埋原花青素
1.3.3.4 以明胶和蔗糖为壁材包埋原花青素
1.4 测定指标及方法
1.4.1 包埋产率和包埋效率
1.4.2 微胶囊水分含量(恒重法)
1.4.3 微胶囊密度(g／cm~3)：用量筒测定
1.4.4 水溶性实验
2.结果与分析
2.1 β-环糊精包埋葡萄籽原花青素的研究
2.2 麦芽糊精-大豆分离蛋白包埋葡萄籽原花青素
2.3 不同壁材包埋多孔淀粉-葡萄籽原花青素复合芯材的研究
2.3.1 多孔淀粉对葡萄籽原花青素吸附特性的研究
2.3.2 以明胶包埋多孔淀粉-葡萄籽原花青素复合物的研究
2.3.3 以明胶-阿拉伯树胶为壁材包埋多孔淀粉-原花青素复合物的研究
2.3.4 以明胶和蔗糖为壁材包埋多孔淀粉-原花青素的研究
2.3.5 三种包埋多孔淀粉制得的微胶囊的含水量、密度及溶解性能的比较
2.3.6 微胶囊包埋多孔淀粉的电镜照片
3.讨论
3.1 关于多孔淀粉包埋葡萄籽原花青素的研究
3.2 几种包埋方法得到的微胶囊物理性质的对比研究
3.3 多孔淀粉与环糊精的比较
3.4 关于壁材选择的问题
3.5 离心喷雾干燥过程影响微胶囊产品的质量
4.结论
本论文创新点
参考文献
致谢
英文摘要
发表论文情况
发布时间: 2005-09-13