生物降解鱼蛋白制备低分子肽的研究

论文摘要

低分子肽是蛋白质不完全降解的产物,与大分子蛋白相比,低分子肽更易于人体吸收,而且还有预防和治疗高血压、抗氧化、抗疲劳、抗血栓形成和增强机体免疫力等多种生理功能。本文分别利用酶法和微生物发酵法来降解鱼蛋白,通过双缩脲和凯氏定氮法测定低分子肽产率,对酶解条件和发酵工艺进行优化。研究了鱼蛋白在碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶这四种蛋白酶作用下的水解情况,并得出它们各自酶解的适宜条件,以及确定酶解鱼蛋白的最佳用酶。实验结果显示,碱性蛋白酶酶解鱼蛋白的效果最佳,适宜的酶解条件是：pH 8.5,反应时间3 h,加酶量2.4 AU/kg,反应温度60℃,料液比1：9。在上述条件下酶解100 g鱼肉,可得低分子鱼肽产品16.0 g,其纯度为60.1%。产品极易溶于水,苦、腥味较重。研究了以纳豆菌为发酵菌种,以鱼肉为原料,利用菌种发酵产酶降解鱼蛋白制备低分子肽。实验结果表明,纳豆菌发酵鱼蛋白适宜的发酵工艺为：pH 7.5,鱼肉质量浓度250 g/L,补加蔗糖质量浓度20 g/L,接种量体积分数3%,发酵温度37℃,发酵时间24 h。在上述条件下发酵100 g鱼肉,得低分子肽产品15.4 g,其纯度为48.4%。产品极易溶于水,呈鲜香味,但略带苦味。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1.1 低分子肽
• 1.1.1 低分子肽概述
• 1.1.2 低分子肽生理功能
• 1.1.2.1 降血压
• 1.1.2.2 代谢调节因子
• 1.1.2.3 具有免疫活性作用
• 1.1.2.4 具有抗氧化作用
• 1.1.3 低分子肽应用
• 1.1.3.1 治疗脑性瘫痪药物
• 1.1.3.2 食品
• 1.1.4 低分子肽的制备方法
• 1.1.4.1 直接提取天然活性低分子肽
• 1.1.4.2 合成法制备低分子肽
• 1.1.4.3 化学法制备低分子肽
• 1.1.4.4 酶解法制备低分子肽
• 1.1.4.5 微生物发酵法制备低分子肽
• 1.1.5 蛋白质含量测定
• 1.1.5.1 凯氏定氮法
• 1.1.5.2 双缩脲法
• 1.1.5.3 紫外吸收法
• 1.1.5.4 Folin——酚法
• 1.1.5.5 考马斯亮蓝法
• 1.2 纳豆菌
• 1.2.1 纳豆菌概述
• 1.2.2 纳豆菌的功能
• 1.2.2.1 溶血栓功能
• 1.2.2.2 抗癌功能
• 1.2.2.3 抗菌功能
• 1.2.2.4 调节肠道功能
• 1.2.3 纳豆菌的应用
• 1.2.3.1 纳豆
• 1.2.3.2 食品防腐剂
• 1.2.3.3 微生态制剂
• 1.2.3.4 γ-聚谷氨酸
• 1.2.4 发酵制品的益处
• 1.3 本文选题意义及展望
• 1.4 本文研究的内容
• 第二章 酶法降解鱼蛋白制备低分子肽
• 2.1 引言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1 材料
• 2.2.1.1 原料
• 2.2.1.2 药品与试剂
• 2.2.1.3 仪器
• 2.2.2 方法
• 2.2.2.1 原料预处理
• 2.2.2.2 鱼肉中蛋白质总含量的测定
• 2.2.2.3 鱼肉中水分含量的测定
• 2.2.2.4 标准曲线的绘制
• 2.2.2.5 低分子肽产率的测定
• 2.2.2.6 鱼蛋白水解度的测定
• 2.2.2.7 酶解鱼蛋白的条件优化
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 鱼肉中蛋白质总含量
• 2.3.2 鱼肉中可溶性低分子肽含量
• 2.3.3 鱼肉中水分含量
• 2.3.4 双缩脲标准曲线
• 2.3.5 碱性蛋白酶酶解鱼蛋白的条件优化
• 2.3.5.1 酶解pH的优化
• 2.3.5.2 酶解时间的优化
• 2.3.5.3 加酶量优化
• 2.3.5.4 酶解温度的优化
• 2.3.5.5 酶解料液比的优化
• 2.3.6 风味蛋白酶酶解鱼蛋白的条件优化
• 2.3.6.1 酶解pH的优化
• 2.3.6.2 酶解时间的优化
• 2.3.6.3 加酶量优化
• 2.3.6.4 酶解温度的优化
• 2.3.6.5 酶解料液比的优化
• 2.3.7 中性蛋白酶酶解鱼蛋白的条件优化
• 2.3.7.1 酶解pH的优化
• 2.3.7.2 酶解时间的优化
• 2.3.7.3 加酶量优化
• 2.3.7.4 酶解温度的优化
• 2.3.7.5 酶解料液比的优化
• 2.3.8 复合蛋白酶酶解鱼蛋白的条件优化
• 2.3.8.1 酶解pH的优化
• 2.3.8.2 酶解时间的优化
• 2.3.8.3 加酶量优化
• 2.3.8.4 酶解温度的优化
• 2.3.8.5 酶解料液比的优化
• 2.3.9 酶解鱼蛋白最佳用酶的确定
• 2.4 小结
• 第三章 纳豆菌发酵法降解鱼蛋白制备低分子肽
• 3.1 引言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 材料
• 3.2.1.1 原料
• 3.2.1.2 实验菌种
• 3.2.1.3 药品与试剂
• 3.2.1.4 仪器
• 3.2.2 方法
• 3.2.2.1 种子液制备
• 3.2.2.2 生物量测定方法
• 3.2.2.3 发酵工艺参数的优化
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 种子液中纳豆菌的个体数目
• 3.3.2 发酵料组成的选择
• 3.3.3 发酵pH的选择
• 3.3.4 发酵接种量的选择
• 3.3.5 发酵温度的选择
• 3.3.6 发酵时间的选择
• 3.3.7 鱼肉质量浓度的选择
• 3.4 小结
• 第四章 低分子肽产品的制备与分析
• 4.1 引言
• 4.2 材料与方法
• 4.2.1 材料
• 4.2.1.1 药品与试剂
• 4.2.1.2 仪器
• 4.2.2 方法
• 4.2.2.1 低分子肽制备的工艺流程
• 4.2.2.2 低分子肽产品分析
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 酶法制备的低分子肽产品分析
• 4.3.2 纳豆菌发酵法制备的低分子肽产品分析
• 4.3.3 酶法制备低分子肽与发酵法制备低分子肽的比较
• 4.4 小结
• 结论
• 参考文献
• 致谢