论文题目: 川芎嗪对VEGF信号转导通路的干预作用研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 药理学
作者: 丰俊东
导师: 徐晓玉
关键词: 川芎嗪,血管内皮生长因子,最大结合容量,解离常数,血管内皮生长因子受体,凋亡
文献来源: 重庆医科大学
发表年度: 2005
论文摘要: 目的:通过观察川芎嗪（TMP）对血管内皮生长因子受体与其配体结合的影响,对血管内皮生长因子受体-2（KDR）表达量的影响,以及对血管内皮生长因子（VEGF）蛋白、VEGF mRNA 表达的影响,探讨川芎嗪对血管内皮生长因子（VEGF）信号转导通路的干预作用。并观察川芎嗪对人肝癌细胞株（Hep G2）增殖的抑制作用。 方法:以人脐静脉内皮细胞 HUVEC 为研究对象,采用血清药理学方法,制备川芎嗪大剂量组含药血清、川芎嗪小剂量组含药血清、阳性对照组鱼精蛋白含药血清、生理盐水组血清,反相高效液相色谱法测定川芎嗪含药血清中药物浓度。将各组血清作用于人脐静脉内皮细胞 HUVEC,采用放射配体受体结合分析法（RBA）观察川芎嗪对 VEGF与其配体结合的影响,检测受体最大结合容量（Bmax）和解离常数（Kd值）。选用 Western blot 方法观察川芎嗪对 HUVEC 中 KDR 表达量的影响。以人肝癌细胞株（Hep G2）为研究对象,采用 ELISA 法检测川芎嗪对 VEGF 在 Hep G2的蛋白表达的影响。RT-PCR 法测定川芎嗪对 VEGF在 Hep G2的 mRNA 表达的影响。采用直接给药方式,用 MTT 法观察川芎嗪对人肝癌细胞株（Hep G2）增殖的作用,流式细胞分析法分析川芎嗪对 Hep G2细胞周期的影响及其诱导细胞凋亡的作用。 结果:川芎嗪大剂量血清组作用于 HUVEC 细胞的 TMP 终浓度为77.0μg/ml。该组特异性结合（SB）呈典型的饱和趋势,与生理盐水组相比 Kd 增大（P<0.05）,说明在川芎嗪作用下 VEGF 受体与 125I-VEGF结合的亲和力下降;同时 Bmax 减小（P<0.05）,提示在川芎嗪作用下VEGF 受体密度下降。Western blot 方法结果显示川芎嗪（77.0μg/ml、154.0μg/ml ）抑制 KDR 表达。川芎嗪（160μg/ml、320μg/ml）抑
论文目录:
符号说明
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 川芎嗪对血管内皮生长因子受体（VEGFR）的作用研究
实验材料
实验方法
实验结果
小结
第二部分 川芎嗪对 VEGF mRNA 及其蛋白表达的作用
实验材料
实验方法
结果
小结
讨论
全文总结
创新点及其意义
思考与展望
参考文献
文献综述一
文献综述二
文献综述三
致 谢
攻读学位期间发表的论文及申报的科研项目
发布时间: 2005-07-22
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