论文摘要
小麦Avenin-like蛋白是一种新型的功能未知的种子储藏蛋白,Avenin-like蛋白富含半胱氨酸残基,因而推测该类蛋白可能影响小麦的加工品质。对Avenin-like蛋白与小麦加工品质关系的研究目前还未见报道。本文从小麦基因组中分离avenin-like b基因并构建真核表达载体,利用基因枪法将avenin-like b基因转入郑麦9023和鄂麦12中,获得了转基因植株,为研究该基因的功能提供了研究材料。主要研究结果如下:(1)选择不含目的基因的表达载体pLRPT和标记基因载体pAHC25,经酶切和测序鉴定后,成功构建了pLRPT-avel真核胚乳特异性表达载体,目的基因由胚乳特异表达的1Dx 5启动子所驱动。(2)比较了不同蔗糖浓度的诱导培养基对郑麦9023和鄂麦12的愈伤组织诱导,确定了蔗糖浓度为3%的诱导培养基适合于郑麦9023和鄂麦12的愈伤组织诱导。(3)利用基因枪法将avenin-like b基因转入郑麦9023和鄂麦12中,运用PCR的方法扩增Gus基因和CAMV35S基因对转基因植株进行筛选,转基因阳性的株数占总再生苗株数的比例近10%。本研究通过构建胚乳特异性表达载体pLRPT-avel,通过基因枪法获得转基因材料,为进一步研究avenin-like b基因与小麦加工品质关系提供了新的材料。