雷公藤甲素改善压力超负荷大鼠左心室重构的实验研究

论文摘要

背景:充血性心力衰竭（congestive heart failure, CHF）是许多心血管疾病的最后共同通路,已日益成为威胁人类健康的重大公共健康问题。CHF的治疗伴随着对其病理生理机制认识的深入而不断取得进展。目前已认识到心室重构是心力衰竭发生的基本机制,近年来越来越多的研究资料显示除了神经内分泌系统的激活以外,促炎症细胞因子作为一种新型神经体液因子在心室重构的发展中可能发挥着重要的作用,它们可从多途径（诱导心肌细胞肥大、凋亡、坏死及调节心肌间质重构）参与心衰及心室重构的发生与发展。围绕心力衰竭炎症介质激活进行的非特异性免疫调节干预已展示出良好的前景。雷公藤甲素（triptolide）作为一种非特异性免疫调节剂,不仅对炎症介质有广泛的调节作用,而且可以抑制NF-κB的活化。目的:探讨雷公藤甲素对压力超负荷大鼠左心室重构和心功能的影响,以及对外周血炎症介质表达的调节作用及其可能的作用机制。方法:采用腹主动脉缩窄压力超负荷大鼠模型,大鼠随机分为五组:假手术组,模型对照组,雷公藤甲素低浓度组（6μg/kg.d）,雷公藤甲素中浓度组（9μg/kg.d）,雷公藤甲素高浓度组（12μg/kg.d）,模型对照组及假手术组以生理盐水干预,共干预八周。治疗结束后采用超声心动图评价心脏结构和功能,测定左室质量指数（left ventricular mass index, LVMI）,HE染色观察光镜下心肌细胞形态和结构的变化,masson特殊染色测量心肌胶原容积分数和心肌血管周围胶原面积,免疫组织化学染色法检测左心室I型胶原和III型胶原的含量并计算它们的比值,ELISA法测定外周血中TNF-α、IL-6、IL-1、IL-10、MCP-1的含量,ELISA法检测心肌组织NF-κB DNA结合活性及转录活性。结果:1.超声心动图显示:与假手术组比较,模型对照组LVPWT与IVST均增加,有统计学差异（P<0.05）;LVEDD有下降的趋势,未达到统计学差异（P>0.05）;模型对照组较假手术组左室射血分数下降,有统计学意义（P<0.05）。雷公藤甲素治疗后与模型对照组相比,LVPWT、IVST和LVEDD均无明显差异:左室射血分数升高,未达到统计学差异（P>0.05）。2.模型对照组LVMI较假手术组增高,有统计学意义（P<0.05）,雷公藤甲素治疗后与模型对照组比较,LVMI有下降趋势,未达到统计学差异（P>0.05）。3. HE染色显示:模型对照组较假手术组心肌细胞明显肥大,心肌纤维排列紊乱,血管壁增厚,炎症细胞浸润明显增加,雷公藤甲素治疗后炎症细胞浸润明显减少（P<0.01）,其余无明显变化。4. Masson特殊染色法显示:模型对照组较假手术组心肌胶原容积分数与心肌血管周围胶原面积均明显增加（P<0.01）,雷公藤甲素治疗后与模型对照组相比心肌胶原容积分数明显下降（P<0.01）,心肌血管周围胶原面积有所减少,但未达到统计学差异（P>0.05）。不同浓度药物组之间无明显差异（P>0.05）。5.免疫组织化学染色显示:模型对照组较假手术组I型胶原和III型胶原含量明显增加（P均<0.01）,I/III胶原比例明显增加（P<0.01）;雷公藤甲素治疗后与模型对照组相比I型胶原含量明显降低（P<0.01）,III型胶原含量明显增加（P<0.01）,I/III胶原比例显著减少（P<0.01）。不同浓度药物组之间无明显差异（P>0.05）。6.模型对照组较假手术组IL-6含量升高,有统计学意义（P<0.05）,雷公藤甲素治疗后可降低IL-6含量,低浓度组未达到统计学差异（P>0.05）,中、高浓度组均有统计学意义（P<0.01）;模型对照组较假手术组IL-1含量升高,有统计学意义（P<0.05）,雷公藤甲素治疗后可降低IL-1含量,低浓度组未达到统计学差异（P>0.05）,中、高浓度组均有统计学意义（P<0.05）;模型对照组较假手术组TNF-α含量升高,有统计学意义（P<0.05）,雷公藤甲素治疗后可降低TNF-α含量,仅高浓度组有统计学意义（P<0.05）;模型对照组较假手术组IL-10含量显著下降（P<0.01）,雷公藤甲素治疗后,低浓度组IL-10含量下降,未达到统计学差异（P >0.05）,中浓度组IL-10含量明显下降（P<0.05）,高浓度组IL-10含量显著下降（P<0.01）;模型对照组较假手术组MCP-1的含量无明显变化（P >0.05）,雷公藤甲素治疗后可明显降低MCP-1的含量,三个浓度组均有显著意义（P<0.01）,不同浓度药物组之间无明显差异（P>0.05）。7.雷公藤甲素对心肌组织NF-κB活性的影响:模型对照组较假手术组NF-κB的转录活性显著增高,有显著统计学意义（P<0.01）,雷公藤甲素治疗后可降低NF-κB的转录活性,三组均有统计学意义（P<0.05）,三个用药组之间无明显差异（P>0.05）;模型对照组较假手术组NF-κB的DNA结合活性增高,有统计学意义（P <0.05）,雷公藤甲素治疗后NF-κB的DNA结合活性无明显变化（P>0.05）。结论:雷公藤甲素对压力超负荷大鼠外周血中炎性细胞因子具有广泛的调节作用,对心肌肥厚无明显作用,可以减轻心肌纤维化;雷公藤甲素可能通过抑制NF-κB通路的活化来发挥非特异性免疫调节作用,从而减轻心肌纤维化,延缓心室重构的发展。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略语表
• 前言
• 参考文献
• 材料与方法
• 1 材料
• 2 方法
• 结果
• 1. 一般病理学检测结果
• 2. 各组大鼠心脏结构和功能
• 3. 各组大鼠左心室质量指数（LVMI）
• 4. Masson 染色心肌胶原纤维
• 5. 免疫组化法染色胶原纤维
• 6. 血清中细胞因子浓度变化
• 7. 心肌组织NF-κB活性
• 附图
• 讨论
• 参考文献
• 结论
• 综述
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文