杨梅汁花色苷的提取分离及其抗氧化、抑菌活性的研究

论文摘要

杨梅（Myrica rubra Sieb. et Zucc.）是我国的特产水果,因其酸甜适口,风味独特而深受广大消费者的青睐。作为一种主要的杨梅加工产品,杨梅汁具有较好的开发价值和应用前景。杨梅汁中含有丰富的花色苷,本文以杨梅汁中的花色苷为研究对象,比较研究了常规溶剂浸提法、超声波辅助提取法和高压脉冲电场（PEF）辅助提取法提取杨梅汁花色苷的方法,并对提取工艺参数进行了优化；研究了大孔吸附树脂对杨梅汁花色苷的静态吸附工艺,并用紫外-可见光谱法对分离后的花色苷进行了初步的鉴定；研究了杨梅汁花色苷的体外抗氧化活性和抑菌活性。主要研究结果如下：（1）以初提液中花色苷含量为指标,采用单因素试验和正交试验设计,得到常规溶剂浸提法提取杨梅汁花色苷的最佳工艺参数为：乙醇浓度70%,料液比1：12,提取时间80min,提取温度30℃,初提液中花色苷含量为13.876mg/g；超声波辅助提取法提取杨梅汁花色苷的最佳工艺参数为：乙醇浓度90%,料液比1：10,提取功率350W,提取时间30min,初提液中花色苷含量为16.251mg/g；PEF辅助提取法提取杨梅汁花色苷的最佳工艺参数为：乙醇浓度85%,料液比1：8,电场强度21KV/cm,循环次数2次,初提液中花色苷含量为22.043mg/g。三种提取方法相比,PEF辅助提取法既缩短了提取时间,同时还提高了提取产量,故采用PEF辅助提取法进行提取。（2）研究了六种大孔树脂对杨梅汁花色苷的吸附性能与解吸性能,筛选出AB-8为较理想的分离杨梅汁花色苷的树脂,其吸附率为76.34%,解析率为69.23%。采用单因素试验确定了AB-8静态吸附动力学试验参数为：pH=3.0,吸附时间5h,解吸时间2.5h,解吸液为80%浓度的乙醇。分离后花色苷为紫黑色粉末,色价为68.8,回收率为72.41%。（3）采用紫外-可见光谱分析法对杨梅汁花色苷进行简单的分析鉴定,确定了所提取分离的色素为花色昔类物质,花色苷未被酰基化,主要为矢车菊色素-3-葡萄糖苷。（4）研究了杨梅汁花色苷的体外抗氧化活性,以VC为对照,采用总抗氧化能力、超氧阴离子自由基（O2-·）清除能力和羟自由基（·OH）清除能力评价杨梅汁花色苷的抗氧化能力。结果表明：浓度为2mg/mL的杨梅汁花色苷的总抗氧化能力与50μg/mL的VC效果相当；浓度为0.5mg/mL的杨梅汁花色苷的O2-·清除能力与50μg/mL的VC效果相当；浓度为0.2mg/mL的杨梅汁花色苷的·OH清除能力比同浓度的VC清除能力略高。（5）采用圆形滤纸片法,对杨梅汁花色苷的抑菌活性进行初步的研究。研究表明：杨梅汁花色苷对青霉、啤酒酵母没有明显的抑制作用,但是对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌表现出较强的抑菌能力,且抑菌强度随着浓度的增大而增加,杨梅汁花色苷对这4种细菌抑制作用的强弱顺序为：沙门氏菌>大肠杆菌>枯草芽孢杆菌>金黄色葡萄球菌；杨梅汁花色苷对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌的最低抑菌浓度（MIC）分别为：1.25mg/mL、1.25mg/mL、2.5mg/mL、0.625mg/mL。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 1.1 杨梅简介及研究现状概述
• 1.1.1 杨梅简介
• 1.1.2 杨梅的营养价值及研究现状
• 1.2 花色苷研究现状概述
• 1.2.1 花色苷的基本结构
• 1.2.2 花色苷的性质
• 1.2.3 杨梅汁花色苷的主要成分及研究现状
• 1.3 花色苷的研究现状
• 1.3.1 花色苷的提取方法
• 1.3.2 花色苷的分离纯化方法
• 1.4 花色苷生理功能研究概述
• 1.4.1 花色苷的抗氧化和清除自由基作用
• 1.4.2 花色苷的抗突变作用
• 1.4.3 花色苷的抗肿瘤作用
• 1.4.4 花色苷的预防心血管疾病的功能
• 1.4.5 花色苷的其他生理功能
• 1.5 花色苷抗氧化功能的研究现状
• 1.5.1 花色苷的抗氧化作用研究进展
• 1.5.2 抗氧化功能的评价方法
• 1.6 花色苷的抑菌作用的研究现状
• 1.6.1 花色苷的抑菌作用的研究进展
• 1.6.2 抑菌作用的评价方法
• 1.7 本课题研究目的与意义
• 1.8 本课题研究的主要内容
• 第二章 杨梅汁花色苷的提取工艺研究
• 2.1 材料与设备
• 2.1.1 试验原料
• 2.1.2 主要试剂
• 2.1.3 主要试验仪器设备
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 工艺流程
• 2.2.2 操作要点
• 2.2.3 常规溶剂浸提法提取杨梅汁花色苷
• 2.2.4 超声波辅助提取法提取杨梅汁花色苷
• 2.2.5 PEF辅助提取法提取杨梅汁花色苷
• 2.2.6 分析方法
• 2.3 试验结果与分析
• 2.3.1 常规溶剂浸提法试验结果
• 2.3.2 超声波辅助提取法试验结果
• 2.3.3 PEF辅助提取法试验结果
• 2.3.4 三种提取方法提取液中花色苷含量比较
• 2.4 本章小结
• 第三章 杨梅汁花色苷的分离工艺研究及初步鉴定
• 3.1 材料与设备
• 3.1.1 试验材料
• 3.1.2 试验试剂
• 3.1.3 试验仪器设备
• 3.2 试验方法
• 3.2.1 大孔树脂的预处理
• 3.2.2 大孔树脂对杨梅汁花色苷的静态吸附与解吸试验
• 3.2.3 杨梅汁花色苷的分析及初步鉴定
• 3.3 试验结果与分析
• 3.3.1 大孔树脂静态吸附结果
• 3.3.2 杨梅汁花色苷的分析及初步鉴定
• 3.4 本章小结
• 第四章 杨梅汁花色苷的体外抗氧化作用研究
• 4.1 材料与设备
• 4.1.1 试验材料
• 4.1.2 试验试剂
• 4.1.3 试验仪器设备
• 4.2 试验方法
• 4.2.1 杨梅汁花色苷的总抗氧化能力（T-AOC）测定
• 2^-·）的体外清除作用'>4.2.2 杨梅汁花色苷对超氧阴离子自由基（O₂^-·）的体外清除作用
• 4.2.3 杨梅汁花色苷对羟自由基（·OH）的体外清除作用
• 4.3 试验结果与分析
• 4.3.1 杨梅汁花色苷的总抗氧化能力（T-AOC）测定
• 2^-·）的体外清除作用'>4.3.2 杨梅汁花色苷对超氧阴离子自由基（O₂^-·）的体外清除作用
• 4.3.3 杨梅汁花色苷对羟自由基（·OH）的体外清除作用
• 4.4 本章小结
• 第五章 杨梅汁花色苷的抑菌活性研究
• 5.1 材料与设备
• 5.1.1 试验材料
• 5.1.2 试验试剂
• 5.1.3 试验菌种
• 5.1.4 试验仪器设备
• 5.2 试验方法
• 5.2.1 培养基的制备
• 5.2.2 杨梅汁花色苷溶液的制备
• 5.2.3 滤纸片的制备
• 5.2.4 菌种的活化及菌悬液的制备
• 5.2.5 杨梅汁花色苷抑菌效果的测定
• 5.2.6 杨梅汁花色苷最低抑菌浓度（MIC）的测定
• 5.3 试验结果与分析
• 5.3.1 杨梅汁花色苷的抑菌效果
• 5.3.2 杨梅汁花色苷最低抑菌浓度（MIC）的测定
• 5.4 本章小结
• 第六章 结论与展望
• 6.1 主要结论
• 6.2 展望
• 参考文献
• 致谢