稳斑方对AS模型兔斑块稳定性的影响及相关机制研究

稳斑方对AS模型兔斑块稳定性的影响及相关机制研究

论文摘要

目的:观察稳斑方对AS模型兔斑块稳定性的影响,探讨稳斑方稳定AS斑块的可能作用机制。方法:喂食高脂饲料造成兔动脉粥样硬化病理模型。56只日本大耳白兔随机分成空白组、模型组、辛伐他汀组和稳斑方组共4组,每组14只。12周造模成功后开始给药,剂量按人兔体表面积折算,辛伐他汀组0.98mg/kg. d、稳斑方组4.24g生药/kg.d,而空白组和模型组灌胃相应体积冷开水,给药8周后处死。留取血清检测TC、TG、HDL-C、LDL-C和hs-CRP的浓度;取主动脉病理切片,HE染色光镜下观察斑块面积、脂质核心面积、内膜及中膜厚度、纤维帽厚度并计算内膜/中膜厚度、纤维帽厚度/脂质核心面积,免疫组化法检测主动脉斑块内MMP-2、IL-6、CD34、VEGF、内皮抑素的阳性表达,原位杂交法检测主动脉斑块内VEGFmRNA.内皮抑素mRNA的阳性表达。结果:1.稳斑方组血清TC、TG、LDL-C水平显著低于模型组(p<0.01),而各组HDL-C水平无统计学意义。2.各组主动脉病理切片HE染色普通光镜观察,稳斑方组在主动脉内膜上的脂纹、脂斑覆盖情况以及在内膜增厚、泡沫细胞堆积等方面均较模型组减轻。3.与模型组比较,稳斑方组主动脉斑块面积、脂质核心面积、内膜厚度、内膜/中膜厚度都显著减少,差异有统计学意义(P<0.01),而纤维帽厚度、纤维帽厚度/脂质核心面积显著升高(P<0.01)。4.稳斑方组Masson染色胶原染色阳性面积及免疫组化法检测MMP-2阳性表达较模型组明显下降(P<0.01)。5.稳斑方组显著降低AS模型兔血清hs-CRP水平和斑块内IL-6阳性表达(P<0.01)。6.与模型组比较,稳斑方组主动脉斑块内CD34、VEGF、VEGFR-2显著降低(P<0.01),而内皮抑素无明显变化。7.原位杂交检测稳斑方组主动脉斑块内VEGFmRNA较模型组明显降低(P<0.01),而内皮抑素mRNA有上升趋势,但差异无统计学意义。8. Pearson检验发现各组纤维帽厚度/脂质核心面积与IL-6和CD34之间存在负相关关系(P<0.01或P<0.05);而各组IL-6和CD34之间存在正相关关系(P<0.01)。9. Pearson检验发现各组CD34与VEGF之间存在正相关关系(P<0.01),空白组、模型组和他汀组VEGF与VEGFR-2之间也存在正相关关系(P<0.05),而稳斑方组VEGF与VEGFR-2二者之间虽有一定相关趋势,但无统计学意义。结论:1.稳斑方能降低血脂水平、减少AS模型兔斑块面积、降低内膜厚度和内膜/中膜厚度,改善AS模型兔的病理形态学改变。2.稳斑方减少斑块内脂质面积,增加纤维帽厚度,提高纤维帽厚度/斑块内脂质面积,抑制胶原增生,减少纤维帽细胞外基质降解,改善斑块内部结构,对稳定AS斑块有良好疗效。3.AS斑块内炎性因子和新生血管与斑块的稳定性成负相关关系。4.稳斑方通过调节血脂、减少纤维帽细胞外基质降解、减轻炎症反应和减少斑块内新生血管来达到延缓AS进程,实现稳定及消退AS斑块的目的。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 英文缩写词表
  • 引言
  • 第一部分 稳斑方对AS模型兔血脂水平及斑块病理形态学的影响
  • 材料与方法
  • 1. 材料
  • 1.1 实验动物
  • 1.2 实验药品
  • 1.3 试剂
  • 1.4 仪器
  • 2. 实验方法
  • 2.1 实验分组
  • 2.2 造模
  • 2.3 给药方法
  • 2.4 标本处理及指标检测
  • 3. 统计方法
  • 结果与分析
  • 1. 对AS模型兔血清血脂水平的影响
  • 2. 对AS模型兔主动脉斑块病理形态学的影响
  • 2.1 肉眼观察
  • 2.2 光镜下观察
  • 2.3 对AS模型兔主动脉斑块面积及内膜、中膜厚度的影响
  • 3. 对AS模型兔主动脉斑块纤维帽及脂质核心面积的影响
  • 4 对AS模型兔主动脉内胶原染色面积的影响
  • 5 对AS模型兔斑块内MMP-2阳性表达的影响
  • 讨论
  • 第二部分 稳斑方对AS模型兔相关炎性标志物的影响
  • 材料与方法
  • 1. 材料
  • 2. 实验方法
  • 3. 统计方法
  • 结果与分析
  • 1. 稳斑方对AS模型兔血hs-CRP的影响
  • 2 稳斑方对AS模型兔斑块内IL-6阳性表达的影响
  • 讨论
  • 第三部分 稳斑方对AS模型兔斑块内新生血管的影响
  • 材料与方法
  • 1. 材料
  • 2. 方法
  • 3. 统计学方法
  • 结果与分析
  • 1. 稳斑方对AS模型兔主动脉斑块内CD34表达的影响
  • 2. 稳斑方对AS模型兔主动脉斑块内VEGF及VEGFR-2表达的影响
  • 3. 稳斑方对AS模型兔主动脉斑块内皮抑素表达的影响
  • 4. 稳斑方对AS模型兔主动脉斑块内VEGFmRNA及内皮抑素mRNA表达的影响
  • 5. 各组主动脉斑块内CD34表达与VEGF表达的相关性分析
  • 6. 各组主动脉斑块内VEGF表达与VEGFR-2表达的相关性分析
  • 7. 各组主动脉斑块内CD34表达与内皮抑素表达的相关性分析
  • 讨论
  • 第四部分 AS模型兔斑块易损指标(纤维帽厚度/斑块内脂质面积)与IL-6及CD34之间的相关性分析
  • 材料与方法
  • 1. 材料
  • 2. 方法
  • 3. 统计学方法
  • 结果与分析
  • 1. 纤维帽厚度/斑块内脂质面积与斑块内CD34表达的相关性分析
  • 2. 纤维帽厚度/斑块内脂质面积与斑块内IL-6表达的相关性分析
  • 3. 斑块内IL-6与CD34表达的相关性分析
  • 讨论
  • 第五部分 讨论
  • 1. 中医对AS的认识及研究进展
  • 2. 稳斑方的组方依据及现代药理学研究
  • 2.1 稳斑方的组方依据
  • 2.2 稳斑方的现代药理学研究
  • 3. 稳斑方稳定斑块的可能作用机制
  • 结论
  • 附图
  • 致谢
  • 参考文献
  • 附录
  • 1. 综述:动脉粥样硬化易损斑块的中西医研究进展
  • 2. 攻读学位期间发表论文论著及主要研究成果
  • 相关论文文献

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