复合垂直流构建湿地微生物类群多样性及其活性研究

复合垂直流构建湿地微生物类群多样性及其活性研究

论文题目: 复合垂直流构建湿地微生物类群多样性及其活性研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 环境科学

作者: 周巧红

导师: 吴振斌

关键词: 复合垂直流构建湿地,微生物多样性,细菌生理群,酶活性,酞酸酯

文献来源: 中国科学院研究生院(水生生物研究所)

发表年度: 2005

论文摘要: 本文以下行流-上行流复合水流方式的构建湿地——复合垂直流构建湿地系统为研究对象,围绕微生物类群多样性及其活性展开相关研究。较为系统全面的研究了微生物数量和酶活性,揭示了微生物生理群及酶活性的时空规律;探讨了不同位点的硝化与反硝化作用以及呼吸作用,掌握了微生物生物化学活性空间分布规律;首次采用湿地基质进行邻苯二甲酸二丁酯(DBP)生物降解实验,同时探讨了DBP 对基质酶活性的影响,从生物特别是微生物角度揭示了构建湿地对特殊污染物的响应;成功的把变性梯度凝胶电泳(DGGE)、随机扩增引物多态性(RAPD)以及磷脂脂肪酸(PLFA)等方法引进到湿地微生物生态研究中,拓宽了该领域的研究方法。主要的研究成果如下: 1、基质剖面微生物的数量测定结果表明细菌、真菌、放线菌广泛的存在于湿地基质中,并且不同层面微生物数量存在着差别,上行流和下行流池0-10cm的基质层中好氧微生物数量高出30-55cm 的层面1-2 个数量级;反硝化细菌除下行流池0-10cm 的层面外其他基质层数量都达到107个/g 土以上。2、对不同月份基质中酶活性和细菌生理类群数量进行了测定。各种酶酶活性在不同月份存在显著差异(p<0.05)。相比较而言,6 种酶酶活性的空间特征较为一致,下行流池酶活性显著高于上行流池活性(p<0.05),并且随着基质层深度的增加,酶活性亦相对递减。测定细菌生理群的数量,发现其数量在6 月和9 月达到高峰,并且所反映出来的空间规律与酶活性有一致性。3、研究了基质中的生物化学活性,发现硝化作用和反硝化作用广泛存在于湿地系统中。硝化作用表现一定的空间规律,0-10cm 的基质硝化作用强度要比40-55cm 层面的高出20%左右;反硝化作用的空间差别很小,其作用率最低也达到85.5%。呼吸作用与微生物丰富度表现一定的正相关性。4、在两套构建湿地小试系统中探讨基质酶对有毒有机污染物DBP 的响应,并且研究了基质对DBP 的降解实验。比较实验池和对照池的酶活性,发现在本实验条件下DBP 能够增强脱氢酶和过氧化氢酶的酶活性,抑制脲酶、纤维素酶和β-葡萄糖苷酶的活性。当停止投加DBP 后一个月脲酶、纤维素酶和β-葡萄糖苷酶的活性尚未得到恢复。基质中的DBP 降解实验结果表明这个过程主要是由

论文目录:

致谢

目录

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引言

第一章 文献综述

1 土壤微生物生态学研究方法进展

1.1 土壤微生物生态学研究方法的发展历程

1.2 微生物生态学研究方法的应用

1.3 土壤酶的研究进展

2 人工湿地的研究进展

2.1 人工湿地的概念及类型

2.2 人工湿地的国内外发展概况

2.3 人工湿地对污染物的去除及机理

2.4 人工湿地中微生物的研究

3 酞酸酯类污染物的研究进展

3.1 酞酸酯类污染物的特性

3.2 酞酸酯类污染物的分布状况

3.3 酞酸酯类污染物的毒性

3.4 酞酸酯类污染物的去除

3.5 酞酸酯生物降解动力学的研究

第二章 复合垂直流构建湿地的构造及其运行效果

1 引言

2 材料与方法

2.1 实验系统的结构

2.2 水质理化指标的测定

2.3 基质理化性质的测定

2.4 水体中细菌的检测

2.5 水体胞外酶活性的测定

3 结果与讨论

3.1 复合垂直流构建湿地进出水的理化参数

3.2 中试系统对微生物病原菌的去除效果

3.3 构建湿地不同层面基质理化指标的变化

3.4 构建湿地进出水中酶活性

4 小结

第三章 构建湿地基质中微生物生理群和酶活性的时空动态特征

1 引言

2 材料与方法

2.1 基质样品的采集

2.2 微生物数量的测定

2.3 基质酶活性测定

2.4 基质硝化作用和反硝化作用的测定

2.5 基质微生物呼吸强度的测定

2.6 基质微生物生物量氮的测定

2.7 湿地进水理化指标的测定

3 结果与讨论

3.1 基质剖面微生物的数量

3.2 细菌生理类群的时空规律

3.3 基质酶的时间动态

3.4 基质酶的空间分布

3.5 微生物生物量

3.6 硝化-反硝化作用和呼吸作用

4 小结

第四章 投加DBP 的构建湿地基质酶活性以及DBP 的生物降解

1 引言

2 材料和方法

2.1 实验系统的构造以及DBP 的投配

2.2 基质样品的采集

2.3 酶活性的分析

2.4 DBP 的生物降解实验

2.5 数据分析

3 结果与讨论

3.1 酶活性

3.2 DBP 的降解

4 小结

第五章 PCR-DGGE 和RAPD 在湿地微生物多样性研究中的应用

1 引言

2 材料和方法

2.1 试剂与仪器

2.2 基质样品的采集

2.3 基质DNA 提取

2.4 PCR 扩增

2.5 数据处理

3 结果与讨论

3.1 基质微生物DNA 的提取

3.2 PCR-DGGE 结果

3.3 PCR-RAPD 结果

3.4 分子生物学技术在构建湿地中的应用前景

4 小结

第六章 复合垂直流构建湿地基质的磷脂脂肪酸分析

1 引言

2 材料与方法

2.1 试剂和仪器

2.2 基质的采集及预处理

2.3 GC-MS 条件

3 结果与讨论

3.1 脂肪酸甲酯的定性分析

3.2 脂肪酸甲酯的定量分析

3.3 构建湿地基质中磷脂脂肪酸的分析

3.4 磷脂脂肪酸图谱在构建湿地中的应用前景

4 小结

结论

参考文献

在学期间发表论文情况

发布时间: 2005-12-02

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