松口蘑T2菌株培养条件优化及中草药对其生长的影响

论文摘要

松口蘑是一种与松属植物共生的外生菌根食用菌,迄今不能进行人工栽培,其菌丝在实验室条件下生长缓慢。为了提高菌丝的生长速度,本论文对松口蘑T2菌株的营养生长条件和中草药对其生长的影响进行了研究。 T2菌株的最佳培养基为添加0.5%酵母浸膏的PDA;固体平板和液体静置的培养方法优于液体振荡培养;最适初始pH值为5.5;最适培养温度为22℃;培养观察周期为30d。 T2菌株利用碳氮源试验的结果表明:25种碳源中,淀粉、玉米粉和葡萄糖的利用效果较好,其中玉米粉的效果最好;26种氮源中,酵母浸膏和牛肉浸膏的利用效果较好。选取不同水平的玉米粉、葡萄糖和酵母浸膏分别作为碳源和氮源,采用三因素二次回归正交旋转设计试验建立了回归模型,确定最佳培养基成分配比为:玉米粉2.00%、葡萄糖2.00%、酵母浸膏0.55%。 研究了80种中草药浸提液对T2菌株生长的影响,试验结果表明:其中50种中草约对T2菌株生长抑制率高于10%;26种中草药对菌丝生长影响较小;4种中草药（天葵子、白豆蔻、鱼腥草和雷公藤）对菌丝生长有显著促进作用（α=0.05）,增长率均高于10%,且前两种能极显著促进菌丝生长（α=0.01）。这4种中草药的有效成分中含有单萜烯类、多环二萜类物质,同时这些物质在松属植物中含量均十分丰富,很有可能是促进T2菌株生长的物质。 另外,从松口蘑子实体的不同部位进行了菌种分离,得到了5株纯培养物,试验表明:菌褶是最适合其菌丝分离的材料。5株纯培养物与T2菌株进行比较,形态特征基本相似,以T3为代表对其非编码转录区进行DNA测序,结果鉴定为松口蘑菌。

论文目录

• 第一章 绪论
• 1.1 松口蘑的生物学特性及应用
• 1.1.1 松口蘑的命名
• 1.1.2 松口蘑的分类地位及分布
• 1.1.3 松口蘑的形态特征
• 1.1.4 松口蘑的生态特征及发生规律
• 1.1.5 松口蘑的营养成分及其食（药）用价值
• 1.2 松口蘑研究进展
• 1.2.1 菌丝分离培养及其鉴定
• 1.2.2 菌丝的生理特性
• 1.2.3 液体发酵生产松口蘑菌丝体
• 1.2.4 松口蘑及其菌丝体中的功能成分
• 1.2.5 松口蘑及其菌丝体的产品
• 1.3 研究目的、意义及内容
• 1.3.1 研究目的和意义
• 1.3.2 研究内容
• 第二章 培养基的选择及培养条件的确定
• 2.1 引言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1 材料
• 2.2.2 方法
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 基础培养基的选择
• 2.3.2 培养方法的选择
• 2.3.3 培养时间的确定
• 2.3.4 初始pH值的影响
• 2.3.5 培养温度的影响
• 2.4 小结
• 第三章 培养基的营养成分选择及其优化
• 3.1 引言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 材料
• 3.2.2 方法
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 碳源试验
• 3.3.2 有机碳源的筛选
• 3.3.3 氮源试验
• 3.3.4 ATP对菌丝生长的影响
• 3.3.5 表面活性剂对菌丝生长的影响
• 3.3.6 培养基成分的优化
• 3.4 小结
• 第四章 中草药对菌丝生长的影响
• 4.1 引言
• 4.2 材料与方法
• 4.2.1 材料
• 4.2.2 方法
• 4.2 结果与讨论
• 4.2.1 中草药对菌丝生长的影响（改良的BM培养基为基础）
• 4.2.2 中草药对菌丝生长的影响（PDA+0.5％酵母浸膏培养基为基础）
• 4.3 小结
• 第五章 菌种的分离、形态观察及其鉴定
• 5.1 引言
• 5.2 材料与方法
• 5.2.1 材料
• 5.2.2 方法
• 5.3 结果与讨论
• 5.3.1 菌丝的分离
• 5.3.2 菌丝的形态特征
• 5.3.3 分离菌株的鉴定
• 5.4 小结
• 第六章 结论与展望
• 6.1 结论
• 6.2 展望
• 参考文献
• 致谢
• 作者介绍