CCK-8检测法研究槲皮素对人Tenon囊成纤维细胞的抑制作用

论文摘要

[目的]增生性玻璃体视网膜病变、眼外伤、眼内术后并发症、视网膜脱离等疾病常常并发眼内增殖性病变,引起眼内纤维组织增生,形成纤维膜,严重损害视力,给广大眼科患者带来了极大的痛苦。然而手术并不能阻止甚至可能刺激眼内细胞发生迁移、增生,导致眼内组织严重纤维化。因此,探索药物防治眼内增殖性病变具有重要意义。抗青光眼滤过性手术失败的主要原因是滤过道成纤维细胞过度增殖致瘢痕化,通过体外培养人Tenon囊成纤维细胞,观察槲皮素对人Tenon囊成纤维细胞增殖的影响,为临床防治眼内增殖性病变提供理论依据和新的治疗方法。[方法]体外培养人Tenon囊成纤维细胞。配制不同浓度槲皮素溶液,将浓度依次为20、40、60、80、100μmol/L的槲皮素溶液与人Tenon囊成纤维细胞共同培养,采用活细胞计数试剂盒CCK-8检测不同时间、不同浓度的槲皮素作用下细胞的增殖,并在光学显微镜下观察细胞的形态变化。[结果]槲皮素作用24h、48h、72h后实验组与对照组吸光度均数比较的差异均有显著性（20μmol/L组P<0.05,40～100μmol/L组P<0.01）。与对照组相比,槲皮素对体外培养的人Tenon囊成纤维细胞的增殖有明显抑制作用,并呈剂量时间依赖关系。当浓度达到100μmol/L时,细胞的增殖几乎完全被抑制。正常人Tenon囊成纤维细胞为贴壁细胞,倒置相差显微镜下可见细胞呈典型的长梭形,胞体狭长、透亮。姬姆萨染色后,光镜下可见细胞生长良好,细胞密度较大,染色质均匀。50μmol/L槲皮素作用48h后,细胞收缩,胞核固缩,染色质浓缩致密、聚集在核膜边缘。100μmol/L槲皮素作用48h后,细胞未见增殖,核浓缩,凋亡小体增多,有部分细胞呈现胞膜破裂。[结论]槲皮素对体外培养的人Tenon囊成纤维细胞的增殖有明显抑制作用,呈剂量时间依赖关系,并且具有疗效高、毒副作用小、原料药来源丰富等特点有较丰富的原料药来源等特点,可作为防治眼内增殖性病变及青光眼滤过手术的抗瘢痕新药,因此,进一步研究槲皮素的药理作用机制并将其转化为临床用药,是非常必要并具有广阔应用前景的。

论文目录

• 提要
• 引言
• 第一部分 文献综述
• 参考文献
• 第二部分 实验研究
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 摘要
• Abstract
• 致谢
• 导师及作者简介