论文摘要
目的:探讨局灶性脑缺血再灌注损伤的动态病变特点及明胶酶、TIMP-1、GFAP、PCNA的表达与损伤机制的关系。方法:建立大鼠MCAO/R模型,采用HE染色、Tunel染色并结合脑含水量(干湿重法)测定以观察大鼠局灶性脑缺血2h再灌注后3h、24h、48h、72h、5d、7d不同时间点脑组织的病理变化;并应用SP免疫组织化学方法检测各相应时间点大鼠缺血区大脑组织中的MMP-2、MMP-9、TIMP-1、GFAP、PCNA的蛋白表达。 结果:1) 较假手术对照组相比,局灶性脑缺血再灌注后3h至7d大鼠缺血区大脑组织均有明显病理损伤。水肿出现在再灌注全程中,但呈现两个明显的高峰,分别是再灌注后24h点及72h点,其中前者尚伴片状出血,表明再灌注后24h BBB的损害最严重;缺血中心区的损伤以坏死为主;边缘区的损伤以细胞凋亡为主;炎细胞的浸润从再灌注后24h出现并逐渐加剧;损伤的修复从再灌注后72h开始;但细胞凋亡尤其是缺血边缘区的凋亡持续性存在,不随修复的进行而减轻;细胞凋亡与脑水肿间存在正相关性。 2) 缺血再灌注各组大鼠缺血区大脑组织的MMP-2、MMP-9、TIMP-1表达均较假手术对照组明显升高,有显著性差异,P<0.05;再灌注各组的MMP-2、MMP-9表达及MMP-9/TIMP-1比值存在时空改变且分别与脑水肿、细胞凋亡有正相关性,P<0.01,相关度R值均在0.5以上,其中24h的首次脑水肿高峰与MMP-2表达峰值点及MMP-9/TIMP-1表达比值的峰值点重叠。 3) 再灌注后早期缺血中心区大脑组织中,星形胶质细胞及微血管内皮细胞的PCNA表达先于神经元的PCNA表达,表明神经元损伤发生在胶质细胞损害及脑微环境改变之后;缺血边缘区PCNA、GFAP二者的表达均从72h点明显升高并伴有细胞的增生,与再灌注后第二次脑水肿高峰重叠。
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