腹膜间皮细胞膜的制备及防治创伤性腹膜粘连的实验研究

论文摘要

目的:腹膜粘连的原因很多,既往认为一般由于手术损伤、炎症反应、异物残留、组织缺血等外在因素有关,本论文与既往研究有所不同,就创伤性腹膜粘连的细胞学基础进行了研究,得出了间皮细胞损伤是腹膜粘连的起始原因,并为了保证间皮细胞在局部的数量及稳定性,又研究了自体纤维蛋白膜来作为间皮细胞移植的载体,以便为了更好的防治创伤性腹膜粘连的形成,本论文就是将实验所得到的纤维蛋白—间皮细胞膜移植在大鼠腹腔创面上,来观察其在腹膜粘连过程中的防治作用。方法:第一部分中我们制备两组动物模型,一组为创伤粘连组,另一组为空白对照组,分阶段处死,进行腹膜粘连情况的观察,粘连分级,结果进行Ridit统计学分析,组织行HE染色观察;第二部分中我们用胰蛋白酶组织消化法分离来源于大网膜的腹膜间皮细胞,并进行细胞爬片的制备及免疫组化染色,进行间皮细胞的培养及鉴别;第三部分中我们用凝血酶及血浆制备了纤维蛋白膜,用相关设备测定了它的物理性能,并通过将其植入到大鼠肌肉的方法研究了它的生物相容性及降解性;第四部分中我们在纤维蛋白膜上接种了间皮细胞并进行了培养;在最后的第五部分中我们通过将纤维蛋白一间皮细胞膜移植在大鼠腹膜创面上来验证其在防治中的作用,本部分中我们制备了五组动物模型,A组为创伤粘连组,B组为纤维蛋白膜移植组,C组为纤维蛋白—间皮细胞膜移植组,D组是纤维蛋白—间皮细胞膜+透明质酸钠组,五组大鼠于术后分阶段处死,进行粘连分级,结果行Ridit统计学分析,组织行HE染色观察。结论:1.腹膜损伤、间皮细胞损伤、纤维蛋白渗出、成纤维细胞过度增殖是粘连形成的病生理基础,而相邻部位腹膜的损伤是形成的空间基础。2.胰蛋白酶大网膜组织消化法可以成功分离腹膜间皮细胞,并在体外成功的培养原代间皮细胞,24小时后间皮细胞大部分贴壁。3.纤维蛋白膜是一种可合成、可降解、具有良好生物相容性并且是无毒、无副作用的生物材料。4.间皮细胞在纤维蛋白膜上可以正常生长,24小时后大部分可以贴附于其上,之后间皮细胞逐渐伸展开并变大,两者相互结合得到了纤维蛋白-间皮细胞膜。5.纤维蛋白-间皮细胞膜移植可以有效的防治创伤性腹膜粘连。间皮细胞对保持腹膜结构和功能稳定等具有重大的作用,尽早恢复间皮细胞功能,增加间皮细胞的数量是防治腹膜粘连的有效途径。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 符号说明
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 一、腹膜创伤导致腹膜粘连的细胞学机制
• 1.1 对象和方法
• 1.2 结果
• 1.3 讨论
• 1.4 小结
• 二、大网膜来源的间皮细胞的分离及原代培养的研究
• 2.1 对象和方法
• 2.2 结果
• 2.3 讨论
• 2.4 小结
• 三、自体纤维蛋白膜的制备及生物物理性能的研究
• 3.1 对象和方法
• 3.2 结果
• 3.3 讨论
• 3.4 小结
• 四、纤维蛋白膜培养间皮细胞的动态观察
• 4.1 对象和方法
• 4.2 结果
• 4.3 讨论
• 4.4 小结
• 五、纤维蛋白-间皮细胞移植防治创伤性腹膜粘连的实验研究
• 5.1 对象和方法
• 5.2 结果
• 5.3 讨论
• 5.4 小结
• 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研工作说明
• 附图
• 综述
• 间皮细胞及其在腹膜粘连防治中功能的研究进展
• 综述参考文献
• 致谢