论文摘要
第一部分冷冻胚胎移植后早期流产相关因素的分析目的：探讨冷冻胚胎移植获得临床妊娠后发生早期自然流产的相关因素。方法：回顾性分析2009年6月至2010年8月于山东大学附属省立医院生殖中心接受冷冻胚胎移植并获得临床妊娠的患者,选择因女方配子运送障碍和（或）男方因素接受IVF/ICSI技术且FSH<10IU/L的患者,除外子宫内膜异位症、子宫内膜息肉、生殖系统畸形、高泌乳素血症等影响妊娠的其他疾病,行ICSI助孕者男方染色体及AZF或CFTR无异常,共计384例患者,385个移植周期。妊娠12周内发生自然流产者列为流产组（n=56）,继续妊娠者列为未流产组（n=329）。分析夫妇年龄、不孕年限、基础内分泌、体重指数、自然流产史、助孕方式、取卵周期受精率及优胚率、内膜准备方案、移植前子宫内膜厚度、复苏后胚胎变化、移植优质胚胎数和种植胚胎数对早期流产的影响。结果：1.流产组夫妇双方年龄及不孕年限均大于未流产组（P<0.05）,基础内分泌、体重指数均无显著差异（P>0.05）。2.有自然流产史的患者冻胚移植后早期流产率显著高于无自然流产史者（P<0.05）。3.流产组取卵周期优胚率和冻胚移植后种植率小于未流产组（P<0.05）,助孕方式、内膜准备方案、移植前子宫内膜厚度均无显著差异（P>0.05）。双胎或多胎者早期妊娠流产率显著低于单胎妊娠者（P<0.05）。4.复苏后继续培养19-72小时且有生长的胚胎移植后流产率显著低于其他未进行继续培养或培养后胚胎未生长的周期（P<0.05）。66个周期胚胎复苏后细胞数少于冷冻前,按复苏后细胞减少数与冷冻前胚胎总细胞数的比例分为3组（<2/24,≥2/24且<6/24,≥6/24）,其流产率有显著性差异（P<0.05）,细胞减少数越多,流产率越高。其中移植2个细胞数未减少胚胎的周期流产率低于没有或仅有1个细胞数未减少胚胎的周期,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：1.夫妇双方年龄、不孕年限、自然流产史及种植胚胎数是冻胚移植后早期流产的相关因素,而体重指数、助孕方式、内膜准备方案、移植前子宫内膜厚度与流产的发生无明显相关。2.取卵周期较高的优胚率和复苏后培养胚胎有生长预示胚胎有良好的发育潜能,移植后妊娠率较高；而复苏后胚胎卵裂球减少数越多、移植完整胚胎个数越少,流产率越高。移植胚胎的质量是影响冻胚移植后早期流产的重要因素。第二部分FISH技术检测自然流产组织中染色体异常的研究目的：运用荧光原位杂交技术（FISH）对自然流产绒毛组织进行遗传学检测,探讨自然流产绒毛组织的处理、FISH检查方法及自然流产组织细胞中染色体异常总发生率、异常种类和各种异常发生率。方法：收集100例自然流产绒毛组织,利用FISH技术检测13、16、18、21、22、X、Y染色体数目的异常。结果：共收集100例自然流产绒毛组织。流产患者为自然妊娠或体外受精-胚胎移植后妊娠,平均年龄31.6±4.9岁（21-44岁）,妊娠5-16周,初次妊娠者32例,有正常妊娠史者21例,有自然流产史者33例。FISH检测发现染色体异常者37例,异常率37%。其中16三体13例,占35.1%（其中4例为嵌合体）,22三体5例,占13.5%（其中2例为嵌合体）,X单体4例,占10.8%（其中1例为嵌合体）,所检测染色体均为三体4例,占10.8%,所检测染色体均为四体7例,占18.9%（其中6例为嵌合体）,其他有1例16三体与X单体同时存在,2例21三体,1例18三体嵌合体。结论：30%以上的早期自然流产与胚胎染色体异常有关,其中16三体最为常见。应用荧光原位杂交技术对自然流产绒毛组织进行遗传学检查是可行且简便快速的,可为遗传咨询提供依据