糖尿病视网膜病变病情进展与阳虚病机的相关性及其代谢组学研究

论文摘要

目的:在探索糖尿病视网膜病变（DR）病情发展过程中的中医证候演变特征基础上,明确阳虚在其病情转化过程中的地位和作用,并利用系统生物学技术初步探索DR与阳虚病机的代谢组学基础,以期科学地阐释阳虚病机主导DR病情进展的作用机制,进而指导临床。方法:①采用多中心临床研究方法,在全国9家医院收集603例2型DR患者,按照临床调查表观察和采集症状并量化,获得信息数据库后,运用频数分布、多元回归分析等统计方法,分析DR的证候特征及其演变规律,以及DR发生发展的危险因素。②基于前期临床研究结果,拟定DR阳虚证候调查表,根据阳虚证的有无,采集89例2型DR患者中医症状并分组为无阳虚证和有阳虚证组,并以及正常健康者30例作对照,统一收集所有观察对象血浆样本,应用气相色谱-飞行时间质谱（GC-TOFMS）技术进行血浆全代谢组学检测,建立DR分期、分证及正常人的血浆代谢组指纹图谱,运用不同化学计量学（OPLS及OSC-PLS）统计方法处理各图谱的信息,进行分期、分证组间的代谢组学差异及可能潜在生物标志物分析,建立相应代谢指纹图谱数据库。结果:①DR中医症状频数分布排序结果中显示总体特征为随DR病情进展症状呈现多样化、复杂化趋势;症状及证候频数分布均表明三期均有气阴两虚基本证候特点,并随病情进展气虚表现逐渐加重,到增殖期出现明显阳虚证候。②DR增殖期发生的危险因素进行相关分析显示与年龄呈负相关,与DM病程、尿蛋白排泄率、糖化血红蛋白、高血脂、阳虚症状积分呈正相关;DR分期等级的相关因素分析中阳虚症状积分每增大1分,使得DR非增殖期转变到增殖期、临床前期发展到非增殖期的可能性增加0.068倍;③DR各组和正常人的代谢指纹图谱分类结果显示DR组同正常组完全分离,DR有阳虚证组和无阳虚证组基本分离,较少重叠,临床前期和非增殖期基本重叠,而增殖期和非增殖期基本分离,重叠较少;说明DR有阳虚证与无阳虚证、增殖期与非增殖期之间在代谢组学方面存在差异;另外,代谢组学分类及比对分析结果显示DR有阳虚证和增殖期的潜在生物标记物均为氨基酸类、有机酸类,此两类化合物均与能量代谢密切相关。结论:气阴两虚是DR基本病机,贯穿疾病的始终,阳虚为DR进入增殖期的最关键危险因素之一。进一步的代谢组学研究结果提示阳虚的实质可能为机体能量相关代谢组学变化,阳虚可能通过影响机体能量代谢致使机体内环境发生重大变化,诱导引起DR增殖性改变的新生血管因子相关基因表达,使DR从非增殖期转化为增殖期.从多中心临床研究与代谢组学研究均说明阳虚为DR病情发展的关键病机。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 缩略词
• 伦理学声明
• 目录
• 引言
• 1.1 研究背景
• 1.1.1 糖尿病及糖尿病视网膜病变的危害和高发病率
• 1.1.2 糖尿病视网膜病变研究难点和热点
• 1.1.3 糖尿病视网膜病变证候研究面临问题
• 1.1.4 糖尿病视网膜病变证候研究的代谢组学方法
• 1.2 课题的提出及研究思路
• 1.2.1 糖尿病视网膜病变证候特征规律及关键病机研究
• 1.2.2 糖尿病视网膜病变阳虚证候—代谢组学研究
• 第一部分 糖尿病视网膜病变证候演变规律临床研究
• 2.1 研究对象
• 2.1.1 病例来源
• 2.1.2 糖尿病视网膜病变相关诊断标准
• 2.1.3 病例选择
• 2.1.3.1 纳入标准
• 2.1.3.2 排除标准
• 2.2 研究方法
• 2.2.1 编制临床调查表
• 2.2.2 确定证候诊断方法
• 2.2.3 病证信息采集方法与步骤
• 2.2.4 观测指标
• 2.2.5 证候信息收集质量控制措施
• 2.2.6 病证信息数据仓库的建立
• 2.2.7 统计分析
• 2.3 结果
• 2.3.1 临床研究中心收集病例情况
• 2.3.2 研究病例一般资料分布情况
• 2.3.3 糖尿病视网膜病变中医证候规律分析
• 2.3.3.1 糖尿病视网膜病变中医症状频数分析
• 2.3.3.2 中医证候频数分析
• 2.3.4 糖尿病视网膜病变病情进展危险因素分析
• 2.3.4.1 增殖性糖尿病视网膜病变发生的多因素分析
• 2.3.4.2 基本证候及风险因子与糖尿病视网膜病变分期的相关性比较
• 小结
• 第二部分 糖尿病视网膜病变的证候代谢组学研究
• 2.4 研究对象
• 2.4.1 研究对象来源
• 2.4.2 糖尿病视网膜病变相关诊断标准
• 2.4.3 研究对象选择标准
• 2.5 研究方法
• 2.5.1 病证信息研究方法
• 2.5.1.1 编制调查表
• 2.5.1.2 确定诊断标准
• 2.5.1.2.1 糖尿病视网膜病变相关诊断标准
• 2.5.1.2.2 中医阳虚证候诊断
• 2.5.1.3 研究对象病证采集方法与步骤
• 2.5.2 代谢组学研究方法
• 2.5.2.1 主要实验材料
• 2.5.2.2 主要实验设备
• 2.5.2.3 实验测定条件
• 2.5.2.4 代谢分析样品采集与预处理
• 2.5.2.5 代谢组学检测过程
• 2.5.2.6 数据处理和识别模式
• 2.5.3 统计方法
• 2.6 结果
• 2.6.1 各组基本信息分布
• 2.6.2 血浆代谢指纹图谱研究
• 2.6.2.1 糖尿病视网膜病变与正常对照组代谢指纹图谱
• 2.6.2.2 糖尿病视网膜病变各期代谢指纹图谱
• 2.6.2.3 糖尿病视网膜病变有阳虚证/无阳虚证代谢指纹图谱
• 2.6.3.1 模式识别分析结果
• 2.6.3.1.1 糖尿病视网膜病变组与正常组代谢图谱分析
• 2.6.3.1.2 糖尿病视网膜病变分期的代谢图谱分析
• 2.6.3.1.3 有阳虚证组与无阳虚组代谢图谱分析
• 2.6.3.2 潜在生物标记物分析结果
• 小结
• 讨论
• 3.1 糖尿病病机特点述要
• 3.2 糖尿病视网膜病变病机探讨
• 3.3 糖尿病视网膜病变病情进展中阳虚病机的作用
• 3.4 糖尿病视网膜病变证候代谢组学研究的探讨
• 3.4.1 代谢组学研究方法的选择
• 3.4.2 糖尿病视网膜病变的代谢组学特征
• 结论
• 问题与展望
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果
• 附图