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肛瘘膏治疗小儿肛瘘的临床与细胞生物学研究

2020-11-23阅读(1021)

肛瘘膏治疗小儿肛瘘的临床与细胞生物学研究

论文摘要

1研究目的小儿肛瘘是小儿科常见的肛肠疾病,其病因和治疗与成人肛瘘不尽相同。尽管某些小儿肛瘘有自愈倾向,但在临床治疗中,由于护理不当等原因,易使病情反复或加重。导师在临床中应用祛风除湿化瘀法治疗小儿肛瘘已经初步取得良好的疗效。本研究拟进一步系统观察肛瘘膏治疗小儿肛瘘的临床疗效,深入研究瘘管反复发作不能愈合及祛风除湿化瘀为治则的肛瘘膏治愈小儿肛瘘的细胞生物学作用机理,为临床治疗本病提供更确切的方法。2研究方法和内容2.1临床研究采用随机、对照的方法选择38例小儿肛瘘患者分为治疗组与对照组各19例。治疗组选用肛瘘膏,对照组选用马应龙麝香痔疮膏,记录患者的发病病因、病程、疾病分型、体温、内口位置及数量、采用3级评分法评定患者临床症状、体征、指诊、舌苔、脉象或察指纹情况;治疗后症状、体征、指诊、肛管局部分泌物pH值的变化、不良反应及随访情况。2.2实验研究⑴实验一:选择手术剔除的一完整小儿肛瘘瘘管组织,采用组织细胞体外培养技术原代培养成纤维细胞并进行纯化、传代。观察成纤维细胞一般生物学特性、绘制成纤维细胞生长曲线、成纤维细胞HE染色观察并采用免疫细胞化学进行细胞起源鉴定。对照组取直肠下段黏膜、黏膜下层组织标本进行体外成纤维细胞培养观察。⑵实验二:选用体外培养的肛瘘瘘管组织成纤维细胞,并与PPH术(痔上黏膜环形切除吻合术)中取下的直肠下段黏膜及黏膜下层组织进行体外细胞培养的对数生长期成纤维细胞做对照,分别加入用药物血清学方法制备的不同浓度全方药物血清、祛风除湿拆方及活血化瘀拆方药物血清。观察各组成纤维细胞生物学性状的改变。应用流式细胞仪检测用药前后细胞周期及细胞凋亡情况。⑶实验三:将原代培养的肛瘘瘘管组织细胞进行酶消化法纯化培养获得上皮细胞,采用免疫细胞化学进行细胞起源鉴定。取培养的上皮细胞分别加入不同浓度全方、祛风除湿拆方、活血化瘀拆方水溶液,药物干预后12h、24h,观察各组上皮细胞的一般生物学性状变化,应用间接免疫荧光细胞化学法联合LSCM观测瘘管上皮细胞角蛋白分布及含量变化。⑷实验四:向对数生长期瘘管成纤维细胞悬液内加入含不同浓度药物血清的DMEM

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 英文缩略词表
  • 第一部分 文献综述
  • 综述1 小儿肛瘘的诊治进展
  • 综述2 中药外用治疗疮疡作用机理现代研究进展
  • 第二部分 临床研究
  • 前言
  • 临床资料
  • 诊疗标准
  • 1 诊断标准
  • 2 临床疗效评定标准
  • 结果
  • 1 临床症状改善情况
  • 2 用药前后内口及瘘管内分泌物pH值变化
  • 3 肉芽组织开始生长时间、内外口愈合时间
  • 4 两组患者临床疗效比较
  • 5 两组患者用药后不良反应比较
  • 6 随访情况
  • 讨论
  • 1 小儿肛瘘病因病机诊断学分析
  • 2 正确处理内口和瘘管在小儿肛瘘治疗中的意义
  • 3 祛风除湿化瘀法为小儿肛瘘的治疗原则
  • 4 肛瘘膏可促进创面“偎脓长肉”
  • 5 临床研究结果分析
  • 参考文献
  • 第三部分 实验研究
  • 实验一 小儿肛瘘瘘管组织体外培养成纤维细胞模型的建立
  • 前言
  • 材料方法
  • 结果
  • 1 倒置显微镜下肛瘘瘘管组织成纤维细胞的观察结果
  • 2 肛瘘瘘管组织成纤维细胞生长曲线
  • 3 肛瘘瘘管组织成纤维细胞HE染色结果
  • 4 肛瘘瘘管组织成纤维细胞鉴定结果
  • 5 冻存细胞
  • 实验二 药物血清干预小儿肛瘘瘘管组织体外培养成纤维细胞的实验研究
  • 前言
  • 材料方法
  • 结果
  • 1 药物血清干预后肛瘘瘘管成纤维细胞的细胞生物学特性变化
  • 2 药物血清干预后细胞增殖活性变化
  • 3 药物血清干预后成纤维细胞的HE染色观察
  • 4 药物血清干预前后细胞周期及细胞凋亡情况
  • 实验三 小儿肛瘘瘘管组织体外培养上皮细胞模型的建立及药物干预实验研究
  • 前言
  • 材料方法
  • 结果
  • 1 培养上皮细胞的一般生物学性状观察结果
  • 2 药物作用后上皮细胞的形态学变化结果
  • 3 细胞鉴定结果
  • 4 LSCM检测细胞角蛋白结果
  • 实验四 小儿肛瘘瘘管组织巨噬细胞体外分离培养及药物血清干预巨噬细胞释放NO、TNF-α的影响研究
  • 前言
  • 材料方法
  • 结果
  • 1 用药后培养6h、12h后各组细胞上清液中TNF-α和NO浓度变化
  • 讨论
  • 1 小儿肛瘘瘘管组织细胞培养有关问题探讨
  • 2 采用药物血清学实验技术有关问题探讨
  • 3 检测细胞增殖活性的探讨
  • 4 LSCM检测上皮细胞骨架蛋白的探讨
  • 5 小儿肛瘘发病及肛瘘膏治疗机理探讨
  • 6 实验结果分析
  • 参考文献
  • 结语
  • 致谢
  • 个人简历

    • 相关论文文献

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