神经干细胞与骨髓间充质干细胞移植对脊髓损伤修复的比较研究

论文摘要

目的：比较神经干细胞和骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤效果与机制的差异。方法：用成年Wistar大鼠建立脊髓半横切模兴,随机分为神经干细胞(NSCs)组(n=10)、骨髓间充质干细胞(BMSC)注射组(n=10)、PBS注射组(n=10)及只打开椎板的假手术组(n=10)。移植后行BBB运动功能学评分,半切位置的免疫组化及核磁成像比较。结果：BBB评分NSCs注射组明显高于BMSCs注射组,NSCs注射组和BMSCs注射组均明显高于PBS注射组,脊髓切片中可观察到被标记的NSCs及BMSCs,核磁成像显示移植后半切形成的脊髓空洞有所减小结论：静脉注射NSCs、BMSCs均能改善脊髓损伤大鼠的运动功能,但注射NSCs效果更明显。静脉注射干细胞后,细胞可迁移至脊髓损伤的位置,核磁成像显示脊髓空洞有所减小,提示干细胞可能通过补充或替代损失的神经细胞,修复已缺失的神经组织和功能性神经单位,重建神经环路。

论文目录

• 创新点
• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 研究背景
• 1.2 骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的研究现状
• 1.3 本课题的研究内容
• 1.3.1 BMSCs和NSCs培养及鉴定
• 1.3.2 动物分组及模型制作
• 1.3.3 BMSCs及NSCs细胞悬液的制备
• 1.3.4 BMSCs及NSCs移植
• 1.3.5 两种干细胞移植对损伤脊髓修复的影响评价
• 第2章 BMSCs和NSCs培养及鉴定
• 2.1 BMSCs的取材和培养
• 2.1.1 实验材料
• 2.1.2 取材、分离及培养
• 2.2 神经干细胞分离培养
• 2.2.1 实验材料
• 2.2.2 孕鼠繁殖
• 2.2.3 神经干细胞取材
• 2.3 BMSCs及NSCs的鉴定
• 2.3.1 BMSCs鉴定
• 2.3.1.1 实验材料
• 2.3.1.2 细胞形态观察
• 2.3.1.3 细胞表面特异性分子标记检测
• 2.3.1.4 BMSCs分化实验
• 2.3.2 NSCs鉴定
• 2.3.2.1 实验材料
• 2.3.2.2 细胞形态观察
• 2.3.2.3 细胞表面特异性分子标记监测
• 2.3.2.4 NSCs分化实验
• 2.4 Brdu标记BMSCs及NSCs
• 第3章 动物模型及干细胞移植
• 3.1 动物分组
• 3.2 大鼠脊髓损伤模型的制作
• 3.2.1 实验材料
• 3.2.2 模型制作
• 3.3 BMSCs及NSCs细胞悬液的制备
• 3.4 BMSCs/NSCs脊髓移植方法
• 第4章 术后评估
• 4.1 开放场地实验（Open field locomotor test,BBB）
• 4.2 影像学检测
• 4.3 组织学检查
• 4.3.1 脊髓切片HE染色
• 4.3.2 脊髓冰冻切片免疫荧光染色
• 第5章 数据与结果
• 5.1 骨髓间充质干细胞、神经干细胞的培养
• 5.1.1 骨髓间充干细胞的取材、分离、培养
• 5.1.2 神经干细胞的取材、分离、培养
• 5.2 骨髓间充质干细胞及神经干细胞的鉴定
• 5.2.1 骨髓间充质干细胞的鉴定
• 5.2.2 神经干细胞的鉴定
• 5.3 Brdu标记骨髓间充质干细胞及神经干细胞
• 5.4 动物模型
• 5.5 移植两种干细胞后各方面的评估
• 5.5.1 开放场地实验（BBB评分）
• 5.5.2 影像学检查
• 5.5.3 组织学检查
• 第6章 分析及讨论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢