论文题目: 趋化因子受体5在相关疾病中的作用机制研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 微生物与生化药学
作者: 王栋
导师: 郭葆玉
关键词: 型糖尿病,乳腺浸润性导管癌,胸腺素原
文献来源: 第二军医大学
发表年度: 2005
论文摘要: 本文主要着眼于CCR5在1型糖尿病及乳腺癌中的作用机制研究。第一部分综合应用了RNA干扰技术和流式细胞仪分选技术,在细胞及NOD小鼠动物模型上研究了CCR5~+T细胞在1型糖尿病发生发展中的可能的作用机制,发现CCR5可能主要通过影响Th1/Th2细胞因子的分泌和参与早期的胰岛炎而影响1型糖尿病的进程。第二部分主要应用免疫组织化学技术和ELISA技术,研究了乳腺浸润性导管癌组织中CCR5的表达情况以及血清中相关趋化因子的含量,发现乳腺浸润性导管癌组织上有趋化因子受体5的表达,其在乳腺癌的发生发展中可能起重要作用,而RANTES可能是与其相作用的主要配体。第三部分主要应用大肠杆菌克隆表达了人胸腺素原α的新亚型,并进行了初步的活性检测。
论文目录:
英文缩略词表
中文摘要
英文摘要
引言
第一部分 趋化因子受体5在1型糖尿病发生发展中的作用机制研究
前言
实验材料
1 实验动物
2 主要化学药品和生物试剂
3 主要试剂的配制
实验方法
1 糖尿病NOD鼠T细胞培养
2 CCR5在糖尿病NOD鼠T细胞的表达
3 CCR5-RNAi质粒的构建及筛选
4 DEAE-dextran法转染CCR5-RNAi质粒
5 流式细胞仪检测转染shRNAi质粒后CCR5含量的变化
6 流式细胞仪分选转染CCR5-shRNA-1质粒后的GFP~+和GFP~-T细胞
7 GFP~+和GFP~-T细胞RT-PCR检测CCR5的变化
8 GFP~+和GFP~-T细胞细胞周期的检测
9 GFP~+和GFP~-T细胞Th1和Th2细胞因子的检测
10 分别过继CCR5~+、CCR5~-和CCR5~(+/-)T细胞于NOD.scid鼠观察糖尿病发病情况
实验结果
1 糖尿病NOD鼠T细胞培养
2 CCR5在糖尿病NOD鼠T细胞的表达
3 CCR5-RNAi质粒的构建及筛选
4 DEAE-dextran法转染CCR5-RNAi质粒
5 流式细胞仪检测转染shRNAi质粒后CCR5含量的变化
6 流式细胞仪分选转染CCR5-shRNA-1质粒后的GFP~+和GFP~-T细胞
7 GFP~+和GFP~-T细胞RT-PCR检测CCR5的变化
8 GFP~+和GFP~-T细胞细胞周期的检测
9 转染CCR5-shRNA-1质粒对T细胞分泌细胞因子的影响
10 流式细胞仪分选CCR5~+和CCR5~-T细胞
11 CCR5~+T细胞对TIDM发病的影响
讨论
1 研究CCR5与1型糖尿病关系的必要性
2 应用RNAi技术研究CCR5与1型糖尿病的可行性
3 糖尿病NOD鼠T细胞CCR5 RNAi后的生物学变化
4 CCR5参与1型糖尿病病程的作用机理探讨
参考文献
第二部分 趋化因子受体5在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及意义
前言
试剂和仪器
1 主要试剂
2 主要试剂配制
3 主要仪器
实验方法
1 CCR5免疫组化的检测
2 ELISA检测相关趋化因子的含量
实验结果
1 CCR5在乳腺浸润性导管癌上的表达
2 乳腺浸润性导管癌患者血清中相关趋化因子的含量
讨论
参考文献
第三部分 胸腺素原a的克隆表达和初步活性测定
前言
试剂和仪器
1 主要试剂
2 主要试剂配制
3 主要仪器
实验方法
1 ProTα基因的RT-PCR扩增
2 ProTαPCR产物胶回收
3 PCR产物及载体pBV220的双酶切
4 ProTα的在大肠杆菌中的诱导表达
5 rhProTα的活性测定
实验结果
1 RT-PCR扩增ProTα序列的电泳结果
2 ProTα在大肠杆菌中的表达
3 表达产物活性的初步测定
讨论
参考文献
致谢
附录一 文献综述(一)
文献综述(二)
附录二 RNAi质粒测序报告
附录三 博士就读期间发表的论文
发布时间: 2005-07-19
参考文献
- [1].Fas-FasL在NOD小鼠胰岛炎中的作用[D]. 曹峻洋.中国协和医科大学2002
- [2].内分泌与代谢病的免疫学发病机制研究[D]. 逄曙光.山东大学2008
- [3].NOD鼠I型糖尿病的发病机理及免疫治疗[D]. 张俊.中国科学技术大学2011
- [4].胰岛β细胞凋亡在NOD鼠糖尿病发生发展及免疫干预中的作用研究[D]. 蒋铁建.中南大学2003
相关论文
- [1].趋化因子受体CXCR4在恶性胶质瘤侵袭和血管生成中的作用研究[D]. 杨世昕.第三军医大学2004
- [2].人单核细胞（THP-1）cDNA表达文库的构建及趋化因子CXCL14（MIP-2γ/BRAK）受体的寻找[D]. 刘斌.第二军医大学2005
- [3].趋化因子及其受体在肝细胞癌门静脉侵袭中作用研究[D]. 王晓颖.复旦大学2005
- [4].CXCR4在肺癌侵袭转移中的作用及其机制[D]. 苏丽萍.复旦大学2005
- [5].趋化因子及其受体在子宫内膜异位症发病中的作用[D]. 罗雪珍.复旦大学2005
- [6].趋化因子CXCL12-CXCR4生物轴对大肠癌肝脏定向转移的影响及其分子机制研究[D]. 郑宏刚.天津医科大学2006
- [7].趋化因子受体CCR1在肝细胞癌侵袭和转移中作用研究[D]. 吴晓峰.复旦大学2007
- [8].趋化因子受体表达与原发性肝癌肺转移关系的研究[D]. 薛同春.复旦大学2007
- [9].趋化因子受体CXCR4表型敲除抑制乳腺癌转移的研究[D]. 陈宏远.重庆大学2007
- [10].趋化因子受体CXCR4及其配体CXCL12在肝细胞癌转移中的研究[D]. 刘辉.中南大学2007
标签：型糖尿病论文; 乳腺浸润性导管癌论文; 胸腺素原论文;