黄飞（江苏省扬中市人民医院检验科212200）
【中图分类号】R466.12【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2011)16-0067-02
【摘要】目的探讨SysmexUF-1000i尿沉渣分析仪（简称UF-1000i）提示尿路感染信息（UTI）用于诊断尿路感染的可靠性。方法用无菌试管收集中段尿液标本,同时分别做尿细菌培养和UF-1000i尿沉渣分析,比较两者的细菌计数结果。结果在224例标本中,UF-1000i尿沉渣分析仪分析75例标本提示UTI信息，细菌培养有56例标本尿液培养为阳性。其假阳性率为9.5%，假阴性率为28.6%，敏感性为71.4%,特异性为90.5%,阳性预示值为53.3%,阴性预示值为89.3%,准确度为77.2%。两种方法统计学比较P<0.01,两者统计学有差异，但两法检测结果间有密切关联性（x2=7.07,P<0.005）结论用UF-1000i尿沉渣分析仪检测尿沉渣中细菌计数结果大部分与培养结果一致,仪器提示的尿路感染信息可以作为有无细菌感染的参考指标。
【关键词】UF-1000i尿沉渣分析仪细菌培养尿路感染
1材料与方法
1.1标本来源2009年12月至2010年1月共收集224份清洁中段尿，标本来自上海第十人民医院门诊和住院患者,肾内科55例,泌尿外科56例，泌甲科26例，其他科室87例（包括门诊19例）。
1.2器材（1）日本Sysmex公司生产的UF-1000i全自动尿液分析仪。（2）德国西门子公司生产的MicroScanauto-SCAN4细菌鉴定分析仪及配套细菌鉴定板条。（3）定量接种环1μl。
1.3试剂（1）Sysmex公司提供的原装稀释液UPS-300(批号A9019)、UPB-300(批号A9020);染液USS-800A(批号9015)、USB-800A(批号A9015);鞘液(尿沉渣分析仪UF-1000i专用,批号G9019)。（2）上海伊康生物有限公司提供的血培养基和麦康凯培养基。（3）西门子公司提供革兰阴性菌鉴定版NC31（批号201-10－21），革兰阳性菌鉴定版PC20（批号2010－7－28）。
1.4质控物（1）上海临床检验中心提供的尿液质控品。（2）标准菌株：金黄色葡萄球菌(ATCC25923)，粪肠球菌(ATCC29212)，大肠埃希菌(ATCC25922)，铜绿假单胞菌（ATCC27853）。
1.5方法
1.5.1标本留取用一次性无菌试管收集患者清晨第1次清洁中段尿10ml(女性患者在留尿前要求清洁外阴),在收集尿液后1小时内送至实验室检查，超过2h者应重新送检。每份标本均先进行细菌培养,然后再用UF-1000i测定其细菌数。为了排除细菌繁殖干扰,每份标本的两种实验应控制在2小时之内完成。如果不能及时检测，应将标本置于4-8℃冰箱内保存，并于6小时内检测完毕[2]。
1.5.2尿液细菌培养判断方法用1μl定量接种环取混匀尿液划线接种于血培养基和麦糠凯培养基上,37℃培养24-48小时,做菌落计数,细菌生长且菌落计数革兰阳性球菌≥104cfu/ml或革兰阴性杆菌≥105cfu/ml时为细菌培养阳性(当有两种致病菌生长时,选计数接近或≥104的细菌为阳性统计菌,若有两种以上杂菌生长则视为污染,重新送检)[3]。对于阳性标本选取一个单位，用专用稀释液稀释300倍，将细菌悬液注入革兰阳性菌及革兰阴性菌专用鉴定板中，每孔100μl，37℃培养24小时后用Mic-san细菌鉴定仪进行菌种鉴定，报告结果。
1.5.3UF-1000i的使用开机后，每日工作前先用上海市临检中心提供的质控品进行质控,之后再检测标本。将每日收集的标本混匀,仪器自动吸取800μl尿液，其中选出62.5μl进行细菌分析检测,UF-1000i检测时尿液被真空吸入转换用的细菌检测通道（BACTERIA-ch）后,加入特定的细菌染色剂UFIIPAC-BAC抑制参杂物的非特异性染色，UFIISEARCH-BAC将细胞核酸成份进行特异染色，细菌菌体被荧光染料着色后,在鞘流贯流分析池内经激光照射,由计算机甄别每个粒子所发出的荧光强度，前向散射光强度及侧向散射光强度并进行分析,然后报告每微升细菌数量，细菌分布散点图等信息；同时根据激光散射强度、散射波幅不同报告每微升白细胞数量。通过细菌数量和白细胞数量的组合，显示UTI信息，提示尿路感染可能性，作为诊断帮助信息。
1.6统计学方法采用配对资料x2检验。并计算UF-1000i检测分析阳性时的假阳性率、假阴性率、敏感性、特异性、准确度、阳性预示值和阴性预示值。
2结果
2.1尿液细菌培养结果224例尿标本中，有56例检测出细菌，阳性率25.0%(见表1)。
2.2UF-1000i细菌计数结果UF-1000i测定结果按仪器说明及相关资料以细菌计量≥10000/μl为阳性和白细胞计量≥10/μl为阳性，显示UTI信息，报告提示尿路感染可能。并且计算UF-1000i检测分析阳性标本的假阳性、假阴性、敏感性、特异性、阳性预示值和阴性预示值。从而为临床更好的，更准确的提供仪器检测参考信息。本次实验中UF-1000i分析提示的UTI阳性结果有75例（阳性率53.3%），其中UF-1000i分析提示UTI阳性而细菌培养阴性的35例，假阳性率20.8%，UF-1000i分析提示UTI阴性的培养阳性的16例，假阴性率9.5%，UF-1000i的敏感性71.4%，特异性为90.5%，阳性预示值为53.3%,阴性预示值为89.3%,准确度(accuracy,ACC)为77.2%。两法检测阳性率差异有显著性(P<0.05)(见表2)。
表156例尿培养阳性致病菌分布比例分析
表2UF-1000i分析结果与细菌培养比较(n)
3讨论
3．1尿路感染(urinarytractinfection,UTI)是泌尿系统的常见疾病之一,发病率仅次于上呼吸道感染。病原体引起肾脏、输尿管、膀胱、尿道等不同部位不同程度的感染,可以引起尿频、尿急、尿痛、发热、肾区不适等临床症状,如不及时治疗常常会导致慢性感染[1]。定量尿培养是诊断尿路感染的金标准,但是从尿液细菌培养的采集、取样到出报告需3-4天,且阴性率可达80%,费用较高，浪费了大量的医疗资源。UF-1000i检测原理是采用红色半导体激光的流式细胞分析方法,对尿中有形成分(红细胞、白细胞、上皮细胞、透明管型、细菌、结晶、酵母样真菌、小圆上皮细胞、病理性管型、粘液丝、精子、电导率)进行定量分析,提供定量参数。通过流式细胞分析方法得到尿中有形成份的前向散射光、侧向散射光以及侧向荧光的信息为基准,并采用DNA/RNA细胞分析技术对尿中有形成份进行高精度分析[4]。单独的细菌分析通道（BACTERIA-ch）及专用试剂系统用于特定细菌染色，加入特定的细菌染色剂UFIIPAC-BAC抑制参杂物的非特异性染色；UFIISEARCH-BAC将细胞核酸成份进行特异染色，细菌菌体被荧光染料着色后,在鞘流贯流分析池内经激光照射,由计算机甄别每个粒子所发出的荧光强度，前向散射光强度及侧向散射光强度并进行分析,通过对B-FSC（粒子大小）,B-FLH（核染色程度）和B-FSCW（粒子长度）的分析得到细菌计数及性质的信息。可非常敏感检测浓度下降到在102到103/ml之间数量级的细菌，当样品值超过设定的多个基础值上限时自动重新运行[5]。UF-1000i测定结果按仪器说明及相关资料以细菌计量≥10000/μl和白细胞计量≥10/μl的组合为阳性，提示尿路感染作为诊断帮助信息。本实验用日本Sysmex公司产品UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测中段尿标本,选择了与UTI关系紧密、发生感染炎症时变化较显著的参数(细菌计量、白细胞计量)进行对比分析,并与公认的诊断UTI的“金标准”细菌培养进行了比较[6]。
3.2本文表1结果显示,226份中段尿标本共培养出细菌56例。其中革兰阴性菌以大肠埃希菌为主，一共26例，占总数的46.4%；其次为鲍曼不动杆菌，共8例，占总数的14.3%；肺炎克雷伯菌，共4例，占总数的7.1%；铜绿假单胞菌，共4例，占总数的7.1%；变形杆菌1例，占总数的1.2%。革兰阳性菌以肠球菌属为主，一共9例，占总数的16.1%；其次为表皮葡萄球菌和溶血性葡萄球菌，各2例，分别占总数的3.6%。与国内有关文献报道一致，认为肠杆菌科细菌尤其是大肠埃希菌是引起UTI的主要致病菌,其次为非发酵菌[7]。
3.3本文表2结果显示，224例尿标本中，UF-1000i分析提示UTI阳性的有75例，占33.5%。其中UF-1000i分析提示与细菌培养结果一致的40例，占总数的53.3%；35例UF-1000i分析提示UTI阳性而尿液中无细菌生长；16例UF-1000i分析提示UTI阴性但尿液中培养出细菌。其假阳性率为9.5%，假阴性率为28.6%，敏感性为71.4%,特异性为90.5%,阳性预示值为53.3%,阴性预示值为89.3%,准确度为77.2%。经配对资料的x2检验P<0.01,两者统计学有差异，说明两种方法检测细菌有差别。但两法检测结果间有密切关联性（x2=7.07,P<0.005，r=0.427），两者间有良好的相关性，UF-1000i对细菌的测定值与细菌培养成正相关。但仪器的假阴性率太高(28.6%),仪器检测的提示信息不能单一的作为判断UTI的指标。阴性预示值为89.3%，说明仪器的提示信息作为初筛工具是有效的。因此UF-1000i尿沉渣分析仪的尿路感染信息可以作为有无细菌感染的参考指标,用于临床诊断泌尿系统感染，并以此结果作为临床检测细菌的初筛方法：当其提示为UTI阳性时再做尿液细菌培养，减少不必要的培养和时间，为临床提供早期诊断尿路感染的依据，达到快速治疗的目的。但如要确诊泌尿道是否有细菌感染以及感染细菌的种类则必须作细菌培养。
总之,将UF-1000i尿液分析仪作为临床检测细菌的初筛方法是可行的，能为临床提供早期诊断尿路感染的依据，达到快速、简便、经济,且特异性和准确性较高,可以给临床提供更快捷、更准确的信息,达到临床诊断尿路感染和快速治疗的目的。
参考文献
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