导读:本文包含了农杆菌法论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:SNC1,农杆菌介导法,茎尖,陆地棉
农杆菌法论文文献综述
雷江荣,王冬梅,邵林,危晓薇,黄乐平[1]（2010）在《农杆菌法转化茎尖获得转SNC1基因棉花及其T_1植株对棉花枯萎病的抗性》一文中研究指出以陆地棉中35和军棉1号的茎尖为外植体,利用农杆菌介导法将含有拟南芥抗病基因SNC1(sup-pressor of npr1-1,constitutive 1)转入棉花。对外植体培养时期、农杆菌侵染时间和共培养时间进行改良,实验结果表明,在外植体培养1d,菌液侵染20min,并且共培养保持在2d能够获得较高的遗传转化效率。PCR以及RT-PCR对再生植株T0代和T1代棉花的检测结果表明,SNC1基因已经整合到棉花的基因组中并得到表达。利用浸根法,对T1代转基因棉花接种棉花枯萎病菌强致病力菌株(Fusarium oxysporum f.sp.Vasinfectum),与对照比较,T1代转基因棉花的枯萎病抗性明显提高。(本文来源于《分子植物育种》期刊2010年02期）
丁小维,刘开辉,邓百万,陈文强,刘飞虎[2]（2008）在《根癌农杆菌法转化康乃馨的条件探索》一文中研究指出[目的]为构建高效的康乃馨遗传转化体系奠定基础。[方法]以康乃馨叶片为受体材料,通过抗G418筛选,探讨预培养时间、根癌农杆菌菌液浓度、共培养时间等因素对根癌农杆菌介导康乃馨遗传转化的影响。[结果]20 mg/ml G418是康乃馨叶片转化的适宜浓度。随着预培养时间的增加,康乃馨叶片的存活率降低,预培养2~3 d时抗性芽分化率较高。当根癌农杆菌OD600为0.5~0.8时,抗性芽分化率较高,适合康乃馨转化。共培养2~3 d时,康乃馨叶片生长状态好,抗性芽分化率最高。[结论]预培养、共培养各2~3 d,菌液浓度OD600为0.5~0.8是根癌农杆菌介导康乃馨遗传转化的适宜条件。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2008年13期）
党尉,卫志明[3]（2007）在《根癌农杆菌法将双价抗虫基因导入大豆的研究》一文中研究指出大豆(Glycine max)是一种重要粮食、油料和饲料作物,是植物蛋白的主要来源,在国内外市场上占有十分重要的地位。转基因大豆的研究也因此受到普遍重视。目前转基因大豆在全球已经大规模种植,但其遗传转化却仍然是基因工程领域的难点之一。尽管利用电击法、PEG 法、基因枪法、质体转化法也都成功地获得了转基因大豆植株,但是农杆菌作为一种自然的植物基因转化系统,具有操作方便、费用低廉、可插入外源基因片段大、不易发生重排、拷贝数低等优点,因而备受科研工作者的重视。(本文来源于《2007中国植物生理学会全国学术会议论文摘要汇编》期刊2007-08-01）
于洋,卫志明[4]（2007）在《根癌农杆菌法将双价抗虫基因导入小麦的研究》一文中研究指出以优质高产的小麦品种“扬麦158”为材料,以预培育4天的幼胚为转化受体,经根癌农杆菌 EHA105/pCAMBIA3300[含苏云金芽孢杆菌毒蛋白基因 cryIA(c)、半夏凝集素基因 pta 和 bar 基因]感染后,筛选出抗性愈伤组织,并进一步获得了转化植株。经 PPT 筛选产生抗性愈伤组织的频率达到20%左右。目前,我们已获得移栽成活的扬麦158抗性植株11株,其中 PCR 阳性植株7株,进一步的 Southern 杂交鉴定工作正在进行中。(本文来源于《2007中国植物生理学会全国学术会议论文摘要汇编》期刊2007-08-01）
李明[5]（2007）在《农杆菌法转化棉花茎尖组织的初步研究》一文中研究指出农杆菌法是当今转基因植物研究中应用最为广泛的技术,因具有转化工作不受季节限制、转化机理较为清楚、转基因植株多为单拷贝和转化效率较高等优点而备受青睐。采用农杆菌介导法和基因枪法进行棉花遗传转化时,一般都需经过离体培养再生植株的过程,实验周期长,且受到基因型(本文来源于《中国棉花》期刊2007年05期）
蔡海云[6]（2006）在《农杆菌法介导反义咖啡碱合成酶基因转入茶树成熟胚的研究》一文中研究指出利用基因工程进行茶树遗传改良的研究一直被受人们的关注。本研究以龙井43#、槠叶种、农抗早优良品种为材料,通过建立合适的再生体系,利用农杆菌法转化,将含有反义TCS基因的工程菌,导入龙井43#、槠叶种、农抗早优良品种茶树成熟胚,并通过GUS瞬时表达情况对农杆菌法转化参数进行了优化,用Kan对转化后的材料进行筛选,获得以下结果:1.茶树成熟胚的培养本研究在前人基础上首次以成熟胚作为外植体培养,建立了愈伤组织再生体系和胚萌发体系,为茶树的遗传转化奠定了基础。研究证明:在愈伤组织再生体系中,培养基和基因型是影响成熟胚愈伤组织诱导和再生频率的主要因素。龙井43#和农抗早在附加2 mg/L 2,4-D、0.5mg/L KT的MS培养基上出愈率最高,而槠叶种则在附加2 mg/L 2,4-D、1.0mg/L KT的MS培养基上诱导效果较好。基因型主要影响愈伤组织的再生频率,龙井43#分化率为14.2%,而农抗早分化率为8.5%,槠叶种分化率为3.3%,根的分化率达到40%,获得完整植株大概需要一年半的时间;在胚萌发体系中,成熟胚直接培养,快速获得再生苗,2 mg/L 6-BA的MS培养基适合成熟胚直接培养获得幼苗,添加2 mg/L IBA,根的分化率达到86%,大概需要半年时间可以培养出生长健壮的幼苗。2.农杆菌转化体系的建立通过GUS瞬时表达对农杆菌法转化条件进行了优化。结果表明:预培养3天,农杆菌浓度OD600为0.6,乙酰丁香酮浓度为500μmol/L,共培养5天时,GUS基因具有较好的表达效果。3.转化体的筛选结果对成熟胚进行Kan敏感性实验,确定了不同筛选阶段的Kan选择压浓度:成熟胚生长、生根时Kan分别为50 mg/L、75 mg/L。为了减少Carb对成熟胚生长的抑制作用,以400 mg/L Carb作为抑菌剂的浓度。用建立的转化体系和筛选方案对叁个品种进行转化,得到10株抗性茶树幼苗,利用RT-PCR法对转基因植株进行了检测。(本文来源于《安徽农业大学》期刊2006-06-30）
郭丽红,陈善娜,龚明[7]（2003）在《根癌农杆菌法转化烟草的条件探索》一文中研究指出利用含有四环素阻遏蛋白,具有卡娜霉素抗性的烟草种子为实验材料,采用根癌农杆菌介导转化中的叶圆盘法,将外源基因导入烟草愈伤组织,建成可诱导表达细胞质和细胞核CaM/CaM结合多肽的转基因烟草体系.在获得转基因植物的过程中,通过比较影响根癌农杆菌转化频率的各种因素,表明植物材料的选择和培养,农杆菌的培养和稀释,植物材料与农杆菌共培养的程度及转基因植株的筛选条件是影响农杆菌转化效率的重要因素.(本文来源于《云南大学学报(自然科学版)》期刊2003年02期）
王声斌,邹伟权,余让才,房师松,黄自然[8]（2002）在《农杆菌法将抗菌肽D基因导入蕉柑胚性细胞的研究》一文中研究指出用农杆菌介导的方法成功地将抗菌肽D基因导入到蕉柑胚性悬浮细胞 .再生芽经PCR、Southern杂交证明抗菌肽D基因已整合到其基因组DNA中 .在农杆菌介导的蕉柑胚性悬浮细胞转化过程中 ,共培养介质中的乙酰丁香酮 (As)能显着提高其转化效率 ,与对照相比 ,每克悬浮细胞转化后形成的抗卡那霉素细胞团数从 0提高到 0 .75 .悬浮细胞与农杆菌共培养时间对转化效率也具有显着影响 ,共培养 1、2、3d后 ,每克悬浮细胞转化后形成的抗卡那霉素细胞团数分别为 0 .2 0、0 75、0 .(本文来源于《华南农业大学学报》期刊2002年02期）
王慧中,赵培洁,周晓云[9]（2000）在《农杆菌法转化获得转基因西瓜植株》一文中研究指出西瓜子叶外植体能被含双元载体 p BPMWMV的根瘤农杆菌感染 .该质粒载体含有一个 npt- 基因以供选择 Kanr的转基因西瓜植株以及一个 WMV- 2 CP基因 . Kanr西瓜植株经 NPT- 酶活性检测、DNA分子点杂交及 Southern杂交试验证明 ,外源的 WMV- 2 CP基因已导入西瓜细胞 .(本文来源于《浙江大学学报(农业与生命科学版)》期刊2000年01期）
尹中朝,杨凡,许耀,李宝健[10]（1998）在《利用根癌农杆菌法获得转基因水稻植株及其后代》一文中研究指出在100μmol／L乙酰丁香酮（AS）等vir基因诱导分子存在的情况下，用含双元载体pBYT2的根癌农杆菌菌株EHA101同水稻（OrizasativaL．）台北309悬浮培养细胞共培养3天。经过2个月的连续筛选，共从364颗同根癌农杆菌共培养的悬浮培养细胞团中得到17个具有稳定潮霉素抗性和GUS表达的愈伤组织。对从8个转化组织中得到的10株可能的R0代转基因植株及其后代进行外源基因的整合和表达分析，Southern分析表明外源基因已稳定地整合进水稻基因组中并实现了有性遗传传递。杂交结果显示在其中一个转化系的植株中有5个拷贝的T－DNA整合，而其余的转化系则只整合了1个拷贝。转基因水稻细胞及植株中GUS活性的组织化学染色观察和荧光分析表明玉米ubiquitin基因启动子在水稻细胞中能高效启动gus报告基因的表达。ndPAGE－X－Gluc法检测表明转基因水稻细胞中表达的GUS蛋白比Sigma公司的标准GUS蛋白（SigmaCo．G0786）要小，而与来自大肠杆菌HB101（pBI1121）中的GUS蛋白大小相同。结果表明，根癌农杆菌可有效且可靠地介导外源基因转化水稻。(本文来源于《遗传学报》期刊1998年06期）
农杆菌法论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
[目的]为构建高效的康乃馨遗传转化体系奠定基础。[方法]以康乃馨叶片为受体材料,通过抗G418筛选,探讨预培养时间、根癌农杆菌菌液浓度、共培养时间等因素对根癌农杆菌介导康乃馨遗传转化的影响。[结果]20 mg/ml G418是康乃馨叶片转化的适宜浓度。随着预培养时间的增加,康乃馨叶片的存活率降低,预培养2~3 d时抗性芽分化率较高。当根癌农杆菌OD600为0.5~0.8时,抗性芽分化率较高,适合康乃馨转化。共培养2~3 d时,康乃馨叶片生长状态好,抗性芽分化率最高。[结论]预培养、共培养各2~3 d,菌液浓度OD600为0.5~0.8是根癌农杆菌介导康乃馨遗传转化的适宜条件。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
农杆菌法论文参考文献
[1].雷江荣,王冬梅,邵林,危晓薇,黄乐平.农杆菌法转化茎尖获得转SNC1基因棉花及其T_1植株对棉花枯萎病的抗性[J].分子植物育种.2010
[2].丁小维,刘开辉,邓百万,陈文强,刘飞虎.根癌农杆菌法转化康乃馨的条件探索[J].安徽农业科学.2008
[3].党尉,卫志明.根癌农杆菌法将双价抗虫基因导入大豆的研究[C].2007中国植物生理学会全国学术会议论文摘要汇编.2007
[4].于洋,卫志明.根癌农杆菌法将双价抗虫基因导入小麦的研究[C].2007中国植物生理学会全国学术会议论文摘要汇编.2007
[5].李明.农杆菌法转化棉花茎尖组织的初步研究[J].中国棉花.2007
[6].蔡海云.农杆菌法介导反义咖啡碱合成酶基因转入茶树成熟胚的研究[D].安徽农业大学.2006
[7].郭丽红,陈善娜,龚明.根癌农杆菌法转化烟草的条件探索[J].云南大学学报(自然科学版).2003
[8].王声斌,邹伟权,余让才,房师松,黄自然.农杆菌法将抗菌肽D基因导入蕉柑胚性细胞的研究[J].华南农业大学学报.2002
[9].王慧中,赵培洁,周晓云.农杆菌法转化获得转基因西瓜植株[J].浙江大学学报(农业与生命科学版).2000
[10].尹中朝,杨凡,许耀,李宝健.利用根癌农杆菌法获得转基因水稻植株及其后代[J].遗传学报.1998