毛竹叶中抑菌活性成分的提取及其分析

论文摘要

本课题主要研究了毛竹叶提取物的抑菌活性,抑菌活性成分最佳提取工艺条件,探讨了毛竹叶提取物稳定性以及对活性成分进行初步的分析、分离,并对活性成分进行了抑菌、美白、抗氧化性能的测试。采用滤纸片法、稀释平板计数法、比浊度法,以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为指示菌,考察毛竹叶提取物的抑菌活性,实验结果证明毛竹叶提取物具有很强的抑菌活性。采用滤纸片法,以抑菌圈直径为评价标准,金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为指示菌,优化提取工艺。采用单因素实验确定每个单因素的最佳提取条件分别为:提取温度60℃,乙醇体积分数60 %,液固比20 : 1（mL : g）,提取时间2 h。采用正交试验得出最佳提取工艺条件为:提取温度60℃,乙醇体积分数60 %,液固比20 : 1（mL : g）,提取时间2 h。对毛竹叶提取物做了抗菌谱的测定,结果表明具有较宽的抗菌谱。毛竹叶提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的最低抑菌浓度分别为3.125 g/L、6.25 g/L。对毛竹叶提取物进行稳定性测试,结果表明毛竹叶提取物的抑菌活性具有较好的热稳定性、对紫外光照射稳定,pH 57范围内抑菌效果稳定。对抑菌活性成分进一步分析,用四种不同极性的溶剂对毛竹叶提取物水溶液进行萃取,得到五个萃取部分:石油醚相、三氯甲烷相、乙酸乙酯相、正丁醇相和水相。采用滤纸片法,测定毛竹叶提取物不同萃取部分的抑菌活性,并对抑菌活性进行比较,结果表明:乙酸乙酯相抑菌活性最强。还原显色反应、金属盐类的络合反应、紫外可见光下显色,初步确定乙酸乙酯相主要活性成分为黄酮类化合物。以芦丁为标准样品,建立了芦丁标准工作曲线的回归方程,测定毛竹叶黄酮类化合物的含量,将毛竹叶提取物经过乙酸乙酯、AB-8大孔吸附树脂处理,黄酮类化合物的含量得到很大的提高。乙酸乙酯相经硅胶柱层析、聚酰胺柱层析、AB-8大孔吸附树脂分离,得到三种组分,经过RP-HPLC分析,毛竹叶提取物成分复杂。将毛竹叶提取物加入到化妆品中进行测试,结果表明毛竹叶提取物具有很强的抑菌活性、美黑、抗氧化性能,在化妆品中将会有很好的应用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 综述
• 1.1 前言
• 1.2 化妆品的防腐和防腐剂的研究现状
• 1.2.1 防腐剂的作用机理
• 1.2.2 化妆品防腐剂的种类
• 1.2.3 化妆品防腐剂发展趋势
• 1.3 天然防腐剂种类
• 1.4 天然植物提取物
• 1.4.1 植物活性成分的提取方法
• 1.4.1.1 固液浸提
• 1.4.1.2 微波提取
• 1.4.1.3 超声波提取
• 1.4.1.4 酶法提取
• 1.4.2 植物抗菌化合物的类型
• 1.4.3 植物抗菌化合物的作用方式与作用机理
• 1.4.3.1 作用方式
• 1.4.3.2 作用机理
• 1.4.3.2.1 对菌体细胞结构和功能的破坏
• 1.4.3.2.2 对菌体内能生成的影响
• 1.4.3.2.3 对代谢物质的生物合成及其功能的影响
• 1.5 毛竹叶资源及其生物活性
• 1.5.1 毛竹叶资源
• 1.5.2 毛竹叶的化学成分
• 1.5.3 毛竹叶的应用现状
• 1.6 立题依据
• 第二章 毛竹叶抑菌活性成分提取工艺研究
• 2.1 材料与仪器
• 2.1.1 原料
• 2.1.2 微生物
• 2.1.3 试剂与仪器
• 2.1.4 培养基
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 毛竹叶提取物抑菌活性的测定
• 2.2.2 毛竹叶抑菌活性成分提取工艺的研究
• 2.2.3 毛竹叶抑菌活性成分抗菌谱研究
• 2.2.4 最低抑菌浓度（MIC）的测定
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 毛竹叶提取物抑菌活性的测定
• 2.3.1.1 滤纸片法
• 2.3.1.2 稀释平板计数法
• 2.3.1.3 比浊度法
• 2.3.1.4 小结
• 2.3.2 毛竹叶提取工艺单因素实验
• 2.3.2.1 提取时间
• 2.3.2.2 固液比
• 2.3.2.3 乙醇体积分数
• 2.3.2.4 提取温度
• 2.3.3 正交试验
• 2.3.4 最佳提取条件下毛竹叶提取物抗菌谱研究
• 2.3.5 最低抑菌浓度（MIC）
• 2.4 小结
• 第三章 毛竹叶抑菌活性成分的稳定性及成分分析
• 第一节 毛竹叶抑菌活性成分的稳定性
• 1.1 试剂与仪器
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 样品的制备
• 1.2.2 温度对毛竹叶提取物稳定性的影响
• 1.2.3 pH 值对毛竹叶稳定性的影响
• 1.2.4 UV 对毛竹叶提取物稳定性的影响
• 1.3 结果与讨论
• 1.3.1 热处理对毛竹叶醇提取物抑菌活性的影响
• 1.3.2 pH 值对毛竹叶醇提取物抑菌活性的影响
• 1.3.3 紫外光对毛竹叶醇提取物抑菌活性的影响
• 1.4 小结
• 第二节 不同溶剂萃取物的抑菌效果
• 2.1 试剂与仪器
• 2.2 实验方法
• 2.3 结果与讨论
• 2.4 小结
• 第三节 抑菌活性成分的初步分析
• 3.1 试剂与仪器
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 还原显色反应
• 3.2.2 金属盐类的络合显色反应
• 3.2.3 紫外可见光下显色
• 3.3 结果与讨论
• 3.4 小结
• 第四节 毛竹叶黄酮类化合物含量的测定
• 4.1 试剂与仪器
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 相关溶液的配置
• 4.2.2 最大吸收波长的测定
• 4.2.3 标准曲线的绘制
• 4.2.4 黄酮总含量的测定
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 最大吸收波长的测定
• 4.3.2 标准曲线
• 4.3.3 毛竹叶黄酮类化合物含量的测定
• 4.4 小结
• 第五节 毛竹叶黄酮类化合物的定量分析
• 5.1 试剂与仪器
• 5.2 实验方法
• 5.2.1 AB-8 大孔吸附树脂的预处理
• 5.2.2 样品的处理
• 5.3 结果与讨论
• 5.4 小结
• 第六节 毛竹叶黄酮类化合物的分离
• 6.1 药品与仪器
• 6.2 实验方法
• 6.2.1 硅胶柱层析
• 6.2.1.1 硅胶薄层板的制备
• 6.2.1.2 展开剂的选择
• 6.2.1.3 硅胶柱层析
• 6.2.2 聚酰胺柱层析
• 6.2.3 AB-8 大孔吸附树脂分离
• 6.2.4 高效液相色谱
• 6.3 结果与讨论
• 6.3.1 硅胶柱层析
• 6.3.2 聚酰胺柱层析
• 6.3.3 AB-8 大孔吸附树脂
• 6.4 小结
• 第四章 毛竹叶提取物在化妆品中的应用研究
• 第一节 毛竹叶提取物在化妆品中的防腐效果
• 1.1 试剂与仪器
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 毛竹叶提取物对透明质酸保护能力的测定
• 1.2.2 毛竹叶提取物在膏霜中的应用
• 1.3 结果与讨论
• 1.3.1 毛竹叶提取物对透明质酸的保护能力
• 1.3.2 毛竹叶提取物在膏霜中的应用
• 1.4 小结
• 第二节 美白效果评价
• 2.1 试剂与仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 溶液的配制
• 2.2.2 样品的制备
• 2.2.3 酪氨酸酶抑制率的测定
• 2.3 结果和讨论
• 2.4 小结
• 第三节 抗氧化性效果评价
• 3.1 试剂与仪器
• 3.2 溶液的配置
• 3.3 样品的制备
• 3.4 实验方法
• 3.5 结果与讨论
• 3.6 小结
• 第五章 结论与展望
• 5.1 结论
• 5.2 展望
• 致谢
• 参考文献
• 硕士阶段发表论文