论文摘要
目的:用Nogo-A干预分化后的PC-12细胞,观察其细胞内磷酸化蛋白激酶B(protein kinaseB, PKB)表达情况,探讨Nogo-A抑制中枢神经再生的信号转导通路中是否有PKB的参与。方法:将培养的细胞分成三组。对照组1:PC-12细胞经高糖型DMEM完全培养基培养12天;对照组2:PC-12细胞经含神经生长因子(50ng/ml)的高糖型DMEM完全培养液培养10天后,高糖型DMEM完全培养基培养2天;试验组:PC-12细胞经含神经生长因子(50ng/ml)的高糖型DMEM完全培养液培养10天,高糖型DMEM完全培养基培养2天后,加入Nogo-A干预。实验组又分别根据加入Nogo-A的浓度和干预时间分2个小组。实验组1分别加入50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L终浓度的Nogo-A干预30min,实验组2加入200nmol/L终浓度的Nogo-A分别干预10min,30min,90min。应用蛋白印迹方法检测Nogo-A干预后细胞内磷酸化PKB的表达。结果:与对照组相比较,Nogo-A干预后的PC-12细胞内磷酸化PKB水平明显增高。结论:Nogo-A抑制中枢神经再生的信号转导通路中有PKB的参与。但是Nogo-A通过此通路抑制神经再生的受体是否为NgR1,激活PKB的上游信号分子是PI3K依赖途径还是PI3K非依赖途径等问题都有待进一步研究。