猪卵母细胞种内和种间显微受精相关问题的初步研究

论文摘要

本研究探讨了猪卵母细胞体外成熟、孤雌胚体外培养部分和猪卵母细胞种内及种间显微受精一些相关问题。猪卵母细胞体外成熟部分中探讨了（1）成熟液中促性腺激素的添加方式对猪卵母细胞孤雌激活早期发育影响;（2）体外成熟中不同浓度的半胱氨酸和EGF对猪卵母细胞孤雌激活后早期发育的影响。猪孤雌胚体外培养部分研究了胚胎培养液体积对猪早期孤雌激活胚发育的影响。猪胞浆内显微受精部分包括了（1）不同的激活方法对猪ICSI卵原核形成的影响;（2）不同激活方法对猪ICSI卵早期发育效果的影响;（3）猪精子、食蟹猴精子及水牛精子分别注入猪卵母细胞的原核形成比较;（4）猪精子、食蟹猴精子及水牛精子分别注入猪卵母细胞后ICSI胚发育潜力的比较。试验结果:猪卵母细胞体外成熟部分中（1）促性腺激素的添加方式采用FSH+LH 22h、换液、在含FSH+LH再培养22h;（2）体外成熟液中添加1.2 mmol/L半胱氨酸;（3）体外成熟液中添加10 ng/mL EGF,对猪卵母细胞孤雌激活后早期发育效果较好。猪孤雌胚体外培养部分中化学激活后胚胎培养按平均每个胚胎2-3μL培养液培养,孤雌胚发育效果较好。猪卵母细胞胞浆内显微受精部分中（1）Ion（5min）+6-DMAP（4h）与Ion（5min）+NCSU23（3h）+6-DMAP（4h）所得结果在原核形成率和囊胚形成率上没有显著差异,都可用于猪ICSI卵的人工激活;（2）水牛精子、食蟹猴精子分别注入到猪卵母细胞内,观察到了雌雄原核和精子解聚。（3）水牛精子、食蟹猴精子分别注入到猪卵母细胞,经体外培养发育到了囊胚。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一部分 文献综述部分
• 第一章 猪卵母细胞体外成熟研究进展
• 1.研究概况
• 2.哺乳动物卵母细胞发育成熟及调控
• 3.影响卵母细胞体外成熟的因素
• 4.卵母细胞成熟标准
• 5.卵母细胞体外成熟的研究意义
• 第二章 猪胞浆内显微受精研究进展
• 1.研究概况
• 2.猪胞浆内显微受精的研究历史
• 3.异种显微受精的研究历史
• 4.胞浆内显微受精的操作程序
• 5 影响胞浆内显微受精的因素
• 6.胞浆内显微受精的应用前景
• 7.胞浆内显微受精存在的问题
• 8.展望
• 第三章 本研究的目的和意义
• 第二部分 试验研究部分
• 第一章 成熟液中促性腺激素添加方式、不同浓度的半胱氨酸和表皮生长因子对猪卵母细胞体外成熟后孤雌胚胎早期发育影响
• 1 引言
• 2 材料和方法
• 3 结果
• 4 讨论与小结
• 第二章 培养液体积对猪孤雌胚早期发育的影响
• 1 引言
• 2 材料和方法
• 3 结果
• 4 讨论与小结
• 第三章 不同激活方法对猪ICSI胚体外发育的影响
• 1 引言
• 2 材料和方法
• 3 结果
• 4 讨论与小结
• 第四章 猪和食蟹猴及猪和水牛种间显微受精的初步研究
• 1 引言
• 2 材料和方法
• 3 结果
• 4 讨论与小结
• 第三部分 总结和结论
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表论文情况