S100A14在食管鳞癌中的遗传变异及其功能研究

论文摘要

S100蛋白在肿瘤的发生和转移中起到重要的作用,我们前期通过半定量RT-PCR的方法研究发现S100家族的16个成员在食管癌中存在明显的表达差异,其中包括S100A14。为了进一步明确S100A14在食管癌中的表达差异,研究其表达与临床病理参数之间的关系,本文通过免疫组织化学、Western Blot分析在蛋白水平确证了其在食管癌中的表达变化,并发现S100A14的表达与分化程度明显相关。功能实验研究表明,过表达S100A14可促进细胞与Fibronectin的粘附、侵袭,但可抑制细胞的运动;敲减S100A14可促进细胞的运动。分子机制研究表明S100A14可影响E-cadherin、N-cadherin的表达,关于其发挥功能的确切机制还有待进一步阐明。在本文的第二部分,我们探寻S100A14基因中具有生物学作用的遗传变异、阐明其作用机制、并研究其与食管癌易感性的关系。对30例DNA样品测序以筛查S100A14的SNP位点并通过一系列生物学实验来确定功能性的SNP。测序结果发现S100A14基因存在4个单核苷酸多态,分别位于启动子区（-43A＞G）、5’非翻译区（461G＞A）、3’非翻译区（1493A＞G、1545A＞T）。生物化学实验表明461G＞A变异可影响其所处DNA序列与转录因子p53的结合从而影响了S100A14对p53的负反馈调节。以病例-对照研究方法分析1021个食管癌患者和1253个正常对照中461G＞A遗传变异分布频率的差异,以多变量logistic回归计算的比值比（OR）及其95%可信区限（CI）表示基因型与食管癌易感性的相关程度。结果表明461A等位基因与食管癌发病风险增高相关（OR=1.23,95%CI=1.04-1.46）。461A等位基因与吸烟交互作用可增加食管癌发病风险。以上结果表明S100A14在食管癌细胞的粘附、侵袭和运动等过程中起到重要的作用。S100A14的功能性遗传变异可影响p53的结合与食管癌易感性相关。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一部分 钙结合蛋白S100A14在食管鳞癌中的差异表达及其生物学功能
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 第二部分
• S100A14的遗传变异及其生物学功能
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• S100A14的遗传变异与食管癌遗传易感性
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 文献综述
• 参考文献
• 致谢