多枝柽柳抗炎镇痛抗氧化化学成分研究及其对小鼠皮肤伤口愈合的影响

论文摘要

多枝柽柳（Tamarix ramosissima Ledeb.）为柽柳科植物多枝柽柳的干燥嫩枝,具有解毒,祛风,透热,利尿之功效,主治麻疹不透,感冒发烧,荨麻疹,风湿性腰腿痛,扭伤等。目的对多枝柽柳进行系统的化学成分与药理作用研究,从中找到活性成分或新用途。方法采用柱层析和制备薄层色谱等方法分离出多枝柽柳单体化合物;分别以二甲苯致小鼠耳肿胀模型,醋酸扭体模型,及DPPH自由基清除能力和超氧化阴离子自由基清除能力的模型筛选出多枝柽柳抗炎、镇痛及抗氧化活性部位;建立小鼠全层皮肤切除伤模型,对小鼠进行不同浓度的多枝柽柳提取物灌胃,通过小鼠伤口愈合的情况、大体观察及组织切片HE染色观察多枝柽柳对小鼠皮肤伤口愈合影响。结果1、利用活性导向分离技术,筛选出乙酸乙酯部位（ACT）为多枝柽柳中的活性组分群,采用柱层析和制备薄层色谱等方法从该部位分离得到13个化合物。经波谱学分析以及对照品比较的方法,鉴定了其中8个化合物,它们是:邻苯二甲酸二（2-乙基己）酯（I）,香草酸甲酯（II）,对羟基苯甲酸甲酯（III）,7, 4′-二甲氧基山柰酚（IV）,丁香酸甲酯（V）,丁香酚（VI）,甲基香兰素（VII）,阿魏酸（VIII）。2、以二甲苯致小鼠耳肿胀模型,对多枝柽柳80%乙醇提取物（ET）,石油醚（PET）、乙酸乙酯（ACT）、正丁醇提取物（BT）和水部位（WT）进行抗炎活性研究,小鼠的耳肿胀程度抑制率分别为30.55%、55.74%、37.96%、22.98%、21.87%。以小鼠醋酸扭体模型,对多枝柽柳80%乙醇提取物（ET）,乙酸乙酯部位（ACT）、正丁醇部位（BT）和水部位（WT）进行镇痛活性研究,小鼠扭体次数抑制率分别为29.51%,34.75%,23.28%, 6.56%。以DPPH自由基清除能力和超氧化阴离子自由基清除能力的模型,对多枝柽柳各极性部位以及其中得率较大的单体丁香酚的抗氧化能力进行评价。乙酸乙酯部位对DPPH自由基的半数清除率为26.4μg/mL,对超氧化阴离子自由基清除率为62.7%。丁香酚清除DPPH自由基活性的能力随着浓度的增高而增强,在剂量小于0.04mg/ml的一段清除率随浓度增大变化较大,而在之后趋于缓和;丁香酚对超氧阴离子自由基的清除能力随着浓度的增高而增强,在剂量小于0.12mg/ml的一段清除率随浓度增大变化较大而在之后趋于缓和。3、多枝柽柳乙酸乙酯提取物对小鼠皮肤伤口愈合的影响研究多枝柽柳乙酸乙酯提取物对皮肤创伤小鼠进行灌胃给药,创伤11天后测定未愈合伤口面积,高剂量组（17.68 mm2）,中剂量组（17.90 mm2）,低剂量组（20.18 mm2）和模型组（31.48 mm2）比较,均有显著差异。HE染色切片结果发现,实验组伤口完全愈合,上皮完整,有正常角质层形成,血管少,表皮下大量胶原形成,基本与表皮平行生长;对照组肉芽组织完全充满伤口,表皮完全覆盖,伤口已愈合;未见皮肤附属器。结论化合物I～VII为首次从柽柳属植物中分离得到。多枝柽柳乙酸乙酯部位（ACT）有较强的抗炎活性,乙酸乙酯部位（ACT）和正丁醇部位（BT）有较强的镇痛活性,乙酸乙酯部位（ACT）和丁香酚有较强的抗氧化能力。小鼠皮肤伤口愈合实验结果表明,实验组毛细血管和成纤维细胞增生较对照组明显,并有较好的减轻炎症的作用,说明其对小鼠皮肤伤口愈合有一定的促进作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一部分 多枝柽柳化学成分研究
• 1.1 化学成分预试验
• 1.2 提取与分离
• 1.3 化学成分结构鉴定
• 1.4 结果
• 第二部分 多枝柽柳抗炎、镇痛、抗氧化活性研究
• 2.1 多枝柽柳抗炎活性筛选
• 2.2 多枝柽柳镇痛活性研究
• 2.3 多枝柽柳抗氧化活性研究
• 第三部分 多枝柽柳提取物对小鼠皮肤伤口愈合的影响研究
• 3.1 材料仪器与药品配置
• 3.2 多枝柽柳浸膏小鼠灌胃最大耐受量的测定
• 3.3 小鼠皮肤伤口模型的建立
• 3.4 检测指标与方法
• 3.5 结果
• 讨论
• 附图
• 论文参考文献
• 文献综述
• 综述参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表论文情况
• 个人简历