ShRNA转染沉寂P388D1细胞P2X7受体表达及其经淋巴道转移潜能

论文摘要

目的:通过生物合成shRNA干扰沉寂P388D1细胞P2X7受体的表达,观察其与P388D1细胞淋巴道转移潜能的相关性。方法:1.P388D1细胞P2X7受体表达的鉴定采用RT-PCR,免疫荧光以及流式细胞检测技术。2.ShRNA转染沉寂P388D1细胞P2X7受体表达采用转染试剂将shRNA转染P388D1细胞株。细胞密度达约50%融合时准备转染,方法同转染试剂说明书。3.转染成功的细胞鉴定采用RT-PCR,免疫荧光以及流式细胞检测技术。4.P388D1细胞淋巴道转移实验实验DBA/2小鼠（雌雄各半）24只分为四组,分别为转染P2X7R shRNA组、转染阴性对照shRNA组、兔IgG封闭抗P2X7多克隆抗体组、兔IgG封闭P2X7多克隆抗体阴性对照组。每只受试DBA/2小鼠足垫注射细胞6×105,观察小鼠存活率及肿瘤细胞的转移情况。结果:RT-PCR,免疫荧光以及流式细胞检测技术检测结果显示P2X7受体存在于P388D1细胞膜上。转染成功后DBA/2小鼠淋巴道转移实验观察其抑制肿瘤转移情况,结果表明P2X7R基因表达沉默的P388D1细胞向淋巴结转移率显著低于对照组。结论:P2X7R shRNA干扰P388D1细胞对目的基因P2X7R的表达,产生了RNA干扰现象。DBA/2小鼠淋巴道转移实验证实P2X7受体与P388D1淋巴瘤细胞的淋巴道转移具有相关性。同时为临床治疗淋巴瘤提供了理论依据和线索。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料
• （五） 实验方法
• （六） 结果
• （七） 讨论
• （八） 结论
• （九） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢