古龙酸发酵伴生菌的选育及其条件优化

论文摘要

本研究通过在发酵过程中加入适量葡萄糖,来延长大菌的生长对数期或使大菌出现第二个增长期,从而达到提高产酸菌产酸率的目的。研究结果表明,在第二步发酵过程中加一定量的葡萄糖可以提高糖酸转化率。加葡萄糖的时间为发酵第20-28 h,加葡萄糖量为0.008%,接种量为15%。其中效果最佳的是发酵20 h加葡萄糖,其转化率提高了4.70%。本文确立了一种周期短、效率高的筛选模型,从不同环境样品中分离筛选出三株苏云金芽孢杆菌作伴生菌,菌体复壮后,经过多次筛选,得到一株伴生效果最好的菌株,与生产用产酸菌组成新菌系B15-14,并对其生长特征进行研究。结果表明,新组合菌对比于生产用菌系25-b,其摇瓶发酵周期缩短8h,转化率提高10.21%,且遗传性稳定。为了更好发挥新组合菌系B15-14的发酵潜能,我们对其单因素发酵条件进行研究。结果表明,最适底糖浓度为7%；装液量以20-30 ml（250 ml摇瓶）为最适；温度为29-33℃,31℃为最适；起始pH值范围为6.0-7.5,最适pH值为7.0。利用均匀设计的方法对新菌系B15-14多因素最适条件进行优化。结果表明,在我们选定的范围内,最适发酵培养基成分浓度为：玉米浆浓度3.02%,KH2PO4浓度0.25%,MgSO4浓度0.03%,尿素浓度0.43%。经检验后,优化组的转化率达到85.28%。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第1章 绪论
• 1.1 古龙酸的概述
• 1.1.1 古龙酸的结构及其理化性质
• 1.1.2 古龙酸的功能与应用
• 1.2 维生素C的性质、应用及工业化生产
• 1.2.1 维生素C的理化性质及其生物学功能
• 1.2.2 维生素C的应用及工业化生产
• 1.3 维生素C的生产
• 1.3.1 浓缩提取
• 1.3.2 化学合成
• 1.3.3 生物发酵
• 1.4 大小菌间相互作用关系及其微生态调控的研究
• 1.4.1 大小菌生理生化特性
• 1.4.2 大小菌生物学特性
• 1.4.3 大小菌相互作用关系
• 1.4.4 大小菌间微生态调控
• 1.5 本论文的目的和内容
• 第2章 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 菌种
• 2.1.2 培养基
• 2.1.3 试剂与仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 菌株培养
• 2.2.2 实验室种子液制备
• 2.2.3 种子罐一、二、三级种液的制备
• 2.2.4 产酸实验流程图
• 2.2.5 分析方法
• 第3章 发酵工艺调节
• 3.1 装液量为200 ml的产酸实验
• 3.1.1 确定合适的加葡萄糖时间
• 3.1.2 确定合适的加葡萄糖量
• 3.1.3 确定接种量
• 3.2 装液量为80 ml的产酸实验
• 3.3 小结
• 第4章 菌株筛选方法研究
• 4.1 实验方法
• 4.1.1 原始的大小菌搭配方法
• 4.1.2 离心液的制备
• 4.2 实验结果
• 4.2.1 离心法分离大小菌的可行性分析
• 4.2.2 离心转数和接种量对小菌产酸活力的影响
• 4.2.3 大菌接入量对小菌产酸活力的影响
• 4.2.4 离心液的初始糖浓度和上清液接入量对小菌产酸活力的影响
• 4.2.5 过滤法
• 4.3 小结
• 第5章 伴生菌的筛选及其条件优化
• 5.1 实验方法
• 5.1.1 苏云金杆菌的分离纯化
• 5.1.2 菌体复壮
• 5.1.3 生长曲线测定
• 5.2 大菌筛选实验
• 5.2.1 复壮前伴生菌的筛选
• 5.2.2 复壮后伴生菌的筛选
• 5.3 遗传稳定性实验
• 5.4 组合菌生长特征
• 5.4.1 新菌系的形态特征
• 5.4.2 种子生长曲线
• 5.4.3 发酵生长曲线
• 5.5 新组合菌的条件优化
• 5.5.1 L-山梨糖浓度对发酵的影响
• 5.5.2 通气量对发酵的影响
• 5.5.3 培养温度对新菌种转化率的影响
• 5.5.4 起始pH对新菌系生长代谢的影响
• 15-14发酵培养基优化'>5.6 Vc新混合菌系B_15-14发酵培养基优化
• 5.7 小结
• 第6章 结论与展望
• 6.1 结论
• 6.2 展望
• 参考文献
• 硕士期间发表论文
• 致谢