室旁核对大鼠心交感传入反射的调控作用及其机制研究

论文摘要

背景心交感传入反射（cardiac sympathetic afferent reflex,CSAR）是一种交感兴奋性反射,心脏表面应用缓激肽、辣椒素或过氧化氢可刺激神经末梢,兴奋通过心交感传入神经到达中枢,经中枢整合后反射性地引起交感传出活动增强和动脉血压升高。心肌缺血时产生的化学物质也可以引起CSAR。慢性心力衰竭（chronic heart failure,CHF）是严重危害人类健康的常见病。交感神经系统活动过度增强是CHF的重要特征之一,是加速病情恶化并使存活期缩短的重要因素。CHF时CSAR的病理性增强是导致交感活动亢进的重要原因之一,在CHF发病机制中起了极其重要的作用。室旁核（paraventricular nucleus,PVN）是心血管活动整合的重要中枢结构之一,我们以前研究表明PVN内血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）和AT1受体调节正常大鼠和犬的CSAR,并与CHF状态下过度增强的CSAR有关。最近我们发现PVN内NAD（P）H氧化酶来源的活性氧,尤其是超氧阴离子和过氧化氢介导了AngⅡ对CSAR的调节作用。虽然PVN的信号分子在CSAR调节中起极其重要的作用,但至今对CSAR的中枢传导通路仍不够了解。进一步探讨PVN在CSAR中枢通路中的作用及其调控机制不仅有重要理论意义,而且可为寻找新的防治CHF药物提供线索和奠定理论基础。目的1研究PVN是否为CSAR反射弧中枢通路的重要结构之一2探讨PVN中γ-氨基丁酸（GABA）对CSAR的调节作用及其受体机制方法实验在去压力感受器神经支配和双侧迷走神经切断的麻醉SD大鼠上进行,采用立体定位仪进行大鼠双侧PVN定位、核团损毁和微量注射,利用Powerlab生物信号采集系统,在体记录肾交感神经放电活动（RSNA）、平均动脉压（MAP）和心率（HR）,以心室表面应用缓激肽（BK）和辣椒素引起RSNA的变化值作为评价CSAR的指标。1可逆性抑制或兴奋PVN神经元对CSAR、RSNA和MAP的影响大鼠随机分为3组,每组7只,分别在双侧PVN内注射生理盐水、8.5 nmol利多卡因和1 nmol L-谷氨酸。观察注射前、注射后5 min和30 min的CSAR、RSNA和MAP的变化。2电损毁PVN对CSAR、RSNA和MAP的影响大鼠随机分为PVN损毁组和假损毁组,每组6只,分别观察损毁前和损毁后10 min的CSAR、RSNA和MAP的变化。3选择性损毁PVN神经元胞体对CSAR、RSNA和MAP的影响大鼠随机分为2组,每组6只,分别在双侧PVN内注射生理盐水、2 nmol海人酸,分别观察注射前和注射后90 min的CSAR、RSNA和MAP的变化。另外还观察PVN注射海人酸1周后对CSAR的影响（n=3）。为排除药物扩散至PVN邻近部位产生效应的可能性,另取3只大鼠,观察下丘脑前区微量注射2 nmol海人酸对CSAR的影响。4 GABAA受体激动剂和拮抗剂对CSAR、RSNA和MAP的影响大鼠随机分为6组,每组6只,分别在双侧PVN内注射生理盐水、3种剂量的GABAA受体激动剂isoguvacine（0.1 nmol,1 nmol或10nmol）、GABAA受体拮抗剂gabazine（0.1 nmol）和isoguvacine（10nmol）+gabazine（0.1 nmol）（gabazine预处理10 min后注射isoguvacine）,观察其对CSAR、RSNA和MAP的影响。PVN微量注射药物10 min后测定CSAR。5 GABAB受体激动剂和拮抗剂对CSAR、RSNA和MAP的影响大鼠随机分为6组,每组6只,分别在双侧PVN内注射生理盐水、3种剂量的GABAB受体激动剂baclofen（0.01 nmol,0.1 nmol或1nmol）、GABAA受体拮抗剂CGP-35348（10 nmol）和baclofen（1 nmol）+CGP-35348（10 nmol）（CGP-35348预处理10 min后注射baclofen）,观察其对CSAR、RSNA和MAP的影响。PVN微量注射药物10min后测定CSAR。6 PVN内源性GABA对CSAR、RSNA和MAP的影响大鼠随机分为5组,每组6只,分别在双侧PVN内注射生理盐水、GABA转氨酶抑制剂vigabatrin（10 nmol）、vigabatrin（10 nmol）+gabazine（0.1 nmol）、vigabatrin（10 nmol）+CGP-35348（10 nmol）、和vigabatrin（10 nmol）+gabazine（0.1 nmol）+CGP-35348（10 nmol）,vigabatrin注射30 min后再应用gabazine和/或CGP-35348,观察其对CSAR、RSNA和MAP的影响。PVN微量注射vigabatrin或生理盐水70 min后测定CSAR。结果1双侧PVN内微量注射利多卡因抑制PVN神经元活动对基础RSNA和MAP无显著影响,但可消除CSAR;而应用L-谷氨酸兴奋PVN神经元则增强CSAR、增加基础RSNA和MAP。2双侧电损毁PVN不可逆地消除CSAR,而对基础RSNA和MAP无显著影响。3双侧PVN注射海人酸选择性损毁神经元胞体,引起基础RSNA增加和MAP升高,持续约60 min,继后保持在正常水平,90 min时测定CSAR发现海人酸化学损毁PVN后消除CSAR。下丘脑前部注射海人酸则对CSAR无显著影响。4双侧PVN内微量注射GABAA受体激动剂isoguvacine引起剂量依赖性的基础RSNA减少、MAP降低和CSAR减弱,其效应可被GABAA受体拮抗剂gabazine阻断。Gabazine增加基础RSNA和MAP,但对CSAR无显著影响。5双侧PVN内微量注射GABAB受体激动剂baclofen剂量依赖性减弱RSNA、降低MAP,并抑制CSAR,大剂量baclofen可完全阻断CSAR。GABAB受体拮抗剂CGP-35348则产生相反的效应,并可阻断baclofen的作用。静脉注射相同剂量的baclofen对RSNA、MAP和CSAR无显著影响。6双侧PVN内微量注射特异性的GABA转氨酶抑制剂vigabatrin,显著降低RSNA和MAP,消除CSAR。应用GABAA受体拮抗剂gabazine或GABAB受体拮抗剂CGP-35348预处理,均可部分抑制vigabatrin的作用,而联合应用gabazine和CGP-35348则可完全阻断vigabatrin的作用。结论1应用利多卡因抑制PVN神经元活动可消除CSAR,而应用L-谷氨酸兴奋PVN神经元则增强CSAR。非选择性电损毁PVN或选择性化学损毁PVN神经元胞体均可完全阻断CSAR。表明PVN是CSAR反射弧重要整合中枢之一。2激活PVN中GABAA受体使CSAR减弱,而激活GABAB受体则完全消除CSAR。阻断GABAA受体对CSAR无显著影响,但阻断GABAB受体增强CSAR。PVN中内源性GABA水平升高可抑制CSAR,其效应是通过GABAA和GABAB受体共同介导的。表明PVN中GABA是调控CASR的重要神经递质或调质,其抑制CSAR作用是由GABAA和GABAB受体受体共同介导的。

论文目录

• 英文缩略语
• 论文摘要（中文）
• 论文摘要（英文）
• 前言
• 第一部分 室旁核在大鼠心交感传入反射中枢通路中的作用
• 引言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• A和GABA_B受体对心交感传入反射的调节作用'>第二部分 室旁核中GABA_A和GABA_B受体对心交感传入反射的调节作用
• 引言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 结论
• 综述:室旁核对心血管活动调节作用的研究进展
• 参考文献
• 发表研究论文及科研工作总结
• 附:2篇第1作者SCI论文
• 论文1 Paraventricular Nucleus Is Involved in the Central Pathway of Cardiac Sympathetic Afferent Reflex in Rats
• A and GABA_B Receptors in Paraventricular Nucleus in Rats'>论文2 Regulation of Cardiac Sympathetic Afferent Reflexby GABA_A and GABA_B Receptors in Paraventricular Nucleus in Rats
• 致谢