水牛痒螨和兔痒螨形态学比较及ITS-2序列分析

论文摘要

痒螨病是由痒螨科痒螨属（Psoroptes）的痒螨寄生于动物皮肤表面引起的一种接触性、传染性皮肤病。传统分类学根据形态、寄生宿主等特征将痒螨分为兔痒螨（Psoroptes cuniculi）、水牛痒螨（Psoroptes netalensis）、马痒螨（Psoroptes equi）等5个种。但有学者认为马痒螨是最先命名的，所有痒螨都是马痒螨的变种，并对原来的分类依据提出质疑，因此有学者开始采用分子生物学方法对痒螨进行分类研究。本文采用形态学与分子生物学结合的方法对采自四川的水牛体表和兔耳道内的痒螨进行系统分类学研究。研究结果表明，利用形态学不能区分水牛痒螨和兔痒螨的幼螨和若螨，但可以区分水牛痒螨和兔痒螨的雄螨：水牛痒螨雄螨尾部瘤状突起上有长刚毛3根，长短相似，较粗呈长柳叶状；短刚毛2根，较细；瘤状突起的末端稍尖。兔痒螨雄螨尾部瘤状突起长有5根刚毛，其中3根短刚毛，2根长刚毛，均为圆柱状，且2根长刚毛着生部位有明显的小结节，瘤状突起末端稍钝。首次成功克隆出传统分类学鉴定为水牛痒螨的ITS-2序列（登录号为EF025929）及形态学鉴定为兔痒螨的中国分离株的ITS-2序列（登录号为EF025930），对ITS-2序列的分析表明：水牛痒螨和兔痒螨的ITS-2基因核苷酸序列同源性不高，为89.10％。将水牛痒螨ITS-2基因序列与GenBank中注册的日本和瑞士的兔、绵羊痒螨分离株对比发现：同源性在87.80-89.50％之间；将兔瘁螨ITS-2基因序列与GenBank中注册的日本和瑞士的兔、绵羊痒螨分离株对比发现：同源性在95.90-100.00％之间，明显高于水牛瘁螨与其它痒螨分离株的同源性。利用MEGA2.0软件，选用疥螨ITS-2序列为外群，以不同构建方法构建系统树。构建的系统树可见水牛痒螨在每种系统树上都与兔痒螨等距离较远，自举值较高（84，98，86，84）。而兔痒螨与其他痒螨在各种系统树上始终聚居在一起，自举值差异较大（52，81，84，55）。通过形态学比较和ITS-2序列分析，我们认为水牛痒螨和兔痒螨可能为痒螨属中两个独立的虫种。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1.前言
• 1.1 动物痒螨病概述
• 1.1.1 动物痒螨病的流行特点及危害
• 1.1.2.痒螨病病原学及其诊断方法
• 1.1.3 螨病的诊断方法及控制
• 1.2 核基因组rDNA ITS-2在螨类分类学上的运用
• 1.2.1 分子系统学与形态学的比较
• 1.2.2.核糖体DNA内部转录间隔区（ITS）的研究
• 1.2.3.前景展望
• 1.3 动物痒螨分类学研究进展
• 1.3.1.形态特征研究
• 1.3.2.分子生物学分类研究
• 1.4 本研究的目的和意义
• 2.材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.1.1 虫株来源
• 2.1.2 主要仪器设备
• 2.1.3 主要试剂及载体
• 2.1.4 培养基及常用液体
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 形态学研究
• 2.2.2 分子系统学研究
• 3.结果与分析
• 3.1.形态学观察结果
• 3.1.1 水牛痒螨
• 3.1.2 兔痒螨
• 3.2.分子生物学鉴定
• 3.2.1 水牛痒螨和兔痒螨中国分离株ITS-2基因同源性分析和系统树的构建
• 3.3 讨论与分析
• 3.3.1 形态学比较
• 3.3.2 个体表型水平
• 3.3.3 ITS-2序列分析
• 3.3.4 序列测定方法的选择
• 3.3.5 形态分类学与系统分类学的统一
• 4.结论
• 参考文献
• 致谢
• 在读期间发表论文情况